β半乳糖苷酶活性的整体封片免疫组化检测实验
实验方法原理 实验材料 小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液（PBS)冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材 5 mL或10 mL的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5〜2 mL的离心管转动平台染色用密闭箱附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片纤光照明的解剖显微镜显微照相仪实验步骤 1)在冰冷的PBS里解剖胚胎或组织。置β-半乳糖苷酶固定剂，室温至合适的时间。以下是固定小鼠胚胎和组织的指导：外植体和E 6.5到E 7.5胚胎5〜10 min； E 8到E 9.5胚胎或尾巴切面 15〜30 min； E 10 到 E 12.5 胚胎 30 min〜1.5 h; E 13 到 E 14.5 胚胎 2 h; E 15.5 或更大的组织则需要解剖出来或切一半，然后固定2 h。新生幼鼠或更大的小鼠的灌注需要在解剖特定组织染色之前进行。2) 用β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液室温洗......阅读全文
β半乳糖苷酶的测定实验
实验方法原理β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖实验材料β-半乳糖苷酶试剂、试剂盒磷酸钾邻硝基苯基 β-D-半乳糖苷仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」实验混合物：以 0.02 ml 酶溶液起始，然后 25℃ 下，在 405 nm处吸收值升
免疫组化的实验试剂及实验步骤
一、试剂（1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。（2）0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠 3g，柠檬酸 0.4g。（3）0.
动物组织β半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂盒
动物组织β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂是一种旨在使用化学方法，快速有效地裂解动物细胞，通过高速离心，获得澄清细胞裂解悬液，在β-半乳糖苷酶反应体系里，以人工合成的二恶二酮类化合物作为发光底物，水解所产生的发光产物，通过发光探测仪（Luminometer）测定其相对冷光单位（RLU）的变化，
关于乳铁蛋白酶活性的介绍
乳铁蛋白可在某些催化反应中充当酶的功能。乳铁蛋白和核糖核酸酶A之间的某些基序有显著相似性。乳铁蛋白具有DNA结合特征，并可以在特定DNA序列的转录激活中发挥作用或作为信号转导介质。在所有的牛乳蛋白中，乳铁蛋白具有最高的淀粉酶和ATP酶活性，然而，它们并不是唯一的酶促活性。乳铁蛋白表现出的各种各样
免疫组织化学概念和基本原理
1、概念和基本原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定位、定性、半定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性和组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜的现像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物
免疫组化的细胞凋亡检测
细胞凋亡原理：正常凋亡细胞通过检测凋亡细胞DNA片段进行染色，正常的、人为造成凋亡的细胞很少能够被染色。以甲基绿复染，便于从形态学上分辨评估正常细胞和凋亡细胞。 首先确定目标凋亡细胞的组织部位（如眼球组织，由于玻璃体结构内没有细胞核，因此看不到凋亡，在整个组织的最外面有单层视网膜细胞，因此只能
乳铁蛋白的抗病毒活性的介绍
乳铁蛋白可以帮助机体抵御多种病毒的感染。由轮状病毒、肠道病毒和腺病毒引起的肠道感染都可以用乳铁蛋白进行治疗，在感染发生初期，乳铁蛋白可以抑制腺病毒的复制，阻止病毒吸附于靶细胞上从而防止感染。在研究引起感染性腹泻的诺如病毒时发现，乳铁蛋白可以减轻细胞毒素的损伤、降低病毒细胞的数量、阻止病毒与细胞的
免疫组化实验方法
一、免疫组化（Immunohistochemistry,IHC/ Immunocytochemistry, ICC）原理免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 （荧光素、酶、金属离子、同位素） 显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质
石蜡切片免疫组化实验
实验方法原理 根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入底物显色。实验材料 石蜡切试剂、试剂盒 PBS柠檬酸盐缓冲液蒸馏水增强剂酶标抗鼠 兔聚合物苏木素酒精二甲苯树胶盐酸二氨基联苯胺仪器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架显微镜胶头
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法免疫组化可应用于：（1）确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究；（2）诊断异常细胞，指导治疗。实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法 卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法 链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物（SABC）法
淀粉葡糖苷酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶，葡聚糖 1，4-α-葡糖苷酶通过水解末端 1，4- 和 1，6 连接的 α-1，6-葡糖苷键释放 β-
淀粉葡糖苷酶的测定实验
实验方法原理4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶，葡聚糖 1，4-α-葡糖苷酶通过水解末端 1，4- 和 1，6 连接的 α-1，6-葡糖苷键释放 β-D-葡萄糖。这个实验与 α-葡糖苷酶类似，只是用糖原代替麦芽糖作为底物。一段时间以后（5 min）反应停止，葡萄糖被测出与己糖激酶/6-磷酸葡糖脱氢酶偶联
生熟乳的快速检测
检测意义：在牛乳的检测中，有时会遇到生熟乳的判断。可按以下方法加以检测。本方法仅用于纯乳检测。操作方法：取5mL牛乳于试管中，加入4滴 A试液，摇匀，再加入4滴B试液，摇匀。10分钟内观察结果。生乳或仅加热到78℃以下的乳呈青蓝色；加热到79～80℃的乳在半分钟后呈淡灰青色；加热到80
关于病理切片的染色和封片的介绍
病理切片常用的染色方法是苏木素-伊红（Hematoxylin-Eosin）染色法，简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料，可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色，如细胞核中的染色质等；伊红是一种酸性染料，可使组织中的嗜酸性物质染成红色，如多数
细胞因子生物学活性检测实验－古朵实验√
白细胞介素1是一种重要的细胞因子，主要由单核-巨噬细胞产生，IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能，而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺激下表达IL
细胞活性和细胞毒性检测的实验方法
细胞数量确定1.将细胞悬浮液（100μL/孔）接种在96洞孔板中。将板在潮湿的培养箱中预孵育（例如，在37℃，5％CO2下）。2.向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡，因为它们会干扰O.D.读数。3.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。4.使用酶标仪测量450 nm处的吸光
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
原位染色技术 实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
原位染色技术 实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。
免疫组化专题：流式细胞仪检测技术实验（一）
标签： 流式 细胞仪流式细胞仪（flow cytometer）是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置，由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物，因此，用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪，是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。实验方法
免疫组化专题：流式细胞仪检测技术实验（二）
⑤主机设定：一般是已设定好的适合测定淋巴细胞的条件，包括探测器的电压。探测器的电压是调空光电倍增管所能检测荧光密度的范围。⑥选择检测的波长和表达方式（plot）：如果用一种荧光抗体，一般选直方图（histogram）；如果用两种荧光抗体，常选点状二维图（dot plot）或轮廓线图（contour
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验——原位染色技术
β-半乳糖苷酶的原位染色可应用于：（1）确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞；（2）来示踪细胞与细胞相互作用。实验方法原理β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。实验材料β-gal表达质粒转染细胞试剂、试剂盒D-PBSA染色液
Nature子刊：半乳凝素可直接对抗伪装细菌
科学家发现，我们的身体能产生一个蛋白质家族，它们能识别并杀死那些糖涂层非常类似于我们自身细胞的细菌。 这些蛋白质称为半乳凝素（galectins），它们能够从各种各样的致病细菌中识别出糖类，并有可能被作为抗生素来治疗某些感染。相关研究结果发表在2014年5月11日的《Nature Chemic
酶活性的测定实验
酶活性的测定可应用于：（1）酶动力学的研究；（2）酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示，或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度，取决于指定的条件。SI单位是katal，1 katal = 1 mol /s，更实际
酶活性的测定实验
连续性检测 实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示，或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量
免疫金银法（IGSS）操作指南
一、基本原理免胶体金检测技术是用金属离子和金属蛋白复合物应用免疫组化原理检测组织内抗原抗体的技术，常用胶体金（铁、汞等）重金属离子。由于胶体金容易制成各种大小的颗粒且有很高的电子密度及分辨率，又不影响抗体的活性，因此既可用于免疫组化又适于免疫电镜技术。二、操作步骤1、脱蜡至0.05mol/L TBS
免疫金银法（IGSS）操作指南
一、基本原理免胶体金检测技术是用金属离子和金属蛋白复合物应用免疫组化原理检测组织内抗原抗体的技术，常用胶体金（铁、汞等）重金属离子。由于胶体金容易制成各种大小的颗粒且有很高的电子密度及分辨率，又不影响抗体的活性，因此既可用于免疫组化又适于免疫电镜技术。二、操作步骤1、脱蜡至0.05mol/L TBS
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯（Calcein-AM）是一种胞浆荧光标记物，本身无荧光，渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育，再加Fluoro-Quen
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯（Calcein-AM）是一种胞浆荧光标记物，本身无荧光，渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育，再加Fluoro-Quench试剂（一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化
Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯（Calcein-AM）是一种胞浆荧光标记物，本身无荧光，渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育，再加Fluoro-Quen