糖的硅胶G薄层层析实验
实验方法原理 硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉,约含12 %-13 %的石膏,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上,利用它对各种物质的吸附能力不同,再用适当的溶剂系统展层,使不同的物质得以分开,使用显色剂显色,得到不同的 Rf 值。糖在硅胶 G 薄层上的移动速度与糖的分子量和羟基数有关,经过适当的溶剂展开后,糖在薄层上的移动速度是戊糖>己糖>双糖>三糖。实验材料 糖标准溶液 乙酸乙酯 乙酸 氯仿 甲醇 硫酸 二苯胺 苯胺 磷酸 丙酮试剂、试剂盒 多糖仪器、耗材 层析缸 硅胶 G 板 毛细管 烘箱 电吹风机 试管 试管架实验步骤 溶液配制:1 . 糖标准溶液: 木糖、葡萄糖、果糖和蔗糖10 mg/ml 水溶。 2 . 样品液:多糖的水解液。 3 . 展开剂: ①乙酸乙酯∶乙酸∶水=2∶1∶1;②氯仿∶甲醇=60∶40(V/V)。 4 . 显色剂: ①25%~50%硫酸;②二苯胺1......阅读全文
薄层层析操作关键点
薄层层析操作关键点1、铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀
什么叫薄层层析法
薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度
薄层层析分离原理
薄层层析分离是把支持剂均匀涂布于支持板(常用玻璃板和涤纶布等)上形成薄层,待分离样品点在支持板上,然后用相应的溶剂进行展开,使样品中各组分得到分离的过程。薄层层析分离根据固定相支持剂的不同,分薄层吸附层析分离、薄层分配层析分离、薄层离子交换层析分离和薄层凝胶层析分离等。一般实验中应用较多的是薄层吸附
薄层层析,高效液相层析各有什么特点
纸层析:英文为thin layer chromatography 又称薄层色谱,色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术,属固—液吸附色谱,兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又
纸层析和柱层析薄层层析高效液相层析各有什么特点
纸层析:英文为thin layer chromatography 又称薄层色谱,色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术,属固—液吸附色谱,兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又
什么是薄层层析板,如何利用薄层层析版来鉴定化合物
什么是薄层层析板,如何利用薄层层析版来鉴定化合物 活化的目的是除除硅胶中吸附的水分子,增加硅胶板的吸附能力;一般刚打开的塑料封装的可以不活化,打开放置一段时间后再用是需要活化,105度烘30min即可。 化工行业上的名词“硅胶板”只是一个简称,其全称应该叫薄层层析硅胶板,也叫
什么是薄层层析板,如何利用薄层层析版来鉴定化合物
什么是薄层层析板,如何利用薄层层析版来鉴定化合物活化的目的是除除硅胶中吸附的水分子,增加硅胶板的吸附能力;一般刚打开的塑料封装的可以不活化,打开放置一段时间后再用是需要活化,105度烘30min即可。化工行业上的名词“硅胶板”只是一个简称,其全称应该叫薄层层析硅胶板,也叫高抗撕硅胶板它用高纯度薄层层
关于薄层层析法的应用介绍
广泛应用于石油、化工、医药、生化等方面。样品用量一般为几至几百微克,是一种较实用、有效的微量分离分析方法。此法也可用于分离制备较大量的样品,即使用较大较厚的薄层板,将样品溶液在起始点处点成条带状,这样可以分离毫克量样品。
氨基酸的薄层层析(TLC)
【实验原理】聚酰胺薄膜层析是60年代以后发展起来的一种新的层析方法,特别适用于氨基酸及其衍生物的分析。具有灵敏度高、分辨率强、操作方便快捷等特点。聚酰胺是一类化学纤维素原料,即锦纶(尼龙)。由乙二酸和乙二胺聚合而成的,称锦纶66。 由于分子中含有大量的酰胺基团,故称聚酰胺。聚酰胺薄膜是在涤纶片基
旋转薄层层析的概念和原理
中文名称旋转薄层层析英文名称rotating thin-layer chromatography定 义用硅胶板等薄层析材料代替滤纸,在圆形层析材料距圆心适当距离位置处点样后置于离心轴上,在离心力作用下,溶剂借离心力向外周移动,能加快层析速度的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法
薄层层析分离中的点样
薄层层析分离中的点样是将经离心机处理后的样品点在薄层的特定部位,点样的好坏直接影响分离效果。点样可用玻璃毛细管或微量移液管等。一、点样位置:1、上行展开法点样一般在距薄层下端4~125px处。2、下行展开法点样一般在距薄层上端6~200px处。3、双向展开法点样处应位于距薄层右侧边125px与距底边
关于薄层层析法的相关介绍
薄层层祈法又称“薄层色谱分析法”。把吸附剂和支持剂均匀涂布在玻璃或塑料板上形成薄层后进行色层分离的分析方法。将检材中不同种类的化合物分离后,根据分离的各组分的Rf值或荧光特性可确定各组分的种类。根据斑点的面积,配合薄层扫描仪可测定各组分含量。样品用量少,分析速度较快,设备简单。分离过程中对混合物
旋转薄层层析的基本概念
中文名称旋转薄层层析英文名称rotating thin-layer chromatography定 义用硅胶板等薄层析材料代替滤纸,在圆形层析材料距圆心适当距离位置处点样后置于离心轴上,在离心力作用下,溶剂借离心力向外周移动,能加快层析速度的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法
薄层层析分离中的点样
薄层层析分离中的点样是将经离心机处理后的样品点在薄层的特定部位,点样的好坏直接影响分离效果。点样可用玻璃毛细管或微量移液管等。一、点样位置:1、上行展开法点样一般在距薄层下端4~125px处。2、下行展开法点样一般在距薄层上端6~200px处。3、双向展开法点样处应位于距薄层右侧边125px与距底边
Protein-A--G亲和层析的原理
对于IgG的纯化,大部分情况下我们都会选择使用Protein A或Protein G进行亲和层析。因为它们对于IgG的Fc段具有特异性的亲和作用,而对于其他杂蛋白没有或者只有很弱的结合。通常,仅仅凭借Protein A或Protein G一步亲和层析就可使蛋白纯度达到≥90%。
薄层层析操作要点有哪些?
1、铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的
薄层层析板常用制备方法
薄层层析板制备方法有很多,有手工的,也有机械的。如果薄层层析板用量较少,可以用手工的,如果用量较大,还是用机械的更加方便快捷!下面先介绍一下配置方法:1. CMC-Na溶液的配置:一般其浓度为0.3~0.5%,根据自己经验而定(我习惯用0.4%的)。具体方法如下:先将预用的水加热至60~70℃,然后
薄层层析显色剂如何选择
1.如果灵敏度要求不高,可以加热碳化显色。 2.必须要告诉你的化合物结构,才可以根据特殊结构选择显色剂。如有共轭体系可以照紫外显色;如含有-NH2可用茚三酮显色等等。至于其他结构如含有糖类,酚类都有相应的比较适合的显色剂。
薄层层析板常用制备方法
薄层层析板制备方法有很多,有手工的,也有机械的。如果薄层层析板用量较少,可以用手工的,如果用量较大,还是用机械的更加方便快捷!下面先介绍一下配置方法:CMC-Na溶液的配置:一般其浓度为0.3~0.5%,根据自己经验而定(我习惯用0.4%的)。具体方法如下:先将预用的水加热至60~70℃,然后加入C
常见色层分析薄层层析
薄层层析在玻璃片、金属箔或塑料片上铺上一层约1~2毫米的支持物,如纤维素、硅胶、离子交换剂、氧化铝或聚酰胺等,根据需要做不同类型的层析。聚酰胺薄膜是一种特异的薄层,将尼龙溶解于浓甲酸中,涂在涤纶片基上,当甲酸挥发后,在涤纶片基上形成一层多孔的薄膜,其分辨力超过了用尼龙粉铺成的薄层。薄层层析较纸层析优
关于吸附层析法的吸附剂硅胶的介绍
层析用硅胶为一多孔性物质,分子中具有硅氧烷的交链结构,同时在颗粒表面又有很多硅醇基。硅胶吸附作用的强弱与硅醇基的含量多少有关。硅醇基能够通过氢键的形成而吸附水分,因此硅胶的吸附力随吸着的水分增加而降低。若吸水量超过17%,吸附力极弱不能用作为吸附剂,但可作为分配层析中的支持剂。对硅胶的活化,当硅
免疫球蛋白G(IgG)的纯化——蛋白A交联琼脂糖凝胶亲和层析
实验步骤 蛋 白 A 通 常 用 于 人(除 IgG3 夕 h 小 鼠 IgG1 结合力也较弱)、兔 、豚鼠和猪抗体的纯化。材 料腹 水 或 M Ab上 清(单 元 1. 4)PBS, pH8. O和pH7. 3lmol/L NaOH蛋 白 A 交联琼脂糖凝胶CL-4B (Pharmacia Bio
如何使用ph梯度萃取法提取分离大黄中蒽醌类化合物
实验原理:大黄为泻下、清热解毒、活血化瘀中药,有“推陈致新”的作用。品种繁多,质优者为蓼科植物掌叶大黄(Rheum Palmatum L.)。药用大黄(Rheum officinale Baill)和唐古特大黄(R·tang uticum Maxim ex Reg)的根。大黄中具有泻下作用的成分是几
硅胶填料在层析技术中的原理是什么
一.什么是硅胶: 硅胶是一种高活性吸附材料,属非晶态物质,其化学分子式为mSio2·nH20,,不溶于水和任何溶剂,无毒无味,化学性质稳定,除强碱、氢氟酸外不与任何物质发生反应,各种型号的硅胶因其制造方法不同而形成不同的微孔结构,硅胶的化学组份和物理结构,决定了它具有许多其他同类材料难以取代得
关于薄层层析的原位扫描法介绍
原位扫描法,将展开后的薄层板放在光密度计内,以一定波长的光照射,同时使斑点移过光路,由于斑点对光的吸收,可绘出峰形曲线,由峰面积与标准样品的吸收相比较而求出含量。
关于薄层层析法制板的相关介绍
铺制薄层板时,要求基底板洁净平整,可用干法或湿法铺制。现常用湿法制板,即将吸附剂和粘合剂(如烧石膏)按一定比例混合,加入适量水调匀,用涂布器将此匀浆缓慢地移过基底板,放置晾干,再经适当烘烤活化后即可使用。如不加粘合剂和水,直接将吸附剂均匀地铺成薄层,则为干法制板。现在市场上已有各种制好的薄层板出
薄层层析中展开剂的选择
薄层层析中展开剂的选择: 1)主要根据极性的不同来选择流动相展开剂。各种展开剂按其极性不同排序为:烷烃
薄层层析的洗脱测定法介绍
洗脱测定法,将展开后的组分斑点处的吸附剂刮下,用适宜溶剂将组分洗脱溶出,然后用适当方法进行定量测定。常用方法为比色法、紫外-可见分光光度法,也可用电化学分析法等。
薄层层析中常见的问题有哪些
拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,
离心薄层层析仪的结构特点
1. 主体离心机和LBC-Ⅰ结构相同,但将原石英玻璃盖板换为 普通玻璃盖板。2. 挂式分液漏斗配以适当的导管、阀门、支架、流量计等制流量,达到供给样品与控制洗脱剂需要量之目的。取消LBC-Ⅰ之微量泵。3. 取消LBC-Ⅰ型之紫外灯。由于这些特点,它于LBC-Ⅰ型的性能有基本一致处,但也有些不同之处,