前列腺原位肿瘤模型的建立实验

实验方法原理 10只BALB/C裸鼠前列腺背侧包膜内注入携带红色荧光蛋白(RFP)的前列腺癌PC-3细胞(PR7细胞)悬液20μL,第2、4、6、8周分别用非侵入式活体分子影像系统观察前列腺原位肿瘤发生及其转移情况。尸检取前列腺原位肿瘤、肺、肝、肾、股骨、盆腔淋巴结等组织,制成冰冻切片,通过荧光显微镜下观察及HE染色等方法分别检测肿瘤发生及有无转移等情况。实验材料 BALB C裸鼠前列腺癌PR7细胞系试剂、试剂盒 饲料饮用水胰酶EDTAHank平衡盐溶液水合氯醛多聚甲醛苏木素-伊红仪器、耗材 孵箱倒置荧光显微镜冻存管棉签针头光学显微镜注射器非侵入式活体分子影像系统实验步骤 一、实验材料准备1. 雄性BALB/C裸鼠10只,6周龄,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。饲养SPF条件下超净层流架内,饲料及饮水自由摄入。 2. 稳定表达红色荧光蛋白(前列腺癌PR7细胞系)用含5%胎牛血清(体......阅读全文

转基因小鼠模型的建立(SOP)8

(1)  RNA的分离:根据实验者的需要从转基因小鼠组织或细胞中提取总RNA或mRNA。分离总RNA比较简单,且适合做基因做基因转录分析。实验操作参见第一章的第四节。(2)  Northern 印迹分析:该技术用于定性检测转基因动物组织或细胞中转基因转录的相对水平。其实验操作参见第一章的第九节。(3

转基因小鼠模型的建立(SOP)7

10)  移卵操作完成后,撤回移卵管,去除器械,按原本位置将各器官重置于腹腔内。10)缝合切口,用小夹夹持皮肤。常用自动小夹代替缝线,这样可以避免小鼠啃嘶缝线,切口裂开。11)若进行双侧手术,则于另一侧子宫角重复上述操作。12)手术完成后,安置小鼠于清洁的笼中。麻醉状态下,小型哺乳动物无法有效维持机

骨骼肌细胞损伤模型的建立

1  材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮

转基因小鼠模型的建立(SOP)1

名称:转基因小鼠模型的建立(SOP)关键词:转基因小鼠目的:在动物体研究转化基因原理:转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因称为转基因。转基因技术则是指制备转基因动物所需的一套技术,它涉及外源基因的构建、载体和受体的筛选、基因导人技术、供

转基因小鼠模型的建立(SOP)5

4.显微注射(1)导入DNA的制备:显微注射首先涉及导入DNA的制备,显微注射的转入基因通常为去除载体序列的线状DNA,转基因所用载体是真核表达载体,即含有在哺乳动物细胞内表达的真核启动子。所谓组织特异性的实现多是通过组织特异性启动子来实现组织特异性表达的。制备转基因小鼠,必须对待导入DNA进行分离

转基因小鼠模型的建立(SOP)7

4)  如果未见DNA溶液流,则轻轻摩擦持样器钝缘,渐渐的打开注射器针头。针头重新进入油内确定DNA溶液流的存在。5)  移动持卵管回到受精卵下部。通过微分驱动水压控制系统使持卵管内产生温和的负压,并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必须确保受精卵基底部与凹玻片基底部轻轻接触。注意不宜吸得过紧,否则会使

诱发性肝癌动物模型的建立

 二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌:取体重250g左右的封闭群大白鼠,雌雄不拘。按性别分笼饲养。除给普通食物外,饲以致癌物,即用0.25%DEN水溶液灌胃,剂量为10mg/kg,每周一次,其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中,任其自由饮用。共约4个月可诱发成肝癌。或单用0.005%掺入饮

骨骼肌细胞损伤模型的建立

1  材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮

转基因小鼠模型的建立(SOP)2

[不足之处](1)外源基因随机整合;(2)个别原核不清晰,需进行特殊处理;(3)需大型精密仪器,费用昂贵;(4)操作周期相对较长。(二)实验器材的准备1.输精管切除术用器材:弯式有齿镊、直式有齿镊、显微镊、手术剪、自动小夹涂药器、自动小夹、带弯针4/0丝线及持针器、直径为10cm塑料 Petri氏培

转基因小鼠模型的建立(SOP)3

(2)受体母鼠的准备输卵管转移的受体鼠应该为4-6周龄大小,体重在20-25克左右,严禁用低体重以及超重母鼠,若体重较低,其体能不足以维持妊娠,可能导致受精卵的重新吸收;若体重较重,麻醉剂被吸收入脂肪组织,降低麻醉效果,可能使手术困难,而且脂肪组织的存在意味着静脉的存在,所以手术时切掉脂肪组织可能导

多项技术助力肿瘤原位成像

  华东理工大学教授龙亿涛小组在单细胞内p53蛋白原位成像检测研究领域取得新进展,相关研究在线发表于《德国应用化学》。  p53是一种肿瘤抑制蛋白,具有反式激活功能和广谱的肿瘤抑制作用。在肿瘤细胞内,p53蛋白通常会发生变异,干扰细胞的正常生长调控机制。“p53蛋白一直是近年来生命科学领域的研究热点

如何正确地选择肿瘤动物模型?(一)

在中国,现在每天约有7710例患者死于癌症,每分钟大概6人死于癌症, 因此,癌症的研究无疑成为生物医学的重中之重,动物模型在肿瘤发生发展及药物研发上扮演着至关重要角色。那么面对不同的肿瘤模型,究竟怎样的动物模型才可以准确反映人类肿瘤发展情况呢?这就是我们本期内容,告诉大家什么样的肿瘤

如何正确地选择肿瘤动物模型?(一)

在中国,现在每天约有7710例患者死于癌症,每分钟大概6人死于癌症, 因此,癌症的研究无疑成为生物医学的重中之重,动物模型在肿瘤发生发展及药物研发上扮演着至关重要角色。那么面对不同的肿瘤模型,究竟怎样的动物模型才可以准确反映人类肿瘤发展情况呢?这就是我们本期内容,告诉大家什么样的肿瘤动物模型才是你真

肿瘤动物模型的构建

  如果说有什么话题能够引起充满个性而又多样化的现代人的共鸣,那想必就是“减肥”了。对体重的严格把关已经成为现代积极健康的生活方式中不可缺少的一个环节。肥胖会影响美观,给正常的运动和生活造成负担,从身体健康的角度来说,过重的体重会增加体内脏器工作的负担,带来一系列的并发症,例如高血压、糖尿病、血脂异

肿瘤动物模型的构建

  癌症研究领域中公认的缺陷之一是缺乏能够研究癌变和癌症治疗的模型系统。为了评估在临床前和临床研究中癌症治疗的效果,通常使用人类肿瘤细胞系或患者源性肿瘤移植到免疫缺陷小鼠体内的肿瘤动物模型。肿瘤动物模型为临床试验提供了一个很好的替代方案,可以让研究者了解临床药物的作用机制,是药物进行临床试验前的至关

几种休克动物模型得建立

1.Hypovolemic shock(MODS Multiple organ dysfunction syndrome): 低血容量性休克模型Wistar大鼠,4. 5 %异戊巴比妥(80 mg/ kg )? 在25 ℃室温下腹腔内给药麻醉?,右股动脉插入套管针 ,连接多导生理记录仪,监测血压;左

LPS炎症模型建立不出来

目前对内毒素致病机理的研究已达分子水平,研究表明当L PS 与单核/ 巨噬细胞表面的mCD/ 4结合后, 通过一系列细胞内信号传导使NF -κB 活化, 活化的NF -κB 进入细胞核与靶基因的启动子区域的特定序列结合, 迅速诱导mRNA 合成, 释放多种细胞因子(cytokines) 如TNF -

全球粮食系统环境影响模型建立

  据英国《自然》杂志10月10日在线发表的一篇可持续性研究文章,科学家建立了一个全球粮食系统模型,经过分析指出,如果不采取行动应对人口和收入水平的预期变化,在2010—2050年期间,粮食系统(为全球人口提供食物所涉及的过程和基础设施)对环境造成的影响可能会上升50%—90%。研究人员分析了几种环

肿瘤细胞诱导血管生成模型实验——细胞培养技术

肿瘤细胞诱导血管生成实验模型可以用于:(1)建立体外实验模型,方便进一步研究;(2)观察肿瘤的生长特点以及其特殊性。实验方法原理无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。实验材料肿瘤细胞试剂、试剂盒DEM藻酸钠N

MicroCT检测肿瘤小鼠模型实验报告(一)

概述:4月20日在中山大学肿瘤医院对肝脏接种肝癌细胞的小鼠进行micro-CT造影以观察肿瘤模型制备的情况。实验结果表明中科恺盛的ZKKS-MCT-III型micro-CT系统可以清楚地在体、无创、连续动态地观测到肿瘤在小鼠体内的分布,所占体积的大小和肿瘤的生长变化的情况,实验结果达到了预期目的。 

MicroCT检测肿瘤小鼠模型实验报告(二)

实验(一)总结:实验中成功注射了Fenestra VC小动物造影剂,该造影剂的最大优点是可以在体内持续保持长时间造影效果。实验结果完全满足了本次模型制备情况监测的目的,发现了直径大约3mm,总体积为13.0107mm3的肿瘤。2. N小鼠(C57小鼠19.6 g)(1)成像前的准备11:46  对编

小鼠肺癌模型的肿瘤在间歇性缺氧实验的应用

间歇性缺氧促进小鼠肺癌模型的肿瘤发展    阻塞性睡眠呼吸暂停(OS A)的特点是睡眠期间上气道反复闭塞导致慢性间歇性缺氧(CIH),阻塞性睡眠呼吸暂停综合症是一种非常普遍的睡眠障碍,涵盖至少3%至7%的成年人口。OSA与代谢综合征、系统性高血压、肺血管疾病、缺血性心脏病、充血性心力衰竭等疾病有关。

前列腺癌研究体内外模型综述

  前列腺癌是发生于男性泌尿生殖系统中前列腺组织中的恶性肿瘤,是前列腺腺泡细胞异常无序生长的结果。前列腺癌的发病率具有明显的地理和种族差异。在欧美等发达国家和地区,发病率居男性恶性肿瘤第一位,其死亡率居各种癌症的第二位;在亚洲,其发病率低于西方国家,但近年来呈迅速上升趋势。在我国,绝大多数的患者在就

关于前列腺肿瘤的治疗概述

  前列腺癌的治疗必须因人而异,治疗方法需与患者的预期寿命、社会关系、家庭及经济状况相适应。目前仅手术和放疗有希望治愈前列腺癌,且只适于数量有限的患者,很多疗法仅仅是姑息性的,仅能缓解症状。但由于前列腺癌患者自然病程较长,肿瘤生长速度相对较慢,老年人预期寿命较短等,疾病的缓解对许多患者意味着治愈。下

关于前列腺肿瘤的护理介绍

  1) 因前列腺肿瘤多数是老年病人,且多患高血压、心血管疾病,应注意观察病人血压、脉搏的变化,及时随访。  2) 严格掌握拔尿管的最佳时机;国内拔尿管应在术后3周左右,但各医院、医生相差较大,应遵医嘱。  3) 加强拔尿管后护理:术后可能出现尿失禁,应注意进行盆底锻炼。必要时应用人工括约肌治疗。

手术治疗前列腺肿瘤的简介

  包括根治性手术和姑息性手术等。对晚期肿瘤患者为解除其膀胱颈部梗阻可行姑息性的经尿道电切除术,目的仅在于缓解梗阻症状,改善患者的生存质量,无治愈意义。对临床分期为A2期、B期甚至C1期的患者均可行根治性前列腺切除术,其中包括保留神经的根治术、扩大的根治术等,手术途径可经耻骨后、经会阴开放手术及经腹

简述前列腺肿瘤的发病机制

  近来对正常前列腺上皮细胞如何转化为转移性的、非雄激素依赖性的癌细胞的过程,在分子水平的研究已经取得了显著的进展。细胞动力学、生殖细胞系突变、DNA甲基化、肿瘤抑制基因失活及癌基因激活、雄激素受体突变、生长因子及上皮-基质的相互作用都在前列腺癌的发生发展中起到重要作用。

简述前列腺肿瘤的放射治疗

  放疗可达到治愈前列腺癌的目的,虽然只是部分患者。国内外均有较广泛应用。其较为严重的并发症如放射性直肠炎、膀胱炎致刺激症状及溃疡等。放射治疗包括内放射治疗、外放射治疗及姑息性放疗等。近年来国外开展较多的是内放射治疗(粒子植入),可通过在B超或CT监视下将小的放射性棒均匀的置于前列腺内而达到治疗作用

关于前列腺肿瘤的基本介绍

  前列腺肿瘤包括前列腺上皮来源或间叶来源的肿瘤,大部分为恶性肿瘤,包括前列腺癌、前列腺肉瘤等。前列腺癌患者主要是老年男性。可以有血尿、排尿困难等症状,但随着20世纪90年代中期大量开展血清前列腺特异抗原(PSA)的检测以来,越来越早的前列腺癌被发现,此时往往不伴有任何症状。前列腺肉瘤好发于年轻人,

诊断前列腺肿瘤的相关介绍

  前列腺癌的诊断包括分期和组织学类型,主要依据前列腺活组织检查或前列腺手术标本的病理学检查,及其他影像学检查。影像学检查可为前列腺癌的分期提供依据。目前前列腺癌的诊断过程大致如下:对患者进行血清PSA 筛查或行直肠指诊,PSA升高或指诊可疑的患者,在B超引导下行前列腺系统穿刺活检,结合影像学检查明