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ELISA技术综述

ELISA原理 ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELISA可设计出各种不 同类型的检测方式,主要以"三明治法"(sandwich)、"间接法"(indirect)、以及"竞争法"(Competitive)三种为主,以下 为各种方法之介绍。 ELISA分类 见ELISA的双抗夹心法原理; ELISA的双抗夹心法,又称"三明治法"。 三明治法常用于检测大分子抗原,一般之操作步骤为: 将具有专一性之抗体固着(coating)于塑料孔盘上,完成後洗去多馀抗体; 加入待测标本,标本中若含有待测之抗原,则其会与塑料孔盘上的抗体进行专一性结合; 洗去多馀待......阅读全文

梅毒常见实验室诊断方法及其进展

摘要 近年来梅毒的发病率有逐年增加的趋势、研究新的快速、价廉、简便、敏感且特异的诊断方法是当前主要研究热点,而设计新试剂盒的关键在于,对现有试剂盒优、缺点的认识和改良,利用人工合成梅毒螺旋体原设计出新的检测方法。对梅毒螺旋体抗原的分析及人工合成,国外早在1989年就已开始进行,几年来发展迅

实时定量PCR应用中的优化方案

 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法,而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具[1]。随着分子生物学技术研究的不断进展,定量PCR技术取得了突飞猛进的发展,不仅建立了一系

浅析乳制品中高危害食源性致病菌——阪崎肠杆菌的快速...

浅析乳制品中高危害食源性致病菌--阪崎肠杆菌的快速检测摘   要:2006年国家出台的《婴幼儿配方乳粉生产许可证审查细则》中明确要求采用国际通行的“荧光PCR仪”作为出厂检验必备设备,此要求已成为乳品企业生产许可证核发的必要条件。本文简单综述了国际通行的保证食品安全的食

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验

实验步骤一、化学法和酶法细胞裂解微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况,而且应用这些机械的方法经常会遇到过度的产热和样品被氧化等问题。微量细胞裂解的简化方面的重大进

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验

实验步骤 一、化学法和酶法细胞裂解 微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况,而且应用这些

梅毒分子生物学实验诊断方法的研究进展

裴瑞青综述;曾铁兵,吴移谋审校(南华大学病原生物学研究所,衡阳421001)摘要:梅毒的临床表现十分复杂,诊断主要依靠实验室检测方法。传统的梅毒实验室诊断方法暴露出诸多缺点,本文综述了国外一些分子生物学技术用于梅毒实验室诊断的方法(以基因工程重组抗原的血清学方法和聚合酶链反应)的研究进展。关键词:梅

检测细胞凋亡的实验方法比较-4

六、Caspase-3活性的检测 Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个

非培养检测技术在曲霉菌感染中的临床应用

曲霉菌在环境中广泛存在,主要通过呼吸道吸入霉菌胞子进入人体。首先侵人感染肺部进而发肺曲霉菌病。在血液系统疾病、肺结核、慢性支气管炎、支气管扩张、肺癌等免疫抑制患者中曲霉已成为仅次于白色念珠菌的重要致病真菌。曲霉菌感染已成为最常见的、传播最广的条件致病霉菌之一,但早期诊断困难,常常导致治疗时机延误,病

农残检测技术介绍

农药对保护农作物、防治病虫草害和提高农作物的产量发挥了巨大作用, 同时也改善了人类生存环境, 提高了人民生产和生活水平。但由此产生的环境污染问题和对人体的负面作用也引起了人们的高度重视,世界上许多国家都已规定了食品和粮食中各种农药残留的限定使用量。据估计,我国农药年生产能力约 35 万 t, 每年防

包涵体的纯化和复性总结

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌?  细胞的破碎方法  1.高速组织捣碎

实验室HIV检测技术概述及进展

   艾滋病(AIDS)又称获得性免疫缺陷综合征,是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病。HIV感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分,建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查,控制艾滋病的流行显得尤为重要。以下本文就HIV的检测技术现状及进

QTRAP代表文献回顾

 生物分子发表的代表性文献 QTRAP:同时具有三重四极杆和线性离子阱性能的独一无二的LC/MS/MS系统       QTRAP系统最早在ASMS 2002上,作为第一台商用的线性离子阱发布,是世界上唯一的线性离子阱和三重四极杆的复合

弥散性血管内凝血的诊断指南

弥散性血管内凝血(DIC)的诊断是一种并发系列病症的临床病理学综合征。血栓和止血国际协会(ISTH)弥散性血管内凝血(DIC)评分系统提供了DIC实验结果与临床观察的客观测定。我们向读者介绍这篇DIC诊断指南,是由具实践经验的英国血液学家应DIC诊断和处理的要求撰写的,详细介绍了DIC的发病机制、诊