细胞冷冻保存、冷冻细胞活化以及细胞计数与存活测试
一、细胞冷冻保存 1、材料： 生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO（Sigma D-2650）、无菌塑料冷冻保存管（Nalgene 5000-0020）、0.4％（w/v）trypan blue（GibcoBRL15250-061）、血球计数盘与盖玻片、等速降温机（KRYO10SeriesII）。 2、冷冻保存方法： （1）传统方法：冷存管置于4℃10分钟→ -20℃30分钟→ -80℃16～18小时（或隔夜）→液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。 （2）程序降温：利用已设定程序的等速降温机以-1～-3℃/分钟之速度由室温降至（-80℃以下）-120℃，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。 3、步......阅读全文
病毒的保存实验——冷冻干燥保存
病毒是具有生物活性的最小微生物，由于其结构复杂，各种类型的病毒对物理、化学作用的反应有所不同（温度、 pH 、盐类等）。保存病毒首先必须了解各种病毒的性质，才能恰当的选择保存剂和保护方法。来源：《病毒学检验》实验方法原理含水物质首先经过冷冻，然后在真空中使水分升华，干燥，在这种低温、干燥和缺氧环境下
细胞破碎机的冷冻研磨技术讲解
细胞破碎机即在样品容器中放入研磨珠，利用容器的高速自转和震动，带动研磨珠剧烈运动，对样品进行研磨粉碎，从而达到破碎细胞壁，或者将固体颗粒处理为粉末的目的。 细胞破碎有关冷冻研磨技术的说明： 细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以
大容量冷冻细胞专用离心机类型
大容量冷冻细胞专用离心机类型有多种。1、按分离目的可分：化验室大容量冷冻细胞专用离心机和工业大容量冷冻细胞专用离心机。2、按分离功能可分：分析型大容量冷冻细胞专用离心机和生产型大容量冷冻细胞专用离心机。3、按分离方法可分：大容量冷冻细胞专用浓缩离心机和大容量冷冻细胞专用澄清离心机。4、按速度可分：低
大容量冷冻细胞专用离心机类型
大容量冷冻细胞专用离心机类型有多种。1、按分离目的可分：化验室大容量冷冻细胞专用离心机和工业大容量冷冻细胞专用离心机。2、按分离功能可分：分析型大容量冷冻细胞专用离心机和生产型大容量冷冻细胞专用离心机。3、按分离方法可分：大容量冷冻细胞专用浓缩离心机和大容量冷冻细胞专用澄清离心机。4、按速度可分：低
细胞破碎机的冷冻研磨技术讲解
细胞破碎机即在样品容器中放入研磨珠，利用容器的高速自转和震动，带动研磨珠剧烈运动，对样品进行研磨粉碎，从而达到破碎细胞壁，或者将固体颗粒处理为粉末的目的。 细胞破碎有关冷冻研磨技术的说明： 细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧
细胞破碎机的冷冻研磨技术讲解
细胞破碎机即在样品容器中放入研磨珠，利用容器的高速自转和震动，带动研磨珠剧烈运动，对样品进行研磨粉碎，从而达到破碎细胞壁，或者将固体颗粒处理为粉末的目的。 细胞破碎有关冷冻研磨技术的说明： 细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性
大容量冷冻细胞专用离心机类型
大容量冷冻细胞专用离心机类型有多种。1、按分离目的可分：化验室大容量冷冻细胞专用离心机和工业大容量冷冻细胞专用离心机。2、按分离功能可分：分析型大容量冷冻细胞专用离心机和生产型大容量冷冻细胞专用离心机。3、按分离方法可分：大容量冷冻细胞专用浓缩离心机和大容量冷冻细胞专用澄清离心机。4、按速度可分：低
细胞破碎机的冷冻研磨技术讲解
细胞破碎机即在样品容器中放入研磨珠，利用容器的高速自转和震动，带动研磨珠剧烈运动，对样品进行研磨粉碎，从而达到破碎细胞壁，或者将固体颗粒处理为粉末的目的。 细胞破碎有关冷冻研磨技术的说明： 细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。
大容量冷冻细胞离心机的类型
大容量冷冻细胞离心机的类型有多种。1、按分离目的可分：实验室大容量冷冻细胞离心机和工业大容量冷冻细胞离心机。2、按分离功能可分：大容量冷冻细胞分析离心机和大容量冷冻细胞制备离心机。3、按结构可分：台式大容量冷冻细胞离心机和落地式大容量冷冻细胞离心机。4、按转子结构可分：水平转子大容量冷冻细胞离心机和
细胞计数
原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目即可换算出每mL细胞悬液中的细胞数量。操作步骤：1.将计数板及盖玻片擦拭干净，并将盖玻片盖在计数板上；2.轻轻吹打细胞悬液，使细胞均匀分布；吸出少许细胞悬液滴在细胞入口，使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间，静置1-2min，使细胞
细胞凋亡与细胞坏死以及细胞程序性死亡的区别
细胞凋亡（apoptosis），又称程序性细胞死亡（programmed cell death），是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序性的死亡。与细胞的坏死不同，细胞凋亡不是一种被动的过程，而是一种主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用。它并不是病理条件下自体损伤的一种现
脑脊液细胞计数与分类计数临检基础
1.检测原理 （1）清亮或微浑的脑脊液标本，可以直接计数细胞总数，或稀释后再直接计数，将结果乘以稀释倍数。 （2）可采用直接计数法计数白细胞，或稀释后再直接计数，将结果乘以稀释倍数。 （3）白细胞直接计数后，在高倍镜下根据白细胞形态特征进行分类计数。也可采用Wright染色后，油镜下分类计数。 2
脑脊液细胞计数与分类计数检验基础
脑脊液细胞计数与分类计数是检验技师考试需要了解的内容，医学教育网搜索整理如下： 1.检测原理 （1）清亮或微浑的脑脊液标本，可以直接计数细胞总数，或稀释后再直接计数，将结果乘以稀释倍数。 （2）可采用直接计数法计数白细胞，或稀释后再直接计数，将结果乘以稀释倍数。 （3）白细胞直接计数后，在高倍镜
白细胞计数及白细胞分类计数
白细胞计数及白细胞分类计数参考值为： 白细胞分类计数： (1)中性粒细胞，杆状核0.0l～0.05，分叶核0.5～0.7 (2)嗜酸性粒细胞0.005～0.05 (3)嗜碱性粒细胞0～0.0l (4)淋巴细胞0.3～0.4 (5)单核细胞0.03～0.08 临床意义如下： (1)
细胞冻存与复苏应用方向、发展历史和冷冻技术1
概述细胞培养技术自1907年开创以来，历经一个世纪现已成为自然科学领域不可缺少的研究方法之一。在细胞培养技术广泛用于科学研究领域的令天，细胞株的冷冻保存和解冻复苏这一基础技术日益得到重视。低温保存是活体组织保存最常用的方法之一。冷冻保存一般是指在0～196℃进行保存，就是将体外培养物悬浮在加有或不加
细胞冻存与复苏应用方向、发展历史和冷冻技术2
常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有35L3和50L3两种。细胞冻存时常备的材料有：0.25%胰蛋白酶，含10%～20%的血清培养液，DMSO（分析纯）或无色新鲜甘油（121℃蒸气高压消毒），2ml 安瓿（或专用细胞冻存管）、吸管、离心管、喷灯、纱布袋（或冻存管架）等。主要操作步骤为：（1）选择
体细胞计数仪/体细胞计数器/牛奶体细胞计数仪
体细胞计数仪/体细胞计数器/牛奶体细胞计数仪 型号：DP-SCC300DP-SCC300体细胞计数仪用于个体和大罐牛奶中体细胞数量的快速、低成本检测。牛奶体细胞数量检测是牧场预防、检查和治疗奶牛乳房炎非常重要的一项工作。对乳品生产企业而言，是获得高品质生态纯净牛奶的必要检测项目仪器特点; 携带轻便
胚胎冷冻保存技术的发展
由于体外受精-胚胎移植的高昂费用、有限成功率和多余胚胎的存在，以及政策和伦理对胚胎移植数目的限制，从最大限度地保护患者利益出发，应尽可能提高每一取卵周期的临床妊娠率，因而胚胎冷冻技术极为重要。胚胎冷冻造成细胞损伤机制胚胎冷冻对活组织和细胞进行冷冻保存时，冷冻过程将可能对细胞造成损伤。主要的损伤机制包
用血细胞计数板进行细胞计数实验
实验方法原理用胰蛋白酶消化单层培养，或从悬浮培养中取样；准备一张盖玻片，将细胞加到血细胞计数板的小室内。在显微镜下计数细胞，计算细胞浓度。实验步骤材料无菌：D-PBSA、0.25% 粗制胰蛋白酶、生长培养基、移液器黄吸头非无菌：移液器，20ul 或 100ul 可调式、血细胞计数板（改良的 Neub
用血细胞计数板进行细胞计数实验
实验方法原理 用胰蛋白酶消化单层培养，或从悬浮培养中取样；准备一张盖玻片，将细胞加到血细胞计数板的小室内。在显微镜下计数细胞，计算细胞浓度。实验步骤 材料无菌：D-PBSA、0.25% 粗制胰蛋白酶、生长培养基、移液器黄吸头非无菌：移液器，20ul 或 100ul 可调式、血细胞计数板（改良的 Ne
用血细胞计数板进行细胞计数实验
实验方法原理 用胰蛋白酶消化单层培养，或从悬浮培养中取样；准备一张盖玻片，将细胞加到血细胞计数板的小室内。在显微镜下计数细胞，计算细胞浓度。 实验步骤 材
冷冻离心机单核细胞分离技术介绍
专业生产各种低速离心机,大容量离心机,冷冻离心机,产品广泛应用于农业科学、生物工程、食品、化工、制药、临床医学、血站血库、检验检疫、疾控、环保等科研和生产单位。冷冻离心机干细胞分离技术主要分为铁粉吸附法和玻璃吸附法。1.铁粉吸附法介绍：铁粉分离法所选用的材料：（1）铁粉或羰基铁粉(Atomergic
细胞冷冻电镜到底是什么神兵利器？
冷冻电镜它首先是一个电镜。 而电镜是电子显微镜的缩写。所谓电子显微镜，又是在光学显微镜的基础上发展出来的。 光学显微镜利用可见光作为探针来观测微观物体，比如光学显微镜可以观察细胞。但是，对于细胞内的蛋白质分子，光学显微镜就看不见它了。 为什么呢？ 原因其实很简单，光学显微镜利用的是光子的
为什么复苏细胞要慢速冷冻快速复苏
对，必须慢冻快融。当细胞冷到零度以下时，细胞器会脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，在细胞内形成冰晶。缓慢冷冻可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶。相反，冰晶会很大，导致细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏快溶可防止小冰晶形成大冰晶（冰晶的重结晶）。在冷冻细胞时，还应在冻存液中加入DMSO等冷冻保护剂。
为什么复苏细胞要慢速冷冻快速复苏
对，必须慢冻快融。当细胞冷到零度以下时，细胞器会脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，在细胞内形成冰晶。缓慢冷冻可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶。相反，冰晶会很大，导致细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏快溶可防止小冰晶形成大冰晶（冰晶的重结晶）。在冷冻细胞时，还应在冻存液中加入DMSO等冷冻保护剂。
冷冻离心机单核细胞分离技术介绍
专业生产各种低速离心机,大容量离心机,冷冻离心机,产品广泛应用于农业科学、生物工程、食品、化工、制药、临床医学、血站血库、检验检疫、疾控、环保等科研和生产单位。冷冻离心机干细胞分离技术主要分为铁粉吸附法和玻璃吸附法。1.铁粉吸附法介绍：铁粉分离法所选用的材料：（1）铁粉或羰基铁粉(Atomergic
为什么复苏细胞要慢速冷冻快速复苏
对，必须慢冻快融。当细胞冷到零度以下时，细胞器会脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，在细胞内形成冰晶。缓慢冷冻可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶。相反，冰晶会很大，导致细胞膜、细胞器的损伤和破裂。复苏快溶可防止小冰晶形成大冰晶（冰晶的重结晶）。在冷冻细胞时，还应在冻存液中加入DMSO等冷冻保护剂。
美国最新研究：冷冻23年睾丸细胞产生精子
一项5月10日发表于《公共科学图书馆—生物学》的研究报告说，冷冻了23年的老鼠睾丸细胞在植入老鼠体内后产生了精子。美国宾夕法尼亚大学的Eoin Whelan说，研究表明，那些在癌症治疗前冷冻睾丸组织的儿童，或许可以重新移植睾丸组织，以便有朝一日通过体外受精（IVF）方式生下自己的生物学后代。
冷冻电镜 细胞内分子结构测定
细胞内分子结构测定：从溶液内(in vitro)到细胞内(in situ)当前的高分辨分子结构基本都是在溶液中提纯出来的分子样品，也就是通常所说的in vitro 实验。现在可以利用快速冷冻的方法把细胞固定，再用高能粒子枪对细胞进行高精度切片。在细胞的某些部位，常常有大量同类分子聚集，比如在内质网
细胞培养－冷冻管应如何解冻
取出冷冻管后，须立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1－2分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用75％消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。