文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠
投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们: 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。 第一集,关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠(Knockout Mice),人们使用复杂的方法使小鼠体内的某一个基因不表达,从而使小鼠呈现这个基因缺失的状态,可用于研究这个基因的功能。 但如果某个基因功能特别重要,这个基因缺失可能具有胚胎致死性,那我们就无法得到这种基因敲除的小鼠了,于是人们发明了条件性基因敲除技术。这一技术可以实现在特定的时间、特定的细胞或组织内使某个基因沉默。方法是首先在目的基因(就是打算敲除的那个基因)的两侧分别插入一段名为LoxP的DNA序列(LoxP序列是一段34bp的DNA序列,两端的13个碱基为回文序列,中间的8个碱基决定LoxP的方向。具体序列如下:......阅读全文
小动物Micro-CT实验平台在小鼠踝关节炎研究中的应用
实验目的:对小鼠进行人为因素诱导其患关节炎,导致其前爪踝关节出现严重的骨质缺损和骨质流失。然后对患关节炎的小鼠进行药物治疗,寻找和比较不同药物的治疗效果。 实验方法:实验是在广州中科恺盛公司的小动物Micro-CT公共实验平台上完成的。实验分为3组,第一组是对正常小鼠前爪踝关节进行CT扫描;
小动物Micro-CT实验平台在小鼠踝关节炎研究中的应用
实验目的:对小鼠进行人为因素诱导其患关节炎,导致其前爪踝关节出现严重的骨质缺损和骨质流失。然后对患关节炎的小鼠进行药物治疗,寻找和比较不同药物的治疗效果。 实验方法:实验是在广州中科恺盛公司的小动物Micro-CT公共实验平台上完成的。实验分为3组,第一组是对正常小鼠前爪踝关节进行CT
小动物Micro-CT实验平台在小鼠踝关节炎研究中的应用
实验目的:对小鼠进行人为因素诱导其患关节炎,导致其前爪踝关节出现严重的骨质缺损和骨质流失。然后对患关节炎的小鼠进行药物治疗,寻找和比较不同药物的治疗效果。 实验方法:实验是在广州中科恺盛公司的小动物Micro-CT公共实验平台上完成的。实验分为3组,第一组是对正常小鼠前爪踝关节进行CT扫描;第二组是
动物所等揭示小鼠行为和神经基因的驯化机制
实验小鼠是生物学和医学研究中最常用的哺乳动物模型之一,由野生小家鼠长期驯化而来。实验小鼠和野生小家鼠在体型、生理及行为方面存在很大差异。特别是,实验室驯化下小鼠攻击行为减弱、温顺行为增强。已知实验小鼠的基因组来自Mus musculus domesticus (M. m. domesticus)
动物所等揭示小鼠行为和神经基因的驯化机制
实验小鼠是生物学和医学研究中最常用的哺乳动物模型之一,由野生小家鼠长期驯化而来。实验小鼠和野生小家鼠在体型、生理及行为方面存在很大差异。特别是,实验室驯化下小鼠攻击行为减弱、温顺行为增强。已知实验小鼠的基因组来自Mus musculus domesticus (M. m. domesticus)
转基因小鼠制备实验方法
实验概要掌握转基因小鼠制备基本实验方法。实验步骤1. 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。 2. 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结
活体动物体内成像技术文献
1. 细胞凋亡与白血病Activation of Apoptosis in Vivo by a Hydrocarbon-Stapled BH3 HelixSCIENCE 2004,305:1466-1470 通过对BCL-2蛋白家族BID的BH3结构域进行化学修饰,使其容易穿过细胞膜,在活体内研究其
知识分享:动物细胞基因组DNA提取
实验原理 真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,制备DNA将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,同时保持DNA分子的完整。提取DNA的过程是指将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得到的DNA溶液经乙醇沉
哺乳动物中制备基因组DNA实验——制备DNA
在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素,以保证DNA的完整性,为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp,可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取,常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提而实现的。实验材料动物组织试剂、
小动物行为学实验方法文献综述与评价
1 前言 人生活在世界中,有各种各样的行为。这些行为构成了我们生活的社会环境。动物也有很多行为,繁殖行为、觅食行为、趋避行为、战斗行为、利他行为等等。动物行为学就是研究动物行为的一门学科。通过学习前人对动物行为学的研究得出的规律,能够以观察、实验的方式了解动物的状态、需求等。作为一门经验性学科,实验
基因敲除的基本功能
基因敲除(knockout)是用含有一定已知序列的DNA片段与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,整合至受体细胞基因组中并得到表达的一种外源DNA导入技术。它是针对某个序列已知但功能未知的序列,改变生物的遗传基因,令特定的基因功能丧失作用,从而使部分功能被屏蔽,并可进一步对生物体造成影
基因敲除技术的原理和方法
1.利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES细
基因敲除的技术和功能简介
基因敲除(knockout)是用含有一定已知序列的DNA片段与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,整合至受体细胞基因组中并得到表达的一种外源DNA导入技术。它是针对某个序列已知但功能未知的序列,改变生物的遗传基因,令特定的基因功能丧失作用,从而使部分功能被屏蔽,并可进一步对生物体造成影
基因敲除与RNA干扰的关系
20世纪80年代初,胚胎干细胞分离和体外培养的成功为基因敲除奠定了技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组(homology recombination, HR)的存在为基因敲除奠定了理论基础[2]。为了编辑基因,传统的靶向特定等位基因的同源重组技术被使用,但是,这个方法在当年来说,存
动物实验中如何进行动物称重?
动物实验是科学研究的重要手段,是现代科学技术的重要组成部分,因此直接影响着研究课题的成败和水平的高低,它的提高和发展,又会把许多领域课题的研究引入新的境界。特别是在在生命科学研究领域内,动物实验更是重要而且普遍,它在抗体研发、药物研究、新疗法研究、基因表达和敲除等等研究领域都是必不可少而又至关重要的
实验过程中遇到的不增殖细胞有哪些?
在生物医学实验中,常常会用到大量的细胞进行实验,而往往通过各种渠道得来的细胞数量都有限,无法满足实验过程中所需要的细胞数量,所以为了使实验更顺利的进行,科研人员往往需要前期对所需的细胞进行扩充培养,以便在后期的实验中,可以不间断使用。通常的细胞实验中,很多科研人员都会根据实验方案选择常见的细胞,包括
减免毒素检验中的动物实验
近日,苏黎世联邦理工学院的研究者申报了一项ZL检验系统,借此能够免除成千上万次的动物实验。为此,须在药物制剂的批次控制时将脂质体的纳米舱与肉毒杆菌神经毒素共同投入使用。 如今,药物制剂如肉毒杆菌Botox(瘦脸用)、Bocouture(除眉间纹用)或者Azzalure(眼表整容用)已在全球
动物实验中的紧急救助
动物实验中常见病种:实验动物人畜共患烈性传染病病种:大鼠-汉坦病毒;犬:狂犬病毒 实验动物人畜共患烈性传染病病种:大鼠-仙台病毒;大鼠-仙台病毒、肝炎病毒、鼠病毒;豚鼠-仙台病毒;兔-出血症病毒 实验过程中被动物咬伤后应怎样处理? 凡被犬(猫)鼠等动物咬、抓、舔伤及因宰杀、剥皮而污染的伤口,除去伤口
基因敲除真把整个基因敲掉吗?
一般我们把基因分成两类:编码蛋白的基因不编码蛋白的基因这两类基因的敲除方式有着很大的区别编码蛋白的基因这些基因的功能主要是通过编码区中的三联体密码所编码的蛋白来实现的。基因敲除的最终目的是让这个基因的蛋白产物不能发挥功能,或者蛋白不能表达。整个编码区统统删掉所有的密码都没了,当然就不能翻译出蛋白啦!
AVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达敲除应用与分析
AAV-TBG-Cre/GOI系统简介: l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。 Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子,用于肝脏特异性转外源基因表达。 Ø Cre重组酶是
关于动物中的基因转换现象介绍
在蚂蝗、鲟鱼、果蝇、蜥蜴和人类等动物的核基因组中都发现有基因转换现象。以蜥蜴为例, 它是一种孤雌生殖的异源三倍体, 进行营养繁殖, 其r D N A的重复序列通过基因转换已高度纯合。这些三倍体蜥蜴有几千年历史, 只进行无性繁殖, 很少或无遗传重组, 且r D N A的基因座位没减少, 但其中一个
TetraOne-KO——基因敲除技术进展
TetraOne KO——基因敲除技术的重大突破 近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球ZL技术TetraOne基因敲除,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、CRISP
如何检测-crispr-基因敲除成功
CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。在细菌及古细菌中,CRISPR系统共分成3类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Ca
关于基因敲除技术应用介绍
基因敲除技术主要应用于动物模型的建立,而最成熟的实验动物是小鼠,对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来,牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊,基因敲除狗的培育难度大为增加,狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题,研究团队设计了一个自体移植的策略,
基因敲除技术原理和方法
1.利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES细
全新学习认知工具在神经科学中的应用(二)
图1: 图2:图1左边是黑色的是对照组的突触密度,右边黑色的是敲除组的突触密度,明显下降!图2测定的是场兴奋性突触后电位,黑色的是对照组的LTP长时程增强,红色的是敲除组的LTP长时程增强,明显突出的可塑性受损!这些突触密度的下降、突触可塑性的受损,反应到行为学上则是学习认知的问题。 采用荷兰诺达思
赛业“阿波罗计划”CRISPRAI敲除小鼠精子库创新技术介绍
作为全球领先的转基因/基因敲除模式动物商业技术平台,历经十多年的发展,赛业已服务数千客户,学术引用累计超过1300篇,是目前国际上最主要、最被认可的基因工程模式动物商业服务平台之一。在基因工程模式动物领域数年不懈的耕耘,让赛业积累了丰富的模式动物制备经验,也获得了无数客户的充分认可。 为了
转基因小鼠制备实验方法(protocol)
1、 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。2、 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体,
动物基因编辑在争议中走来
为期两天的美国国家科学院(NAS)研讨会日前在华盛顿举行。会议披露了科学家、伦理学家和监管者就推动动物基因组编辑向前发展的最好方法达成一致还有多远。此次研讨会紧随去年12月召开的人类基因组编辑NAS峰会而来,但并未吸引太多关注,尽管它产生了更加直接的监管和科学上的影响。会议还有可能塑造这些技术或
高翔教授:表型分析与新型动物模型
3月24日,由生物谷主办的2017模式动物与重大疾病动物模型研究与应用研讨会在上海隆重召开。南京大学模式动物研究所所长、医药生物技术国家重点实验室主任高翔教授为与会代表作了题为表型分析与新型动物模型的报告。 高翔教授1994年获得美国Thomas Jefferson University博士学