ELISA法检测肿瘤坏死因子

肿瘤坏死因子(TNF)是由激活的单核细胞巨噬细胞受内毒素刺激后产生的一种分子量为17 000的蛋白质。其中,由巨噬细胞产生的称TNF-α,是巨噬细胞介导细胞毒效应的细胞因子;由淋巴细胞产生的称TNF-β。TNF在体内具有广泛的生物学活性:可作为免疫应答中的一种中间介质,既有抗病效应,又有致病效应;可引起肿瘤的出血坏死;可刺激成纤维细胞增殖;可增加HLA-A、HLA-B、HLA-C抗原的表达;可激活中性粒细胞及杀伤细胞;可促进B细胞增殖及分化、增加IL-2受体表达。肝脏是TNF的主要发源地,同时也是TNF清除的主要部位。目前,以TNF-α在临床的意义较大,是内毒素引起肝损害的重要介质。TNF-α只有通过与靶细胞表面的膜型受体(mTNF-aR)特异结合才能发挥毒性效应,这一结合过程又 受血清中可溶性TNF-α受体(sTNF-aR)的调节和制约,而sTNF-aR可与mTNF-aR竞争结合TNF-。。临床上常以检测TNF-α为主......阅读全文

大鼠肿瘤坏死因子a(TNFa)ELISA试剂盒使用说明

原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 TNF-a 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 TNF-a与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠TNF-a,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450n

犬肿瘤坏死因子βelisa检测试剂盒实验操作技巧

1.操作前应对试验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗刷的次数等,要先查看水育箱温度,ELISA试剂盒是否符合要求。2.正确使用加样器加样器应笔直参加标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净

人肿瘤坏死因子βELISA试剂盒的操作注意事项

人肿瘤坏死因子βELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样

山羊肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA检测试剂盒说明

试验原理:TNF-α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜

肿瘤坏死因子α检测的概述

  肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)是最早发现的能使肿瘤组织细胞发生出血性坏死的细胞因子,主要由脂肪组织中的巨噬细胞和脂肪细胞分泌,由于其在体内外均可直接杀伤肿瘤细胞而得名。根据其来源和结构不同,主要分为TNF-α和TNF-β。TNF-α主要由活化的单核-巨噬细胞及其他

肿瘤坏死因子α检测的原理

  TNF-α在体内、外均可对一些肿瘤细胞或细胞系起杀伤作用,而体外培养的多种正常细胞则无细胞毒效应。根据这一特点,可利用TNF-α敏感靶细胞测定TNF-α活性。

肿瘤坏死因子的基因特点

人类TNF-α基因于1985年成功克隆,定位于6p21.4,长约3.6 kbp,有4个外显子和3个内含子,与主要组织相容性复合体(MHC)基因紧密连锁位于HLA-B 和 HLA-C2 位点之间的 MHC3 类基因区内,由TNFA和TNFB组成,分别编码TNFα和TNFβ。位于启动子区238位和308

肿瘤坏死因子的蛋白特性

1 人TNF-α前体由233个氨基酸组成(26 kDa),其中包含由76个氨基酸残基组成的信号肽,在TNF转化酶TACE的作用下,切除信号肽,形成成熟的157个氨基酸残基的TNF-α(17 kDa)。由于没有蛋氨酸残基,故不存在糖基化位点,其中第69位和101位两个半胱氨酸形成分子内二硫键。人类 T

肿瘤坏死因子的特性介绍

TNF结合蛋白(TNF-BP)是TNFR的可溶性形式,有sTNFRⅠ(TNF-BPⅠ)和sTNFRⅡ(TNF-BPⅡ)两种。一般认为sTNFR具有局限TNF活性,或稳定TNF的作用,在细胞因子网络中有重要的调节作用。Seckiner1988年发现发热患者尿中有TNF抑制物,分子量为33 kDa。Ol

简述肿瘤坏死因子的特点

  人类TNF-α基因于1985年成功克隆,定位于6p21.4,长约3.6 kbp,有4个外显子和3个内含子,与主要组织相容性复合体(MHC)基因紧密连锁位于HLA-B 和 HLA-C2 位点之间的 MHC3 类基因区内,由TNFA和TNFB组成,分别编码TNFα和TNFβ。位于启动子区238位和3

肿瘤坏死因子的蛋白特性

  1、人TNF-α前体由233个氨基酸组成(26 kDa),其中包含由76个氨基酸残基组成的信号肽,在TNF转化酶TACE的作用下,切除信号肽,形成成熟的157个氨基酸残基的TNF-α(17 kDa)。由于没有蛋氨酸残基,故不存在糖基化位点,其中第69位和101位两个半胱氨酸形成分子内二硫键。人类

肿瘤坏死因子在肿瘤治疗中的应用

TNF在人、鼠肿瘤细胞株或原代培养的人癌细胞中,以及荷瘤裸鼠中都表现出杀瘤或抑瘤作用和免疫调节活性。应用TNF在治疗肿瘤等方面大多尚处于临床试验阶段,其也可与IL-2联合治疗肿瘤,目前认为全身用药的疗效不及局部用药,后者如病灶内注射,局部浓度高且副作用也较轻。近年来已采用TNF基因治疗开始对黑色素瘤

肿瘤坏死因子在肿瘤治疗中的应用

  TNF在人、鼠肿瘤细胞株或原代培养的人癌细胞中,以及荷瘤裸鼠中都表现出杀瘤或抑瘤作用和免疫调节活性。应用TNF在治疗肿瘤等方面大多尚处于临床试验阶段,其也可与IL-2联合治疗肿瘤,目前认为全身用药的疗效不及局部用药,后者如病灶内注射,局部浓度高且副作用也较轻。近年来已采用TNF基因治疗开始对黑色

肿瘤坏死因子在肿瘤治疗中的应用

  TNF在人、鼠肿瘤细胞株或原代培养的人癌细胞中,以及荷瘤裸鼠中都表现出杀瘤或抑瘤作用和免疫调节活性。应用TNF在治疗肿瘤等方面大多尚处于临床试验阶段,其也可与IL-2联合治疗肿瘤,目前认为全身用药的疗效不及局部用药,后者如病灶内注射,局部浓度高且副作用也较轻。近年来已采用TNF基因治疗开始对黑色

人肿瘤坏死因子受体2(sTNFR2)ELISA试剂盒

人肿瘤坏死因子受体-2(sTNF-R2)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 sTNF-R2 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 sTNF-R2与单抗结合,加入生物素化的抗人sTNF-R2,形成免疫复合物连接在

人肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(TNFAIP3)ELISA试剂盒

人肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(TNFAIP3)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 TNFAIP3单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 TNFAIP3 与单抗结合,加入生物素化的抗人TNFAIP3,形成免疫复合物连

肿瘤坏死因子α的临床意义

  异常结果:肿瘤坏死因子α基因的报告质粒的荧光素酶基因由肿瘤坏死因子α基因启动子及3’端非翻译序列驱动,荧光素酶基因的表达水平即反映了肿瘤坏死因子α基因的表达水平。肿瘤坏死因子α基因的报告质粒用于检测化合物对肿瘤坏死因子α基因表达水平的影响。  需要检查的人群:有肝脏炎症,组织炎症以及血糖异常的患

肿瘤坏死因子α的注意事项

  检查前禁忌:患者应该避免接近各种放射源。  检查时要求:标本均与确诊时取静脉血3ml,及时分离血清,-40℃冻存集中测定。

肿瘤坏死因子α的检查过程

  用双抗体夹心酶免疫分析法。将TNF α单克隆抗体包被于PVC板上,样品种的TNF α和单抗体结合后再与辣根过氧化物酶标记免抗TNFα多克隆抗体结合,过氧化物酶与TMB反应终止后用酶标仪测定450nm的光密度,结果与标准曲线比较确定TNFα的含量。

肿瘤坏死因子α检测的标本采集

  1.患者准备检查前一天晚上8点后避免进食和剧烈运动。患者采血前最好休息15分钟以上。2.标本类型常规采集患者空腹静脉血液4ml置于无抗凝剂的一次性真空采血管中备用。3.标本运送标本采集后应明确标识并由专人及时送检,并注意运送过程中的生物危害性。4.标本处理(1)标本置于37℃孵箱孵育待血液完全凝

《Cell》:肿瘤坏死因子新发现

来自德州大学安德森癌症和肿瘤中心(M.D. Anderson Cancer Center)癌症和肿瘤生物学系的研究人员发现TNF-α可以作为连接炎症和癌症病理学的一个调控关联子,剖析了这一途径中的分子与细胞机制,证明这一途径是炎症介导的肿瘤血管新生过程中的一个关键途径,并且也许可以作

肿瘤坏死因子的主要群体介绍

第一类受体是在胞质尾区包含死亡结构域(DD)。通过配体与相应的包含死亡结构域的受体结合可以招募胞内含有死亡结构域的受体,例如Fas相关死亡结构域蛋白(FADD/MORT1)和TNF受体相关的死亡结构域蛋白(TRADD),它们一起构成了所谓的死亡诱导信号复合物(DISC)。这些分子导致caspase活

肿瘤坏死因子与病原的关系

TNF还具有类似IFN抗病毒作用,阻止病毒早期蛋白质的合成,从而抑制病毒的复制,并与IFN-α和IFN-γ协同抗病毒作用。另一方面,TNF诱导HIV-1基因在T细胞中表达。TNF在HIV感染的CD4+细胞中活化或诱导NF-Κb,NF-κB结合于HIV的长末端重复序列(LTR)的增强子部位,活化HIV

关于肿瘤坏死因子的基本介绍

  1975年E.A. Carswell等人发现接种卡介苗的小鼠注射细菌脂多糖后,血清中出现一种能使多种肿瘤发生出血性坏死的物质,将其命名为肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)。八十年代人们发现其在消耗症中起了重要作用,又称恶液质素。TNF主要由活化的巨噬细胞,NK细胞

肿瘤坏死因子超家族的介绍

  目前,研究人员已经证实肿瘤坏死因子蛋白同系物超家族存在着29个不同的受体(图1)。这些受体可以被分为三个主要群体:  第一类受体是在胞质尾区包含死亡结构域(DD)。通过配体与相应的包含死亡结构域的受体结合可以招募胞内含有死亡结构域的受体,例如Fas相关死亡结构域蛋白(FADD/MORT1)和TN

肿瘤坏死因子与病原的关系

  TNF还具有类似IFN抗病毒作用,阻止病毒早期蛋白质的合成,从而抑制病毒的复制,并与IFN-α和IFN-γ协同抗病毒作用。另一方面,TNF诱导HIV-1基因在T细胞中表达。TNF在HIV感染的CD4+细胞中活化或诱导NF-Κb,NF-κB结合于HIV的长末端重复序列(LTR)的增强子部位,活化H

《Cell》:肿瘤坏死因子新发现

来自德州大学安德森癌症和肿瘤中心(M.D. Anderson Cancer Center)癌症和肿瘤生物学系的研究人员发现TNF-α可以作为连接炎症和癌症病理学的一个调控关联子,剖析了这一途径中的分子与细胞机制,证明这一途径是炎症介导的肿瘤血管新生过程中的一个关键途径,并且也许可以作为人类癌症临床干

肿瘤坏死因子杀伤或抑制肿瘤细胞的特性

  TNF在体内、体外均能杀死某些肿瘤细胞,或抑制增殖作用。肿瘤细胞株对TNF-α敏感性有很大的差异,TNF-α对极少数肿瘤细胞甚至有刺激作用。用放线菌素D、丝裂霉素C、放线菌酮等处理肿瘤细胞(如小鼠成纤维细胞株L929)可明显增TNF-α杀伤肿瘤细胞活性。体内肿瘤对TNF-α的反应也有很大的差异,

猪三聚体肿瘤坏死因子a-(tTNFa)ELISA试剂盒

猪三聚体肿瘤坏死因子-a (tTNF-a)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗猪 tTNF-a 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 tTNF-a与单抗结合,加入生物素化的抗猪tTNF-a,形成免疫复合物连接在板上

大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAILR4-)ELISA试剂...

大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4 )ELISA试剂盒使用说明原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 TRAIL R4 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 TRAIL R4与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠TRAIL R4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过