糖的聚酰胺薄层层析

一、实验目的1.熟悉掌握薄层层析的实验操作。2.了解聚酰胺薄层层析法测定糖的原理和方法。二、实验原理用于层析的聚酰胺有两类,一类是锦纶66(尼龙),另一类是锦纶6。在这两类材质中,都含有大量酰胺基团,故统称聚酰胺。聚酰胺以其-CO-或-NH-与极性化合物的-OH 或=O 之间形成氢键,从而发生吸附作用。不同物质与聚酰胺之间形成氢键的能力不同。在聚酰胺膜上做层析分离时,流动相从薄膜表面流过,被分离物质在溶剂和薄膜之间按分配系数的大小,发生不同速率的吸附与解吸过程,从而使混合物得到有序的分离,使用显色剂显色,得到不同的Rf 值。三、仪器和试剂仪器带密封盖的层析缸、聚酰胺板、毛细管、100℃的烘箱、电吹风、试管以及试管架等。试剂1. 糖的标准溶液:木糖、葡萄糖、果糖和蔗糖10mg/mL 水溶液。2.样品液:多糖的水溶液。3.展开剂:⑴乙酸乙酯:乙酸:水=2:2:1 ⑵氯仿:甲醇=60:40(v:v)4.显色剂:⑴25%~5......阅读全文

氨基酸的薄层层析(TLC)

【实验原理】聚酰胺薄膜层析是60年代以后发展起来的一种新的层析方法,特别适用于氨基酸及其衍生物的分析。具有灵敏度高、分辨率强、操作方便快捷等特点。聚酰胺是一类化学纤维素原料,即锦纶(尼龙)。由乙二酸和乙二胺聚合而成的,称锦纶66。 由于分子中含有大量的酰胺基团,故称聚酰胺。聚酰胺薄膜是在涤纶片基

关于薄层层析法的应用介绍

  广泛应用于石油、化工、医药、生化等方面。样品用量一般为几至几百微克,是一种较实用、有效的微量分离分析方法。此法也可用于分离制备较大量的样品,即使用较大较厚的薄层板,将样品溶液在起始点处点成条带状,这样可以分离毫克量样品。

常见色层分析薄层层析

薄层层析在玻璃片、金属箔或塑料片上铺上一层约1~2毫米的支持物,如纤维素、硅胶、离子交换剂、氧化铝或聚酰胺等,根据需要做不同类型的层析。聚酰胺薄膜是一种特异的薄层,将尼龙溶解于浓甲酸中,涂在涤纶片基上,当甲酸挥发后,在涤纶片基上形成一层多孔的薄膜,其分辨力超过了用尼龙粉铺成的薄层。薄层层析较纸层析优

薄层层析板常用制备方法

薄层层析板制备方法有很多,有手工的,也有机械的。如果薄层层析板用量较少,可以用手工的,如果用量较大,还是用机械的更加方便快捷!下面先介绍一下配置方法:1. CMC-Na溶液的配置:一般其浓度为0.3~0.5%,根据自己经验而定(我习惯用0.4%的)。具体方法如下:先将预用的水加热至60~70℃,然后

薄层层析操作要点有哪些?

1、铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的

薄层层析显色剂如何选择

  1.如果灵敏度要求不高,可以加热碳化显色。  2.必须要告诉你的化合物结构,才可以根据特殊结构选择显色剂。如有共轭体系可以照紫外显色;如含有-NH2可用茚三酮显色等等。至于其他结构如含有糖类,酚类都有相应的比较适合的显色剂。

如何自制薄层层析硅胶板

1.取25g 羧甲基纤维素钠,在搅拌下加入到5000mL 水中,强力摇匀,放置备用。使用时,用300 目丝网过滤,所得滤液即为铺制薄层板的优质CMC 溶液。(由于CMC 在水中溶解速度很慢,放置两周或更长的时间,才可以溶解比较完全。可以采用一次性配制较多的溶液,留待以后多次使用。尽管放置较长时间,C

薄层层析板常用制备方法

薄层层析板制备方法有很多,有手工的,也有机械的。如果薄层层析板用量较少,可以用手工的,如果用量较大,还是用机械的更加方便快捷!下面先介绍一下配置方法:CMC-Na溶液的配置:一般其浓度为0.3~0.5%,根据自己经验而定(我习惯用0.4%的)。具体方法如下:先将预用的水加热至60~70℃,然后加入C

薄层层析(TLC)实验操作步骤

薄层色谱(TLC )是一种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。流动相则是一种极性待选的溶剂。在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用

食用合成色素的测定

  天然食品及食品原料多数本身具有特有的色泽和香味,人们在长期的生活习惯中也认识了各种食品应有的色泽,食品的色泽已经成为食品的一个重要感官指标。然而,食品在保存及加工过程中,其色泽往往会有不同程度的变化,为了改善食品的色泽,使食品尽可能恢复原来的颜色,除采取一定护色措施外,往往还得添加一定量的食用色

食用合成色素的测定

天然食品及食品原料多数本身具有特有的色泽和香味,人们在长期的生活习惯中也认识了各种食品应有的色泽,食品的色泽已经成为食品的一个重要感官指标。然而,食品在保存及加工过程中,其色泽往往会有不同程度的变化,为了改善食品的色泽,使食品尽可能恢复原来的颜色,除采取一定护色措施外,往往还得添加一定量的食用色素,

柱层析色谱技术种类及原理是什么

  一、 吸附层析  1、 吸附柱层析  吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。  2、 薄层层析  薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相,以液体为流动相的一种层析方法。这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层,然后按纸层析操作进行

食用合成色素的测定(三)

  Rf(比移值)=斑点移动距离/溶剂前沿距离   所使用的展开剂有:   1)正丁醇︰无水乙醇︰1%氨水 = 6︰2︰3   2)正丁醇︰吡啶︰1%氨水 = 6︰3︰4   3)异丁醇︰无水乙醇︰水 = 3︰2︰2   ⑼ 提纯色素溶液的薄层分离和定量   经过纸层析定性之

关于薄层层析的原位扫描法介绍

  原位扫描法,将展开后的薄层板放在光密度计内,以一定波长的光照射,同时使斑点移过光路,由于斑点对光的吸收,可绘出峰形曲线,由峰面积与标准样品的吸收相比较而求出含量。

离心薄层层析仪的结构特点

1. 主体离心机和LBC-Ⅰ结构相同,但将原石英玻璃盖板换为 普通玻璃盖板。2. 挂式分液漏斗配以适当的导管、阀门、支架、流量计等制流量,达到供给样品与控制洗脱剂需要量之目的。取消LBC-Ⅰ之微量泵。3. 取消LBC-Ⅰ型之紫外灯。由于这些特点,它于LBC-Ⅰ型的性能有基本一致处,但也有些不同之处,

薄层层析的洗脱测定法介绍

  洗脱测定法,将展开后的组分斑点处的吸附剂刮下,用适宜溶剂将组分洗脱溶出,然后用适当方法进行定量测定。常用方法为比色法、紫外-可见分光光度法,也可用电化学分析法等。

关于薄层层析法制板的相关介绍

  铺制薄层板时,要求基底板洁净平整,可用干法或湿法铺制。现常用湿法制板,即将吸附剂和粘合剂(如烧石膏)按一定比例混合,加入适量水调匀,用涂布器将此匀浆缓慢地移过基底板,放置晾干,再经适当烘烤活化后即可使用。如不加粘合剂和水,直接将吸附剂均匀地铺成薄层,则为干法制板。现在市场上已有各种制好的薄层板出

氨基酸的薄层层析实验原理

  聚酰胺薄膜层析是60年代以后发展起来的一种新的层析方法,特别适用于氨基酸及其衍生物的分析。具有灵敏度高、分辨率强、操作方便快捷等特点。  聚酰胺是一类化学纤维素原料,即锦纶(尼龙)。由乙二酸和乙二胺聚合而成的,称锦纶66。  由于分子中含有大量的酰胺基团,故称聚酰胺。聚酰胺薄膜是在涤纶片基上涂上

薄层层析中常见的问题有哪些

拖尾现象产生之原因及解决方法:1、点样量太多,展开剂不能全部负载。解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,

薄层层析用的硅胶板如何活化

薄层层析用的硅胶板放在105度环境中烘30min即可完成活化。刚打开的塑料封装的可以不活化,打开放置一段时间后再用是需要活化。 活化的目的是除除硅胶中吸附的水分子,增加硅胶板的吸附能力。还有一个非常简单的判别分类的办法就是,不同型号的硅胶在于其中石膏含量的不同,这一点体现在硅胶的粘稠度不同,石膏含量

薄层层析用的硅胶板如何活化

  薄层层析用的硅胶板放在105度环境中烘30min即可完成活化。刚打开的塑料封装的可以不活化,打开放置一段时间后再用是需要活化。 活化的目的是除除硅胶中吸附的水分子,增加硅胶板的吸附能力。  还有一个非常简单的判别分类的办法就是,不同型号的硅胶在于其中石膏含量的不同,这一点体现在硅胶的粘稠度不同,

薄层层析中展开剂的选择

薄层层析中展开剂的选择:    1)主要根据极性的不同来选择流动相展开剂。各种展开剂按其极性不同排序为:烷烃

食用合成色素的测定——薄层层析法

1、原理聚酰胺是具有二极性的化合物,在酸性条件下与水溶性酸性染料结合,而与天然色素、蛋白质、脂肪、淀粉等物质分离,然后再在碱性条件下解吸色素,再在薄层层析法进行分离鉴别,与标准比较定性、定量(纸层析进行定性,薄层层析进行定量)。2、操作步骤食品其形态是千变万化的,添加在食品中的色素方式亦是各种各样的

薄层层析的应用特点及支持物

在玻璃片、金属箔或塑料片上铺上一层约1~2毫米的支持物,如纤维素、硅胶、离子交换剂、氧化铝或聚酰胺等,根据需要做不同类型的层析。聚酰胺薄膜是一种特异的薄层,将尼龙溶解于浓甲酸中,涂在涤纶片基上,当甲酸挥发后,在涤纶片基上形成一层多孔的薄膜,其分辨力超过了用尼龙粉铺成的薄层。薄层层析较纸层析优越在于分

常用的层析分析方法

  在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。  一、 吸附层析  1、 吸附柱层析  吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。  2、 薄层层析  薄层层析是

薄层层析(thin-layer-chromatography)操作要点

铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶 G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板

薄层层析法可以鉴别哪些物质

很多,比如说中药方面,有效成分:生物碱类物质,黄酮类物质,醌类物质等;特性的薄层还可以鉴别蛋白质等物质。

薄层层析法操作注意事项

1.铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的

食用合成色素的测定(一)

  天然食品及食品原料多数本身具有特有的色泽和香味,人们在长期的生活习惯中也认识了各种食品应有的色泽,食品的色泽已经成为食品的一个重要感官指标。然而,食品在保存及加工过程中,其色泽往往会有不同程度的变化,为了改善食品的色泽,使食品尽可能恢复原来的颜色,除采取一定护色措施外,往往还得添加一定量的食用色

关于薄层层析法的基本信息介绍

  薄层层析法以吸附层析使用最为普遍。常用的吸附剂为硅胶、氧化铝等。薄层层析和其他层析法一样,除吸附法外,也可进行分配、离子交换、分子排阻等机理的层析,即将铺制薄层的材料相应换为涂以固定相的载体、离子交换剂、凝胶等,其操作与吸附法基本相同。