溶血空斑试验——小室液相法

一、基本原理 溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四天后将小鼠杀死,取脾脏制成脾细胞悬液,内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞,补体混合孵育。由于PFC 所分泌的抗体和绵羊红血球结合形成抗原抗体复合物,在补体作用下可使红细胞溶解,于特制的小室内形成肉眼可见的溶血空斑。一个空斑即代表一个抗体形成细胞。 二、实验材料 1. 解剖器械、试管、1ml 吸量管 2. 载玻片、石蜡盘、酒精灯、微量加样器 3. ICR 小鼠(北京大学医学部实验动物中心提供) 4. 5%和10%绵羊红血球(SRBC) 5. 补体(经SRBC 吸收,临用时稀释成合适浓度) 三、实验方法 1. 小鼠免疫及脾细胞悬液的制备: ......阅读全文

介绍液液分配色谱法的正相色谱法和反相色谱法

    高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。本文讲的是液液分配色谱法的正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。    使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分

液相法氮化镓晶体生长研究

GaN是一种宽带隙半导体材料,具有高击穿电压、高的饱和电子漂移速度、优异的结构稳定性和机械性能,在高频、高功率和高温等应用领域具有独特的优势。在光电子和功率器件中具有广阔的应用前景。在液相生长技术中,助溶剂法和氨热法是生长高质量GaN的有效方法,该论文全面总结了这两种方法生长GaN的研究进展,详细分

高效液相色谱柱后衍生法特点

保证舌尖上的安全,是国家十三五计划的重要战略。国家卫计委印发的《食品安全标准与监测评估“十三五”规划(2016-2020年)》提出在“十三五”期间进一步完善食品安全标准与监测评估工作体系,制订、修订300项食品安全国家标准,自修订起陆续实施。    3月1日起,新实施的这一批国家标准包括GB 478

关于高效液相色谱的内标法介绍

  采用不加校正因子的峰面积法。取供试品,按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图Ⅰ;再配制含有内标物质的供试品溶液,在同样的条件下注样,记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外,应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数,色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30%以上,否则

与经典液相(柱)色谱法比较

经典液相(柱)色谱法使用粗粒多孔固定相,装填在大口径、长玻璃柱管内,流动相仅靠重力流经色谱柱,溶质在固定相的传质、扩散速度缓慢,柱入口压力低,仅有低柱效,分析时间冗长。    高效液相色谱法使用了全多孔微粒固定相,装填在小口径、短不锈钢柱内,流动相通过高压输液泵进入高柱压的色谱柱,溶质在固定相的传质

关于高效液相层析法的基本介绍

  高效液相层析法(HPLC)是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上,引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。由于HPLC分离能力强、测定灵敏度高,可在室温下进行,应用范围极广,无论是极性还是非极性,小分子还是大分子,热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。对蛋

高效液相色谱外标法测含量

测量对照品溶液和供试品溶液中待测成分的峰面积或峰高计算:含量等于对照品的峰面积/待测物质的峰面积*标准品的浓度

高效液相外标法含量测定公式

高效液相外标法含量测定公式是含量%=(A样×m对×样品的稀释倍数)/(A对×m样×对照品的稀释倍数)×100%,高效液相是高效率的液相色谱。高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱

液相检测,内标法检测限怎么计算

待测峰/基线噪音〉3为检测限,待测峰/基线噪音〉10为定量限。内标法请参照CHP2010附录V D 高效液相色谱法---3.测定法---(1)内标法

高效液相外标法含量测定公式

高效液相外标法含量测定公式是含量%=(A样×m对×样品的稀释倍数)/(A对×m样×对照品的稀释倍数)×100%,高效液相是高效率的液相色谱。高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱

高效液相色谱分析法与气相色谱法的区别

高效液相色谱分析法(HPLC),它的基本概念及理论基础(如保留值、塔板理论、速率理论、容量因子、分离度等),与气相色谱是一致的,但又有不同之处:高效液相色谱与气相色谱的主要区别可归结于以下几点:(1)进样方式的不同:高效液相色谱只要将样品制成溶液,而气相色谱需加热气化或裂解;(2)流动相的不同,在被

高效液相内标法与外标法有什么区别

高效液相内标法与外标法的区别如下:1、方法不同内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子。外标法是按梯度添加一定量的标准品于空白溶剂中制成对照样品,与未知试样平行地进行样品处理并检测。2、要求

高效液相法影响出峰时间的因素

首先是柱子类型(包括填料类型,粒径,柱内径,柱长等);其次是流动相配比(包括不同极性流动相及其配比);流速;柱温等。在柱子一定的条件下,同一物质(假设为C18柱),流动相中有机相比例越高出峰时间越早,流速越快出峰时间越早(一般流速固定),柱温一般影响不大。

关于高效液相层析法的主要类型介绍

  ⑴ 液-固吸附层析:固定相是具有吸附活性的吸附剂,常用的有硅胶、氧化铝、高分子有机酸或聚酰胺凝胶等。液-固吸附层析中的流动相依其所起的作用不同,分为 “底剂”和洗脱剂两类,底剂起决定基本色谱的分离作用,洗脱剂起调节试样组份的滞留时间长短,并对试样中某几个组份具有选择性作用。流动相中底剂与洗脱剂成

高效液相色谱的主成分自身对照法

  当杂质峰面积与成分峰面积相差悬殊时,采用主成分自身对照法。在测定前,先按各品种项下规定的杂质限度,将供试品稀释成一定浓度的溶液作为对照溶液,进样,调节检测器的灵敏度或进样量,使对照溶液中的主成分色谱峰面积满足准确测量要求。然后取供试品溶液,进样,记录时间,除另有规定外,应为主成分保留时间的倍数。

高效液相法影响出峰时间的因素

首先是柱子类型(包括填料类型,粒径,柱内径,柱长等);其次是流动相配比(包括不同极性流动相及其配比);流速;柱温等。在柱子一定的条件下,同一物质(假设为C18柱),流动相中有机相比例越高出峰时间越早,流速越快出峰时间越早(一般流速固定),柱温一般影响不大。

高效液相色谱的内标法的相关介绍

  采用不加校正因子的峰面积法。取供试品,按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图Ⅰ;再配制含有内标物质的供试品溶液,在同样的条件下注样,记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外,应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数,色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30%以上,否则

关于高效液相层析法使用仪器的介绍

  典型的高效液相层析仪包括输液系统、层析柱与检测系统三部分。流动相用一高压泵输入。这种高压泵应满足以下条件:  ①流量恒定,无脉动,并有较大的调节范围。  ②能抗溶剂腐蚀。  ③有较高的输出压力,一般要达到15~300kg/c,也有的高达800kg/c。  ④泵的死体积要小。梯度洗脱装置必须具备两

高效液相法影响出峰时间的因素

首先是柱子类型(包括填料类型,粒径,柱内径,柱长等);其次是流动相配比(包括不同极性流动相及其配比);流速;柱温等。在柱子一定的条件下,同一物质(假设为C18柱),流动相中有机相比例越高出峰时间越早,流速越快出峰时间越早(一般流速固定),柱温一般影响不大。

液液萃取气相色谱法快速测定发酵液中的己酸含量

对液液萃取-气相色谱法测定发酵液中己酸的方法进行研究.样品经硫酸酸化后采用萃取剂萃取,上层液再经微孔滤膜过滤.结果表明,乙酸乙酯为最佳萃取剂,发酵液样品最佳pH值为2.处理后样品直接进入白酒分析专用色谱柱(型号FFAP),火焰离子化检测仪(flame ionization detector,FID)

常用的鉴别方法高效液相色谱和气相色谱鉴别法

一般规定按供试品含量测定项下的高效液相色谱条件进行试验,要求供试品和对照品色谱峰的保留时间(tR)一致。含量测定方法为内标法时,要求供试品溶液和对照品溶液色谱图中药物峰的保留时间与内标物的保留试剂比值应相同。高效液相色谱和气相色谱鉴别法操作比较复杂,耗时长,一般在检查或含量测定项下已采用色谱法的情况

简述毛细管电泳法和高效液相法的区别

  毛细管电泳法和高效液相法的区别:CE和高效液相色谱法(HPLC)相比,其相同处在于都是高效分离技术,仪器操作均可自动化,且二者均有多种不同分离模式。二者之间的差异在于:CE用迁移时间取代HPLC中的保留时间,CE的分析时间通常不超过30min,比HPLC速度快;对CE而言,从理论上推得其理论塔板

高效液相色谱色谱法检测样品大概多少体积的流动相

不同的样品洗脱体积是不同的,以保留时间计算,大概在7min-15min出峰为宜,当然这是对单一样品来说的,如果目标峰或干扰峰较多,则首先要考虑的是分离度。这样计算的话(1ml/min的流速),一个样品大概需要10-20ml的流动相,另外色谱柱的平衡也需要消耗流动相。

高效液相色谱法与气相色谱相比液相色谱的优点

高效液相色谱法与气相色谱相比液相色谱的优点 :与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以及其他各种高分子化合物等。此外,液相色谱的流动相不仅起到使样品沿色谱柱移动的作用,而且与固定相一

《乌索酸纯度的测定液相法》国标颁布

  近日,由宜春学院承担起草的GB/T24773-2009《乌索酸纯度的测定高效液相色谱法》国家标准已由国家标准委正式批准发布,这是宜春继《乌索酸国家标准样品》项目研制成功后,取得的又一项标准成果。   据悉,乌索酸作为一种化学物质在日用化工、功能食品及医药保健方面具有重要用途。宜春学院以天然植物

高效液相色谱分析法的原理

高效液相色谱分析原理:(一)高效液相色谱分析的流程:由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统,然后输出,经流量与压力测量之后,导入进样器。被测物由进样器注入,并随流动相通过色谱柱,在柱上进行分离后进入检测器,检测信号由数据处理设备采集与处理,并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离(极性范围比较宽

高效液相色谱分析法的原理

高效液相色谱分析原理:(一)高效液相色谱分析的流程:由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统,然后输出,经流量与压力测量之后,导入进样器。被测物由进样器注入,并随流动相通过色谱柱,在柱上进行分离后进入检测器,检测信号由数据处理设备采集与处理,并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离(极性范围比较宽

高效液相色谱分析法的原理

高效液相色谱分析原理:(一)高效液相色谱分析的流程:由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统,然后输出,经流量与压力测量之后,导入进样器。被测物由进样器注入,并随流动相通过色谱柱,在柱上进行分离后进入检测器,检测信号由数据处理设备采集与处理,并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离(极性范围比较宽

高效液相层析法的主要类型及其分离原理

根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间

高效液相色谱分析法的类型

高效液相色谱分析法的类型:1.正相分配色谱正相分配色谱适用于不溶于水溶于有机溶剂中具有极性基团的样品,而正相分配色谱不适用于离子物质..2.反相分配色谱该方法广泛应用于反相分配色谱。样品的非极性部分起着保留作用。在流动相中加入不同量的甲醇或乙腈可以调节分离,但如果样品含有离子基团,则需要在流动相中加