核酸电泳的指示剂与染色剂

指示剂 核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色,它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA大致相似. 指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液.载样缓冲液的作用有①增加样 品密度,使其比重增加,以确保DNA均匀沉入加样孔内.②在电泳中形成肉眼可见的指 示带,可预测核酸电泳的速度和位置.③使样品呈色,使加样操作更方便. 染色剂 核酸电泳后,需经染色后才能显现出带型,最常用的是溴化乙锭染色法,其 次是银染色. 溴化乙锭(ethidium bromide,EB)是一种荧光染料,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对 之间,在紫外线激发下,发出红色荧......阅读全文

关于核酸电泳的基本信息介绍

  带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳.核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分.核酸电泳通常在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行,浓度不同的琼脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子筛网孔大小不同的凝胶,可用于分离不同分子量的核酸片段.

一文简述核酸电泳的原理

  琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物。将琼脂糖在所需缓冲液中加热熔化成清澈、透明的溶胶,然后倒入胶模中,凝固后将形成一种固体基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。  将凝胶置电场中,在中性pH值下带电荷的核酸通过凝胶网孔向阳极迁移,迁移速率受到核酸的分子大小、构象、琼脂糖浓度、所加电压、电场、电泳

PCR扩增产物的电泳分析2

2)染色剂:核酸电泳后,需经染色后才能显现出带型,最常用的是溴化乙锭染色法,其次是银染色。溴化乙锭(ethidium bromide,EB)是一种荧光染料,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下,发出红色荧光。根据情况可在凝胶电泳液中加入终浓度为 0.5ug/ml的EB,有时亦可

核酸凝胶电泳观察法

实验原理:琼脂糖是海藻中提取的线状高聚物,不同浓度的琼脂糖密度不同,一般PCR产物使用2%浓度,0.5Kb-10Kb的DNA使用1%浓度,基因组DNA使用0.3%-0.7%浓度;不同大小的核酸在同一浓度的凝胶中迁移率不同,因为分子越大其受琼脂糖的阻力越大,迁移率与碱基对的对数值成反比;同分子量不同构

关于核酸电泳—琼脂糖凝胶电泳的仪器及试剂介绍

  琼脂糖凝胶电泳的仪器及试剂:  仪器设备应包括水平凝胶电泳槽及其配套电泳梳、稳压电泳仪、微波炉或普通电炉。同时配备紫外线检测仪和照相系统。  试剂包括琼脂糖、电泳缓冲液、溴化乙锭溶液、凝胶加样缓冲液。  电泳缓冲液常用TBE(1 000ml中含5.4g Tris,2.75g硼酸,2ml 0.5

地衣红指示剂的用途与保存

生物染色剂,如鞭毛媒染剂。检验痰液中的弹性组织。本品应密封于阴凉干燥处保存。

染色剂的分类

一、按来源可以分为1.天然染色剂:主要是苏木素,胭脂红,地衣红,番红花。 2.合成染色剂:是从煤焦油中提取的苯衍生物。在生物染色中还使用一些无机化合物,如硝酸银,氯化金,磺,锇酸,高锰酸钾等。二、按主要用途分为1.胞核染色剂:苏木素,胭脂红,甲苯胺蓝,美蓝,孔雀绿等。 2.胞浆染色剂:伊红,淡绿,橘

染色剂的分类

  一、按来源可以分为   1.天然染色剂:主要是苏木素,胭脂红,地衣红,番红花。   2.合成染色剂:是从煤焦油中提取的苯衍生物。在生物染色中还使用一些无机化合物,如硝酸银,氯化金,磺,锇酸,高锰酸钾等。   二、按主要用途分为   1.胞核染色剂:苏木素,胭脂红,甲苯胺蓝,美蓝,孔

琼脂糖核酸电泳标准实验步骤

琼脂糖核酸电泳1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子;2.根据欲分离DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml);3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧光染

核酸凝胶电泳染料该如何选择?

凝胶电泳是我们基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动,因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质,从而降低了对流运动,故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinder

核酸与核酸类似物的区别

核酸类似物是与天然存在的RNA和DNA类似(结构相似)的化合物,用于医学和分子生物学研究。核酸类似物在组成核酸的核苷酸分子以及组成核苷酸的碱基、五碳糖和磷酸基团的分子间发生了改变 。通常,这些改变使得核酸类似物种的碱基配对和碱基堆积性质发生了改变。比如通用碱基可与所有四个经典碱基配对,又比如磷酸-糖

络合滴定与常用金属指示剂

在化学分析中,常利用金属离子与某些试剂生成配合物的反应来测定某些金属离子的含量。什么是络合滴定?常用的金属指示剂又有哪些呢? 一、络合滴定法(配位滴定法) 利用形成配合物(或络合物)的反应进行的滴定分析法,称为配位滴定法,也称络合滴定法。金属离子与配合剂作用生成难电离的配离子或配合分子的反应

苏丹黑B染色剂的性质与稳定性

常温常压下稳定,蓝黑色结晶性粉末。溶于丙酮和甲苯,微溶于乙醇,几乎不溶于水。熔点126℃。最大吸收波长598(415)nm。半数致死量(小鼠,静脉)63mg/kg。

锥虫蓝染色剂的存储与使用说明

保存条件室温保存说明有潜在致癌危险为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

核酸的种类与作用

核苷酸是组成核酸的基本单位,即组成核酸分子的单体。一个核苷酸分子是由一分子含氮的碱基、一分子五碳糖和一分子磷酸组成的。根据五碳糖的不同可以将核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两大类。核酸DNARNA名称脱氧核糖核酸核糖核酸结构规则的双螺旋结构通常呈单链结构基本单位脱氧核糖核苷酸核糖核

核酸的发现与研究

核酸最早于1869年由瑞士医生和生物学家弗雷德里希·米歇尔分离获得,称为Nuclein [3]  。在19世纪80年代早期,德国生物化学学家,1910年诺贝尔生理和医学奖获得者科塞尔进一步纯化获得核酸,发现了它的强酸性。他后来也确定了核碱基。1889年,德国病理学家Richard Altmann创造

核酸的种类与作用

种类核苷酸是组成核酸的基本单位,即组成核酸分子的单体。一个核苷酸分子是由一分子含氮的碱基、一分子五碳糖和一分子磷酸组成的。根据五碳糖的不同可以将核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两大类。作用DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础。RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用——其中转

核酸的分离与纯化

从细胞中提取核酸后,仍混杂着蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。除去这些“杂质”的过程,也就是核酸提纯过程。在核酸的分离纯化时,为防止核酸大分子的变性降解,必须在0~4℃的低温条件下操作。核酸酶的水解作用,是过去制备具有活性核酸大分子的严重障碍,现普遍采用加入去污剂或加入EDTA、8-羟基喹啉、柠

关于核酸电泳—琼脂糖凝胶电泳的基本原理介绍

  琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物.将琼脂糖在所需缓冲液中加热熔化成清澈、透明的溶胶,然后倒入胶模中,凝固后将形成一种固体基质,其密度取决于琼脂糖的浓度.  将凝胶置电场中,在中性pH值下带电荷的核酸通过凝胶网孔向阳极迁移,迁移速率受到核酸的分子大小、构象、琼脂糖浓度、所加电压、电场、电泳

培养基的抑制剂与指示剂

目的:进行选择、鉴定及判断结果的需要。1.抑制剂目的在于抑制非检出菌(非病原菌)的生长,以利于检出菌(病原菌)的生长。常用的有胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。2.指示剂目的是为了便于观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝

中性红指示剂的性质与稳定性

1.常温常压稳定.2.与碘离子、汞和铟等的卤络阴离子形成有色离子缔合物。

琼脂糖凝胶电泳使用什么染色

用琼脂糖作支持介质。另外,实验室常用的核酸染色剂是溴化乙锭(EB)。要注意观察凝胶时应根据染料不同使用合适的光源和激发波长,如果激发波长不对,条带则不易观察,出现条带模糊的现象。其好处是染色效果好,操作方便,但是稳定性差,具有毒性。一般的核酸检测只需要琼脂糖凝胶电泳就可以;如果需要分辨率高的电泳,特

琼脂糖凝胶电泳使用什么染色

用琼脂糖作支持介质。另外,实验室常用的核酸染色剂是溴化乙锭(EB)。要注意观察凝胶时应根据染料不同使用合适的光源和激发波长,如果激发波长不对,条带则不易观察,出现条带模糊的现象。其好处是染色效果好,操作方便,但是稳定性差,具有毒性。一般的核酸检测只需要琼脂糖凝胶电泳就可以;如果需要分辨率高的电泳,特

关于吖啶橙的主要用途介绍

  用作荧光指示剂,肿瘤细胞及细菌、核酸染色剂及移码突变的诱变剂。  吖啶橙是一种荧光色素,吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光(即着色特异性),这是由于DNA是个高度聚合物,吸收荧光物质的位置较少,发绿色荧光,而

关于金属指示剂的封闭与僵化的介绍

  1.指示剂的封闭现象  在配位滴定时,金属指示剂与某些金属离子形成配合物(MIn),比相应的金属离子与EDTA形成配合物(MY)稳定,,而不能被EDTA置换,则溶液一直呈现MIn的颜色,即使到了化学计量点也不变色,这种现象称为指示剂的封闭现象。例如在pH=10时,以铬黑T为指示剂滴定Ca2+、M

核酸电泳常见问题及解决方案

核酸电泳常见问题及解决方案

分离血清蛋白质的凝胶电泳实验中常用染色剂有哪些

血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋原白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。

什么是酚酞指示剂?酚酞指示剂的作用

名称:酚酞指示剂拼音:fēn tài zhǐ shì jì解释:常见的酸碱指示剂之一,由酚酞溶解在酒精溶液中而成。在酸性或中性溶液中呈无色,在碱性溶液中呈红色。常用于化学实验及化工生产中。

核酸分离与纯化的设计与原则

细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子,均与蛋白质结合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)。其中真核生物的DNA

核酸分离与纯化的设计与原则

细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子,均与蛋白质结合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)。其中真核生物的DNA又有染色体DNA