免疫组化的操作规程

实验概要本实验介绍了免疫组化的操作规程。主要试剂1. PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2. 0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g。 3. 0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml。 4. 1mol/L的TBS缓冲液(pH8.0):在800ml水中溶解121gTris碱,用1N的HCl调至pH8.0,加水至1000ml。 5. 酶消化液: a、0.1%胰蛋白酶液:用0.1%CaCl2(pH7.8) 配制。 b、0.4%胃蛋白酶液:用0.1N的HCl配制。 6. 3%甲醇-H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲......阅读全文

免疫组化设备优势介绍

  免疫组织化学技术在病理诊断中具有十分重要的作用。为保证免疫组化制片的准确性,可重复性与整体染色的一致性,全自动免疫组化染色仪已被广泛使用。  全自动免疫组化仪的优点:  1. 全自动免疫组化仪具有对切片以及抗体的识别功能,保证抗体准确滴加无误;  2. 仪器内部恒温,基本不受外界环境温度影响; 

什么是免疫组化染色

是病理学诊断方法,尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位;(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型;(4)软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态

免疫组化实验方法

一、免疫组化(Immunohistochemistry,IHC/ Immunocytochemistry, ICC)原理免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质

石蜡切片免疫组化染色

实验概要掌握石蜡切片免疫组化染色实验中载玻片的处理,常用酶消化,抗原热修复及基本实验步骤。实验步骤1. 载玻片的处理     1) APES:现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱

常用免疫组化染色方法

常用免疫组化染色方法,真空负压免疫荧光染色法染细胞培养片。1. 将细胞爬于载玻片或盖玻片的片子用生理盐水浸洗数次,彻底洗去蛋白液。2.纯丙酮固定5-10分钟。3.PBS浸洗3次,每次1分钟。4.加入选用的第一抗体孵育真空负压处理15分钟。5.PBS洗3次,每次2分钟。6.加入荧光抗体孵育真空负压处理

什么是免疫组化检查?

  免疫组化,即免疫组织化学检测,是病理诊断中一种常用的检测手段。即对送检的标本进行切片、染色,进而根据化学反应使标记抗体的特殊显色剂显色,以此来确定组织细胞内的抗原,对其进行定位、定性及定量的研究。我们通过这些能看到的结果再做出合理的判断,提供给临床医师,为临床治疗医师提供治疗依据。

免疫组化SP法步骤

SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法.按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二

如何看懂免疫组化结果

看懂免疫组化结果方法如下:对照染色——定位——半定位——图像分析仪免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术

什么是免疫组化染色?

  免疫组化染色是一种利用抗原-抗体反应和组织化学方法来检测和定位特定蛋白质在组织细胞中的表达情况的技术。  具体来说,免疫组化染色的步骤包括:  制备组织切片:将组织样本切成薄片,放置在载玻片上。  阻断内源性过氧化物酶:为了减少非特异性染色,需要用含有过氧化物酶阻断剂的溶液处理组织切片。  抗原

免疫组化发展及原理

  1941年Coons首先用荧光素标记抗体—检测肺组织内的肺炎双球菌获得成功。  60年代 Akanke建立酶标抗体技术—铁蛋白标记Ab技术  70年代 Stemberger改良上述技术,建立辣根过氧化物酶—抗体过氧化物酶(PAP)技术,使免疫细胞化学得到广泛应用。  80年代 Hsu等建立了抗生

什么是免疫组化染色

是病理学诊断方法,尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位;(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型;(4)软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态

石蜡切片免疫组化实验

即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法 卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法 链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物(SABC)法            

石蜡切片免疫组化实验

实验方法原理 根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后,加入底物显色。实验材料 石蜡切试剂、试剂盒 PBS柠檬酸盐缓冲液蒸馏水增强剂酶标抗鼠 兔聚合物苏木素酒精二甲苯树胶盐酸二氨基联苯胺仪器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架显微镜胶头

免疫组化ABC法步骤

1、4%多聚甲醛常规灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中过夜。蜡块制作。切片,贴片。0.01MKPBS清洗5min×3后;2、加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%过氧化氢)30min,以消除内源性过氧化物酶的影响,0.01MPBS清洗5mi

免疫组化病理诊断(二)

2.5对“未分化”恶性肿瘤的分类未分化恶性肿瘤包括癌或肉瘤,在HE切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞的起源特征不能分类,初步区分组织学类型用非特异性抗体,在其基础上再选用特异性抗体做进一步鉴定。如分化差的癌可显示Vimentin或S-100蛋白,有时淋巴瘤可以表达上皮膜抗原,一些黑色素瘤表现出

免疫组化SP法步骤

SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二

石蜡切片免疫组化实验

即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法免疫组化可应用于:(1)确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究;(2)诊断异常细胞,指导治疗。实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后,加入

免疫组化镜检简介

  在镜检前可以通过相关资料查询抗体的表达部位:细胞间质、细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核以及在其中的多个部位表达(如:MPO抗体表达在细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核上)和表达组织(如:VWF抗体在血管壁上表达,呈现环形)。  在显微镜下观察时,先在4倍镜下查找组织及其范围,然后查看整个组织确定阳性产物的

免疫组化--病理诊断-(一)

在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段,从20个世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一

石蜡切片免疫组化步骤

实验概要石蜡切片免疫组织化学染色主要试剂染色缸;染色架;保湿盒;晾片盘;微量移液器;0.2MPBS,乙醇,二甲苯,BSA,中性树胶等实验步骤1.     石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟;2.     脱蜡和水化:二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95

免疫组化--病理诊断-(二)

2.6进一步分类不同器官与组织交界处肿瘤由于重叠的特征,在一些组织器官交界处的肿瘤,仅凭组织学基础对肿瘤进行分类很困难。如胃肠道梭形细胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是间质起源的胃肠道间质瘤(GIST),还是神经起源的神经鞘瘤;同样发生于组织交界处的肿瘤有睾丸胚胎癌与精原细胞癌,两者较难区别,且治疗与

免疫组化病理诊断(一)

在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段,从20世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一些

石蜡切片免疫组化染色

实验概要掌握石蜡切片免疫组化染色实验中载玻片的处理,常用酶消化,抗原热修复及基本实验步骤。实验步骤1. 载玻片的处理     1) APES:现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱

液体比重天平操作规程操作规程

 1、液体比重天平主要用途及作用原理液体比重天平是计量仪器之一,可供化工部门、科学研究部门的实验室等作测定液体比重之用。本天平是有一标准测锤体积(125px3)浸没于液体中获得浮力而使横梁失去平衡,然后在横梁的V形槽里放置各种定量骑码(砝码),使横梁恢复平衡,就能迅速正确测得该液体的比重。2、液体比

球磨机的操作规程

  1、开车前检查好机械和电器各部分,检查各连接螺栓是否松动;各润滑点润滑是否正常,传动装置是否正常可靠,防护装置完好,电器仪表是否灵敏,电机碳刷接触良好。  2、盘车一周,检查设备转动部分或周围有无障碍物,并消除。启动时周围不准站人。  3、检查无误后,按启动按钮启动电机,注意电流变化。磨球机连续

球磨机的操作规程

1、开车前检查好机械和电器各部分,检查各连接螺栓是否松动;各润滑点润滑是否正常,传动装置是否正常可靠,防护装置完好,电器仪表是否灵敏,电机碳刷接触良好。2、盘车一周,检查设备转动部分或周围有无障碍物,并消除。启动时周围不准站人。3、检查无误后,按启动按钮启动电机,注意电流变化。磨球机连续起动不得超过

马弗炉的操作规程

马弗炉,又称箱式电阻炉、高温马弗炉,是一种通用的加热设备,可分为箱式炉、管式炉、坩埚炉。安全技术操作规程:  1.使用时切勿超过本电阻炉的最高温度。  2.装取试样时一定要切断电源,以防触电。  3.不得将沾有水和油的试样放入炉膛;不得用沾有水和油的夹子装取试样。  4.装取试样时要戴手套,以放烫伤

移液器的操作规程

移液器的使用方法一个完整的移液循环:1、枪头安装正确的安装方法叫旋转安装法把移液器顶端插入枪头(无论是散装枪头还是盒装枪头都一样),在轻轻用力下压的同时,左右微微转动,上紧即可。2、移液体积设定粗调:通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值;细调:当体积值接近自己的预想值之后,应将移液器横置,

酶标仪的操作规程

  ⒈目的:  规范自动酶标仪的操作方法,确保正确使用自动酶标仪  ⒉应用范围:  (略)  ⒊内容:  (略)  开机  ⒋1.1将酶标仪后部的电源开关灯打开,仪器将显示自检、基础酶联、软件版本号,随后显示基础酶联、准备和时间。在自检过程中,仪器对每一个已装的滤光片选择合适的光强度,开机后,等候1

圆度仪的操作规程

一、准备工作        开空压机、开电脑、启动检测软件。注意设备气压未到0.5MPa时严禁转动主轴,否则会损坏设备! 二、工件准备        开始工件安放前必须保证工作台面和工件的检测面、基准面的干净,方可把工件安放于工作台上。工件须按测量要求正确安放或装夹于工作台上,并保证工件在检测过程不