高效液相色谱仪的主要性能指标有哪些
高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附 -解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。 HPLC广泛应用于生命科学、食品科学、药物研究以及环境研究中。 高效液相色谱仪的主要性能有以下几点: 高压——压力可达150~300 kg/cm2。色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。 高速——流速为0.1~10.0 mL/min。 高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份......阅读全文
高效液相色谱仪的维护经验
一.混合溶剂必须过滤并混合,如果要混合然后过滤,则仅有可能使用有机,并且绝对不可能使用水系统由于水系统的物质是纤维素有机相或多或少会溶解少量纤维素,造成污染。二.标准样品或样品最好用流动相溶解这样就可以避免很多麻烦。三.hplc柱加热升温的目的一方面是为了增加溶质的溶解度另一方面是为了降低溶剂的粘度
高效液相色谱仪过滤操纵要点
当任何颗粒物进入高效液相色谱仪时,都会被高效液相色谱仪色谱柱入口处的筛板堵塞。结果表明,高效液相色谱仪色谱柱堵塞的主要原因是系统压力增大,高效液相色谱仪色谱峰畸变。因此,有必要采取各种预防措施,包括商品仪表本身的操作步骤和各种过滤器设计,防止或减少颗粒物进入HPLC系统,从而延长仪器和色谱柱的使用寿
关于高效液相色谱仪的简介
高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中
高效液相色谱仪仪器工作原理
高效液相色谱仪仪器工作原理高效液相色谱仪是实现液相色谱分析的仪器设备,半个世纪以来,随着科学技术的发展,HPLC仪器也经历了几次重大改进,至今已成为性能齐全,提供数据可靠,在分离科学领域中占据重要地位的分析仪器。高效液相色谱仪的基本单元组成,高效液相色谱系统至少应包括高压输液系统、进样器、色谱柱、检
高效液相色谱仪维护及保养
1、手动进样器: 平时应该注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗;如果出现漏液现象,原因极可能为转子密封垫磨损或污染,一般要申请维修或更换配件。2、排液阀: 此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损,可卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。3、单向阀:
高效液相色谱仪国家标准
《高效液相色谱仪》(GB/T 26792-2011)《High performance liquid chromatography》于2011年12月1日实施。
高效液相色谱仪检测芥子含量
高效液相色谱仪检测芥子含量含量测定 照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.08mol/L磷酸二氢钾(10:90)为流动相;检测波长为326nm;理论板数按芥子碱峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备 取芥
高效液相色谱仪滤芯如何清洗
用20%HNO3, 超声30 min, 后用双蒸水, 超30min,重复这一步骤到pH=7. 然后再用50% MeOH (HPLC gradient grade 的水和MeOH)再超30min, 可能会有改进,不过一般俺是直接换个新的.不知你说的滤芯,是指哪个?如果是石英的溶剂过滤头,只能用HNO3
高效液相色谱仪的分离原理
储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被
高效液相色谱仪应用举例(五)
例16.多肽分析(生物)样 品:含G-Y等3种多肽物质的混合物色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站检测器:ELSD美国Alltech MKⅢ蒸发激光散射检测器漂移管温度为110℃,氮气流速为2.19L/min色谱柱:AlltimaTM C18 ,5μm,柱长25cm,柱径4.6m
高效液相色谱仪流动相概述
根据流动相所起的作用,高效液相色谱仪流动相可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况,洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。流动相又称洗脱剂、淋洗液、展层剂或溶剂。一、流动相选择的一般要求:1、流动相的纯度。2、流动相与固定相不互溶,不发生化学反应。3、对样品要有适宜
高效液相色谱仪的应用实例
气相色谱法与高效液相色谱法的比较:气相色谱法虽具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大
高效液相色谱仪应用举例(一)
例1.稠环芳烃分析(环境气体分析)样 品:含六苯并苯等8种稠环芳烃的混合物色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站检测器:UV紫外检测器,340nm色谱柱:C18键合相(ODS-224),5μm,柱长25cm,柱径4.6mm流动相:甲醇-二氯甲烷(8:2)混合溶剂流 速:1mL/mi
高效液相色谱仪的应用特点
高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除锈剂的分析等物质的分析。
高效液相色谱仪的基本操作
一、实验准备阶段需要配置好实用所需的流动相,要注意所使用的流动相不能对实验或设备造成影响或损害(比如堵塞或腐蚀)。准备好流动相之后,需要对仪器及色谱柱进行冲洗和平衡,确保仪器压力正常,基线稳定。样品填写需要经过必要的净化处理,过0.45um以下微孔滤膜确保样品是澄清溶液,并装入合适的液相色谱样品瓶待
高效液相色谱仪梯度洗脱曲线
高效液相色谱仪梯度洗脱时,常用一个弱极性溶剂A和一个强极性溶剂B组合,以梯度洗脱时间为横坐标,以流动相中强极性组分B的体积百分含量为纵坐标,可绘出梯度洗脱曲线。若在单位时间内,强极性溶剂B在流动相中的体积百分含量以恒定速率增加,则流动相的极性呈线性梯度输出;若不以恒定速度增加,则流动相的极性呈凸形或
高效液相色谱仪的原理特点
高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱,也可以拓展为制备系统,采用高压混合器连接两个高压恒流泵,利用RS232通讯,即可实现梯度分析; 便于用户自由选择与搭配,混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成,用途广泛; 可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等
高效液相色谱仪应用举例(二)
例5.茶碱分析(茶叶)样 品:含茶碱等三种物质的混合物色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站检测器:UV紫外检测器,280nm色谱柱:Micro μBondapak C18 ,8μm,柱长25 cm,柱径4.6 mm流动相:二甲基二酰胺:甲醇:醋酸:水 = 23.5:1:0.5:7
高效液相色谱仪的发展历史
1960年代,由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性,为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱的时代。高效
高效液相色谱仪的工作原理
液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成
高效液相色谱仪溶剂输送系统
储液器:用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器,以防止流动相中的颗粒进入泵内。脱气器:脱气的目的是为了防止流动相从色谱柱内流出时释放出气泡进入检测器,从而引起噪声,不能正常检测。输液泵:将储液器中的流动相连续不断地以高压形式进入液路系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。梯度洗脱装置:是在分
高效液相色谱仪的使用步骤
高效液相色谱仪也叫高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱等,它是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。1
高效液相色谱仪应用举例(三)
例9.糖类分析(食品分析)样 品:含果糖等6种糖类物质的混合物色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,四元梯度泵,色谱工作站检测器:Mark ⅡA型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器漂移管温度为100℃,氮气流速为2.2L/min。色谱柱:Absorbosphere, NH2 ,柱长25c
高效液相色谱仪日常维护经验
一.混合溶剂在混合前必须过滤。在混合和过滤的情况下,只能使用有机溶剂,不能使用水系统。由于水系统的物质是纤维素,有机相或多或少地溶解了少量的纤维素,造成污染。二.标准样品或样品应在流动相中溶解,避免了许多麻烦。三.升温提高色谱柱的温度部分是为了增加溶质的溶解度,更重要的是降低溶剂的粘度,从而提高色谱
高效液相色谱仪脱气常用方法
在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC 也已成为不可或缺的分析仪器。流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。下面分析一下,高效液相色谱脱气的必要性,并总结归纳了脱气常用的方法。一、脱气的必要性 流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC
高效液相色谱仪的使用问题
1. 色谱柱中的流动相会排干吗? 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏
高效液相色谱仪流动相要求
高效液相色谱仪流动相要求1.流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选择流动相时应考虑以下几个方面: ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱
高效液相色谱仪进样系统
高效液相色谱仪进样系统(1)六通阀进样阀 进样阀种类繁多常用的六通阀进样阀。进样体积可通过选择不同体积定量管来改变,常规高效液相色谱仪中通常使用的是10μL和20μL体积的定量管。其手柄有两个位置:一个位置为采样位置(Load),可用平头微量注射器(体积应约为定量管体积的4~5倍)注入样品溶液,样
高效液相色谱仪进样系统
进样系统进样器:是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。
高效液相色谱仪的工作原理
高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出