酿酒酵母源Shu复合物在DNA同源重组过程中发挥生物学功能

近日,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所丁建平研究组的研究成果,以Structural basis for the functional role of the Shu complex in homologous recombination为题,在线发表在《核酸研究》(Nucleic Acids Research)上,该研究揭示了Shu复合物在DNA同源重组过程中发挥生物学功能的分子机制。 当作为遗传信息载体的DNA受到损伤后,会造成其结构和遗传信息的改变,继而影响到DNA的复制和转录等过程,导致细胞周期停滞和基因表达失调,最终可能引发细胞的癌变或死亡。对于数量庞大、类型多样的DNA损伤,细胞进化出一系列DNA损伤修复机制,用于保证基因组的完整性和稳定性。近年来,丁建平研究组致力于DNA损伤修复通路相关蛋白质的结构与功能研究,先前已报道范可尼贫血信号通路中MHF1-MHF2复合物和FANCM-FAA......阅读全文

酿酒酵母培养条件实验_酵母培养物的储存

实验方法原理酵母在琼脂或液体培养基中的理想培养温度是30℃,培养皿平板应倒置放入塑料盒中,于孵箱或培养室内进行培养。当孵育时间超过2或3天时,塑料盒可防止平板上的琼脂干裂。当使用液体培养基培养时,要使用旋转式或往复式摇床,至少每分钟200转,以保证充分通气;进行大体积液体培养时使用锥形瓶,培养基为瓶

DNA重组(DNA-recombination)技术:外源基因的蛋白表达1

通过外源DNA的重组、克隆、以及鉴定,可以获得所需的特异DNA克隆。外源克隆基因在某种表达载体及适宜的宿主细胞中可表达为相应的蛋白质,这就组成了外源基因的蛋白表达系统。表达后的蛋白质必须具有原来的生物学活性,这是基于正确的基因转录、转录后加工、mRNA翻译及翻译后修饰,同时与表达载体的结构和表达体系

DNA重组(DNA-recombination)技术:外源基因的蛋白表达3

(6)遗传标记: 从成千上万个哺乳细胞中,检测出极少数的含DNA重组体的转染细胞,并鉴定已导入外源DNA是哺乳动物细胞基因表达系统的一个关键内容。因此,在真核生物表达载体上必须附有标记基因,才能进行筛选。常用的标记基因有:胸苷激酶基因(thymidine kinase,TK)、二氢叶酸还原酶

DNA重组(DNA-recombination)技术:外源基因的蛋白表达2

2.包涵体的分离与纯化细胞破碎时提取细胞内产物的关键。对于细菌的裂解常用的有酶溶法、超声破碎法、化学渗透法、玻璃珠研磨等。包涵体可通过超声波、匀浆等常规的方法是菌体破碎后,离心就可得到。密度梯度离心后可得到高纯度的包涵体。包涵体一般不溶于水,为了获得可溶性的蛋白质可加入强蛋白质变性剂后使其溶解。一般

DNA重组(DNA-recombination)技术:外源基因的蛋白表达4

(3)CHO细胞稳定表达系统:动物细胞瞬时表达系统中外源基因没有稳定地整合到宿主细胞染色体中,一染色体外DNA的形式存在。因而只能瞬时表达。要使外源基因在宿主细胞中高效、稳定地表达,必须建立一个稳定表达系统,包括适宜的表达载体、有效的基因转染、标记基因和目标基因的选择与共扩增、受体适当的受体细胞和培

重组[酵母]乙肝疫苗的概念和功能

中文名称重组[酵母]乙肝疫苗英文名称hepatitis B vaccine made by recombinant DNA technique in yeast定  义一种预防乙型肝炎的疫苗。即借助基因工程技术,使酵母细胞表达重组的乙型肝炎病毒表面抗原(HbsAg),经纯化并加佐剂吸附而制成。应用学

人工合成4条酵母染色体我国科学家开启“再造生命”新纪元

  大姑娘出嫁——头一回!3月10日出版的国际顶级学术期刊《科学》,以封面的形式同时刊发了中国科学家的4篇研究长文!  由天津大学、清华大学和华大基因分别完成的这4篇长文,介绍了真核生物基因组设计与化学合成方面的系列重大突破:完成了4条真核生物酿酒酵母染色体的从头设计与化学合成——要知道,酿酒酵母总

Nature:配对为了遗传交换

  对于重组的发生而言,染色体必须找到它们同源的伴侣,随后确定遗传重组的位点。两项新的研究为了解同源染色体如何找到并确定彼此透露了更多的信息,一项研究在裂殖酵母中完成的,另一项则在芽殖酵母中进行。另一个研究小组改进了对小鼠体内后续步骤的理解——测定了双链断裂的位点。   在酿酒酵母中,染色体配对伴

BARD1泛素化核小体在促进同源重组修复过程中的重要作用

  DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)是真核细胞中最为严重的DNA损伤类型之一,单个裸露的DSB即可诱发细胞凋亡。DSB主要通过非同源末端连接(NHEJ,non-homologous end-joining)和同源重组(HR,homologous recom

氮气发生器在酿酒过程中的应用

  在啤酒酿造中,使用氮的优势随着制氮机生产技术的日趋完善也越来越明显,主要表现在:  1、对酒无影响 : 氮气无臭、无味、无色,对啤酒口味无影响。  2、可与CO2混合使用 : 当回收的CO2不够使用时,可采用氮气与CO2的混合气体,较单独使用CO2经济。  3、能显著改变啤酒泡沫性能 : 氮气溶

关于人工染色体克隆载体的介绍

  人工染色体克隆载体实际上是一种穿梭克隆载体,含有质粒克隆载体所必备的第一受体(大肠杆菌)源质粒复制起始位点,还含有第二受体(如酵母菌)染色体DNA着丝点、端粒和复制起始位点的序列,以及合适的选择标记基因。这样的克隆载体在第一受体细胞内可以按质粒复制形式进行高拷贝复制,在体外与目的DNA片段重组后

3种常用基因功能验正方法简述

  科研人员在分析项目的过程中,碰到这样的问题:通过各种手段(选择清除分析、比较基因组学分析、转录组分析)获得的行驶某种功能的某基因,如果进行实验的验正呢?一般分为:基因上调(基因转染法)、基因下调(基因干扰法)后看蛋白表达水平、细胞功能改变、在体动物模型中相关功能的变化等。   相信大家也有

3种常用基因功能验正方法简述

  科研人员在分析项目的过程中,碰到这样的问题:通过各种手段(选择清除分析、比较基因组学分析、转录组分析)获得的行驶某种功能的某基因,如果进行实验的验正呢?一般分为:基因上调(基因转染法)、基因下调(基因干扰法)后看蛋白表达水平、细胞功能改变、在体动物模型中相关功能的变化等。   相信大家也有

研究揭示染色体结构维持复合物Smc5/6的组装及调控机制

  6月18日,中国科学院上海免疫与感染研究所王岚峰研究组联合复旦大学陈振国课题组、美国纪念斯隆-凯特琳癌症中心赵晓岚课题组,在《自然-结构与分子生物学》(Nature Structural & Molecular Biology)上发表了题为Cryo-EM structures of Smc5/6

研究揭示染色体结构维持复合物Smc5/6的组装及调控机制

6月18日,中国科学院上海免疫与感染研究所王岚峰研究组联合复旦大学陈振国课题组、美国纪念斯隆-凯特琳癌症中心赵晓岚课题组,在《自然-结构与分子生物学》(Nature Structural & Molecular Biology)上发表了题为Cryo-EM structures of Smc5/6 i

关于同源重组的基本介绍

  同源重组( homologous recombination)是指发生在两段同源序列之间的DNA片段交换。两段同源序列既可以完全相同,也可以存在差异,既可以位于两个DNA分子上,也可以位于一个DNA分子中。真核生物的同源染色体交换及姐妹染色单体交换、细菌的转导和转化、噬菌体的重组都属于同源重组。

同源重组的概念和过程

同源重组(Homologous Recombination) 是指发生在非姐妹染色单体(non-sister chromatid) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、Rec

同源重组的原理是什么?

  同源重组(Homologous Recombination) 是指发生在非姐妹染色单体(sister chromatid) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等

MSH5基因编码功能及结构描述

该基因编码muts家族的一个成员,参与dna错配修复和减数分裂重组。该蛋白类似于酿酒酵母蛋白,在减数分裂过程中参与分离保真度和交叉事件。该蛋白在促进电离辐射诱导的细胞凋亡中发挥作用。该蛋白与该家族的另一成员muts同源物4形成杂寡聚体。该基因的多态性与多种人类疾病有关,包括iga缺乏、常见的可变免疫

MSH5基因突变与药物因子介绍

该基因编码muts家族的一个成员,参与dna错配修复和减数分裂重组。该蛋白类似于酿酒酵母蛋白,在减数分裂过程中参与分离保真度和交叉事件。该蛋白在促进电离辐射诱导的细胞凋亡中发挥作用。该蛋白与该家族的另一成员muts同源物4形成杂寡聚体。该基因的多态性与多种人类疾病有关,包括iga缺乏、常见的可变免疫

清华生命中心俞立研究组发现能量匮乏诱导自噬分子机制

  2017 年 4 月 10 日,清华生命中心俞立研究组在《Developmental Cell》期刊上发表“线粒体 Snf1-Mec1-Atg1 复合物通过调控线粒体呼吸介导能量匮乏诱导的细胞自噬”(Formation of a Snf1-Mec1-Atg1 Moduleon Mitochond

重组蛋白表达系统

选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用。在这里,我

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用

关于酿酒酵母的筛选的介绍

  酿酒酵母的无性繁殖方式筛选。对液体培养基培养48h的酵母菌株,在16×40倍显微镜镜检,筛选出以多端出芽繁殖的菌株。  WL琼脂培养基筛选酿酒酵母。将分离出来的酵母菌株,接种液体培养基活化24h后接种到WL琼脂培养基,27℃培养Sd后观察,筛选出菌落颜色为奶油色(浅黄色)至绿色,表面为球形突起,

关于酿酒酵母的分类的介绍

  酵母属狭义酿酒酵母组( Saccharomyces sensu stricto),包括7个紧密相关的种:酿酒酵母(Sac. cerevisiae)、奇异酵母(Sae. paradoxus)、贝酵母(Sac. bayanus)、巴斯德酵母(Sae. pastorianus)、里约酵母(Sac. c

酿酒酵母的生长条件介绍

  酿酒酵母在自然界中分布较广,属兼性厌氧微生物。繁殖时需要大量的氧气,而酒精发酵时就不需要氧气。 [14]  酿酒酵母的生长速率明显受到环境变化的影响,其中温度和pH值是主要的两个方面。温度是一种几乎可以影响细胞内所有生物化学进程的因素。高温可使一些蛋白、DNA、RNA变性,并且会影响细胞生物膜的

RAD52基因的结构特点和生理作用

该基因编码的蛋白质与酿酒酵母rad52相似,rad52是dna双链断裂修复和同源重组的重要蛋白。该基因产物与单链dna末端结合,介导dna与dna的相互作用,这是dna链退火所必需的。同时发现其与dna重组蛋白rad51相互作用,提示其在与rad51相关的dna重组和修复中的作用。这个基因的假基因存

我国学者解析DNA复制起点识别复合物高分辨冷冻电镜结构

  在国家自然科学基金项目(项目批准号:31761163004、31725007、31630087)等资助下,北京大学生命科学学院高宁教授课题组与香港科技大学戴碧瓘教授课题组合作,解析了酿酒酵母ORC结合DNA复制起始位点3-Å分辨率的冷冻电镜结构。研究成果以 “Structure of the O

PAD54B基因的结构特点和主要作用

该基因编码的蛋白质属于类死亡螺旋酶超家族它与酿酒酵母rad54和rdh54具有相似性,两者都参与dna的同源重组和修复。这种蛋白质与双链dna结合,在dna存在下显示atpase活性。该基因在睾丸和脾脏中高度表达,提示其在减数分裂和有丝分裂重组中具有重要作用在原发性淋巴瘤和结肠癌中观察到该基因的纯合