镍柱上的咪唑
为什么咪唑可以把镍柱上的组氨酸蛋白洗脱下来?(1) 发布时间：2018-11-09 蛋白纯化 分子筛。 随着分子生物学的发展，越来越多的科研人员熟练掌握了分子生物学的各种试验技术，并研制成套试剂盒，使基因克隆表达变得越来越容易。但分子生物学的上游工作往往并非是最终目的，分子克隆与表达的关键是要拿到纯的表达产物，以研究其生物学作用，或者大量生产出可用于疾病治疗的生物制品。相对与上游工作来说，分子克隆的下游工作显得更难，蛋白纯化工作非常复杂，除了要保证纯度外，蛋白产品还必须保持其生物学活性。纯化工艺必须能够每次都能产生相同数量和质量的蛋白，重复性良好。这就要求应用适应性非常强的方法而不是用能得到纯蛋白的最好方法去纯化蛋白。在实验室条件下的好方法却可能在大规模生产应用中失败，因为后者要求规模化，且在每日的应用中要有很好的重复性。本文综述了蛋白质纯化的基本原则和各种蛋白纯化技术的原理、优点及局限性，以期对蛋白纯化的方法选择......阅读全文
食品中1甲基咪唑、2甲基咪唑及4甲基咪唑的测定
GB 5009.282-2020 食品安全国家标准 食品中1-甲基咪唑、2-甲基咪唑及4-甲基咪唑的测定GB5009.282-2020.pdf
柱色谱法的上样方式对比
干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶头滴管转移得到的溶液，沿着层
柱色谱法的上样方法介绍
上样也有干法和湿法之分：干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶头滴
柱色谱法的上样方法分析
上样也有干法和湿法之分：干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶头滴
柱层析的装柱和上样方法
装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂
柱色谱法的上样方法的介绍
上样也有干法和湿法之分：干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶
镍柱纯化后的蛋白，上下翻转混匀时易聚沉
镍柱纯化后纯度不错，但是很不稳定。为了防止蛋白浓缩前就沉在浓缩管中，我会在15ml管中预混合几管蛋白，如果小心操作，用移液枪吹吸混匀，最高可以浓缩到5mg/ml左右；如果上下翻转混匀，就会在管中迅速沉淀，伴有大量泡沫（絮状沉淀会挂在气泡上）而吹吸混合几乎不产生泡沫。
pbs咪唑配方
pbs咪唑配方：卵磷脂与胆固醇比例为8比1，其中卵磷脂0.08g、胆固醇0.01g，姜黄素含量为0.1mgpbs用量30ml。甲巯咪唑片的配方药物成分是甲巯咪唑，是用于甲状腺功能亢进的药物治疗，尤其适用于不伴有或伴有轻度甲状腺增大。
咪唑是什么
三氮唑是指三个氮构成的化合物，四氮唑是指四个氮构成的化合物，三唑、四唑及咪唑类化合物都是一大类，咪唑没有（生物）活性，你说的是不是他们的碱性大小！咪唑的碱性大是因为N上的孤对电子，咪唑的结构是个共轭的!他的衍生物应分类讨论：如咪唑边上连有苯环（或吸电子基）和N上的孤对电子共轭，会使其碱性减弱；当连有
影响样品在色谱柱上凝结速度的因素
一、色谱柱柱温的初始温度1.基本是zui容易也是zui快做到的方法，一般来说初始温度越低的话，分析物凝结的越好2.初始温度如果设在比zui快出峰分析物的沸点低50℃左右，温度保持的时间基本就是非分流的保持时间二、色谱柱“固定相比例”越低的固定相比例，意味着越厚的膜厚，膜越厚样品和溶剂越容易溶解在固定
影响样品在色谱柱上凝结速度的因素
一、色谱柱柱温的初始温度1.基本是zui容易也是zui快做到的方法，一般来说初始温度越低的话，分析物凝结的越好2.初始温度如果设在比zui快出峰分析物的沸点低50℃左右，温度保持的时间基本就是非分流的保持时间二、色谱柱“固定相比例”越低的固定相比例，意味着越厚的膜厚，膜越厚样品和溶剂越容易溶解在固定
pritA蛋白纯化有杂带咋办
用肝素柱进一步纯化。如果结合核酸可以考虑用肝素柱进一步纯化。镍柱纯化的时候不用咪唑梯度浓度洗杂，一般用低浓度（10 mM）的溶液洗就可以了，如果有chaperone的话可以用高盐洗一下。
毛细管液相色谱柱的柱上筛板的原位热聚合制备
摘 要: 利用有机聚合物的原位聚合反应, 在0132 mm内径的弹性石英毛细管内制备了3 mm长的柱上筛板,该筛板可以耐受至少40MPa的压力。将5μm C18填料填充到带有筛板的毛细管内, 制备了毛细管液相色谱柱, 色谱分离结果令人满意。用该筛板制备的色谱柱结构最大程度地避免了柱后死体积的产生。
左旋咪唑的用量用法
驱蛔虫：成人每日100-200mg，饭后1小时顿服。儿童每日每千克体重2-3mg驱钩虫：每日100-200mg，饭后1小时顿服，连服2-3日。治丝虫病：每日200-300mg，分2-3次饭后服，连服2-3日。癌瘤的辅助治疗：1日量150-250mg，连服3日，休息11日，然后再进行下1疗程。治疗类风
左旋咪唑的用量用法
驱蛔虫：成人每日100-200mg，饭后1小时顿服。儿童每日每千克体重2-3mg驱钩虫：每日100-200mg，饭后1小时顿服，连服2-3日。治丝虫病：每日200-300mg，分2-3次饭后服，连服2-3日。癌瘤的辅助治疗：1日量150-250mg，连服3日，休息11日，然后再进行下1疗程。治疗类风
甲苯咪唑的检查方法
A晶型取本品与含A晶型为10%的甲苯咪唑对照品各约25mg,分别加液体石蜡0.3ml,研磨均匀,制成厚度约0.15mm的石蜡糊片,同时制作厚度相同的空白液体石蜡糊片作参比,照红外分光光度法(通则0402)测定,并调节供试品与对照品在803cm-1波数处的透光率为90%~95%分别记录620~803c
镍离子金属鳌合亲和层析介质（NiNTA）说明书（二）
1、 标准蛋白， 2、上样液， 3、流穿液， 4：20mM洗脱液， 5：50mM洗脱液，6：100mM洗脱液， 7：200mM洗脱液， 8：300mM洗脱液， 9：400mM洗脱液。 （2）使用Ni-NTA Agarose纯化His标签重组蛋白包涵体 条件和前面的方
液相色谱法术语概念柱上富集
柱上富集（on-column enrichment）试样通过色谱柱时，使痕量组分在色谱柱上逐渐地增加的一种分离技术。
液相色谱法术语概念柱上检测
柱上检测（on- column detection）利用高灵敏检测技术，对毛细管柱中固定相末端的流出组分直接进行检测，以减少毛细管柱与检测器之间的柱外效应。
柱上开关操作和维护注意事项
柱上隔离开关是一种特殊开关，它主要是使用在电线杆上保障用电安全的一类安全开关，一般来说，柱上开关都是安装在电杆上，它的主要作用就是用于隔离电路的高压，是一种典型的户外隔离开关。 柱上开关的用处其实是非常大的，当开关是合闸状态的时候，它能够对运输电路上的相关工作电流和短路电流进行承载工作，
镍离子金属鳌合亲和层析介质（NiNTA）说明书（一）
一、 简介 金属螯合亲和层析介质，又称固定金属离子亲和色谱，其原理是利用蛋白质表面的一些氨基酸，如组氨酸能与多种过渡金属离子如Cu2+，Zn2+，Ni2+，Co2+，Fe3+发生特殊的相互作用，能够吸附富含这类氨基酸的蛋白质，从而达到分离纯化的目的。因此，偶联这些金属离子的琼脂糖凝胶就能够选择性地分
硅胶柱上液—固色谱洗脱剂的溶剂序列
硅胶柱上液—固色谱洗脱剂的溶剂序列ε0ⅠⅡⅢ0.00戊烷戊烷戊烷0.0542%氯化异丙烷—戊烷3%二氯甲烷—戊烷4%苯—戊烷0.1010%氯化异丙烷—戊烷7%二氯甲烷—戊烷11%苯—戊烷0.1521%氯化异丙烷—戊烷14%二氯甲烷—戊烷26%苯—戊烷0.204%乙醚—戊烷26%二氯甲烷—戊烷4%乙酸
基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
。。。等待高人回答txstbbm(站内联系TA)可能情况：1，ORF不完整或者不是预期的ORF，His没表达出来2，His被空间结构所掩盖，建议变性后再过柱cloudy3197(站内联系TA)同一ls，可能跟蛋白空间结构有关，变性后再上柱。2. 柱子是新的还是以前用过的,旧的应该很好的处理一下,3.
蛋白质纯化武器——工艺篇（二）
（2）包涵体溶解 看了包涵体洗涤部分，怎么溶解包涵体应该心中有数了。无非就是pH，变性剂，还原剂，表面活性剂等等的组合。经典的包涵体溶解液的配方为：pH8.0，20mM Tris，8M Urea。说它经典，是因为我用的最多，嘻嘻。再根据个性蛋白纯化的需要往这个配方里面加调料，如
咪唑、尿素怎么配
尿素在纯化包涵体时用，一般用8M的尿素加到含有咪唑的磷酸缓冲液中，纯化可溶性蛋白时不用加尿素。洗杂蛋白时咪唑的浓度一般是20mM。洗脱目的蛋白时咪唑浓度在500mM时能将大部分蛋白都洗脱下来，如果想让蛋白纯度高的话，可以用不同的咪唑浓度，设置成梯度进行洗脱，我们实验室一般是80mM，100mM，20
咪唑、尿素怎么配
尿素在纯化包涵体时用，一般用8M的尿素加到含有咪唑的磷酸缓冲液中，纯化可溶性蛋白时不用加尿素。洗杂蛋白时咪唑的浓度一般是20mM。洗脱目的蛋白时咪唑浓度在500mM时能将大部分蛋白都洗脱下来，如果想让蛋白纯度高的话，可以用不同的咪唑浓度，设置成梯度进行洗脱，我们实验室一般是80mM，100mM，20
咪唑溶液怎么配置
配置的时候你可以直接使用一个水，然后加点点盐或者加点点溶液，这样的话搅拌在一起就可以了，非常的简单。
分析饮料中的2甲基咪唑和4甲基咪唑含量
一、引言焦糖色素是一种允许使用的着色剂，我国对焦糖色使用量的规定除个别产品外均为按生产需要适量使用，其中规定仅有亚硫酸铵法生产地焦糖色允许使用在碳酸饮料中。而以加氨或其铵盐制成的焦糖（Ⅲ类氨法焦糖和Ⅳ类亚硫酸铵法焦糖）会产生4-甲基咪唑，并且4-甲基咪唑是一种能够诱发肿瘤的高水平的化学物质。焦糖色素
色谱柱配柱时在担体上涂渍固定液采用的常规方法
一般配常用的色谱柱,大都采用“常规”涂渍法,其简要操作为:取所需量的固定液,用适量(能浸过担体)的溶剂溶解,将担体缓缓倒入其中,随到随搅,而后用红外灯照射(或用水浴蒸发)以赶走溶剂,则固定液就附着于担体上了。
总镍（镍离子）在线分析仪－总镍在线分析仪
测量方法：丁二酮肟(二甲基乙二醛肟)分光光度法 测试量程：（0 -0.5）mg/l,（0-2）mg/l,（0-5）mg/l,（0-20）mg/l四档量程自动切换 检测下线：0.005mg/l 分辨率：