放射免疫分析的原理(三)

RIA法的影响因素 pH和离子强度;反应温度,温度一般为37℃,也有45℃,室温,4℃ 冰箱;反应时间,操作中的注意事项:戴手套、防护镜等,将试剂盒从冰箱中取出,室温下放置30 min方可使用。 (1)编号:第一排是标准管:根据标准品浓度由低到高A,B,C,D,E,F,G……;第二排是被测样品1,2,3,4,5,6,……。 (2)加样要准确,移液器的使用(两个档位,一档吸人,二档排出)吸头(一个标本一个吸头,避免互相污染)。加试剂:先看瓶签,再摇匀,最后吸人。(标记物一般为红色,一抗为兰色)。 (3)温育时间要保证:按说明书中所要求的时间温育,可以延长,不能缩短。 (4)分离剂加入:混匀静置时间,可以延长,不能缩短。保证抗原抗体复合物与第二抗体的充分结合。 (5)温度:注意观察水浴箱的水温,误差不能太大,为±1℃ ,室温21℃左右。 (6)离心时间:也应按说明书中所要求来操作,转速一般为3 500r/min。往......阅读全文

放射免疫分析的临床意义都有哪些?

  激素类检测:  1、在垂体性腺激素卵泡刺激素(FSH),黄体生成激素(LH),睾丸酮(T),雌二醇(E2),孕酮(P),催乳素(PRL),人生长激素(HGH),人绒毛膜促性腺激素(HCG),人胎盘催乳素(HPL)等。  2、甲状腺腺激素。  肿瘤类检测:  甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA)

简述放射免疫分析法的优缺点

  RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结

血液的化学检验项目放射免疫分析介绍

放射免疫分析介绍:  放射免疫技术为一种将放射性同位素测量的高度灵敏性、精确性和抗原抗体反应的特异性相结合的体外测定超微量(10-9-10-15g)物质的新技术。广义来说,凡是应用放射性同位素标记的抗原或抗体,通过免疫反应测定的技术,都可称为放射免疫技术,经典的放射免疫技术是标记抗原与未标抗原竞争有

放射免疫分析的实验方法及测定

(一)抗原抗体反应将未标记抗原(标准品和待测样品)、标记抗原和特异性抗体加入反应试管中,在一定条件(温度、时间及介质pH)下进行竞争抑制反应。先加待测样品(或标准品)和抗血清,使非标记抗原与抗体达到结合平衡,然后再加入标记抗原竞争与抗体结合。(二)分离结合与游离标记物RIA反应平衡后,标记抗原与试剂

放射免疫分析标记物的纯化及鉴定

(1)纯化不论使用何种制备方法,要获得合格的标记化合物,都必须将反应物经过仔细的分离、纯化。另外,一些标记化合物,经过一定时间的存放后,可发生脱碘和自身辐射造成蛋白质被破坏形成碎片,会出现不纯物,故需对标记物重新纯化。125I标记反应后的混合液需进行分离纯化以除去游离 I 和其他试剂,纯化标记物的方

三效蒸发器的原理的原理及特点

  三效蒸发器的原理   将第一个蒸发器产生的二次蒸汽再次当作加热源,引入另一个蒸发器,只要控制蒸发器内的压力和溶液沸点,使其适当降低,则可利用第一个蒸发器产生的二次蒸汽进行加热。此时,第一个蒸发器的冷凝处就是第二个蒸发器的加热处。这就是多效蒸发原理。每个蒸发器称为一效,通入生蒸汽的蒸发器为第一效,

三氯醋酸反应原理

三氯醋酸(TCA)是一种有机化合物,其反应原理主要涉及到它的酸性和亲电性。下面是三氯醋酸常见的反应原理:1. 酯化反应:三氯醋酸可以与醇反应生成酯。反应机理是三氯醋酸的羧基与醇的羟基发生酯化反应,生成酯和水。2. 羧化反应:三氯醋酸可以与芳香胺、脂肪胺等反应生成相应的羧酸。反应机理是三氯醋酸的羧基与

三磷酸腺苷的配位原理

(1)由于在咪唑环和苯环上存在N元素,还有苯环上的氨基上的N元素,他们都存在着孤对电子,在溶液中加入金属离子,就有可能发生配位反应。(2)在酸性溶液中氢离子与金属离子间存在竞争(金属离子有可能被质子化)即氢离子浓度过大。(3)苯环,咪唑环以及氨基上的氮元素的配位能力不一样,配位能力越强的越容易与金属

三种柱层析的原理

在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、 薄层层析 薄层层析是以涂布于玻板或

三磷酸腺苷的配位原理

(1)由于在咪唑环和苯环上存在N元素,还有苯环上的氨基上的N元素,他们都存在着孤对电子,在溶液中加入金属离子,就有可能发生配位反应。(2)在酸性溶液中氢离子与金属离子间存在竞争(金属离子有可能被质子化)即氢离子浓度过大。(3)苯环,咪唑环以及氨基上的氮元素的配位能力不一样,配位能力越强的越容易与金属

三磷酸腺苷的配位原理

(1)由于在咪唑环和苯环上存在N元素,还有苯环上的氨基上的N元素,他们都存在着孤对电子,在溶液中加入金属离子,就有可能发生配位反应。(2)在酸性溶液中氢离子与金属离子间存在竞争(金属离子有可能被质子化)即氢离子浓度过大。(3)苯环,咪唑环以及氨基上的氮元素的配位能力不一样,配位能力越强的越容易与金属

三种柱层析的原理

在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、 薄层层析 薄层层析是以涂布于玻板或

三磷酸腺苷的本位原理简介

  (1)由于在咪唑环和苯环上存在N元素,还有苯环上的氨基上的N元素,他们都存在着孤对电子,在溶液中加入金属离子,就有可能发生配位反应。  (2)在酸性溶液中氢离子与金属离子间存在竞争(金属离子有可能被质子化)即氢离子浓度过大。  (3)苯环,咪唑环以及氨基上的氮元素的配位能力不一样,配位能力越强的

三效蒸发器的原理

   将第一个蒸发器产生的二次蒸汽再次当作加热源,引入另一个蒸发器,只要控制蒸发器内的压力和溶液沸点,使其适当降低,则可利用第一个蒸发器产生的二次蒸汽进行加热。此时,第一个蒸发器的冷凝处就是第二个蒸发器的加热处。这就是多效蒸发原理。每个蒸发器称为一效,通入生蒸汽的蒸发器为第一效,并由二次蒸汽通入方向

放射免疫分析的同位素标记介绍

标记物标记物是指通过直接或间接的化学反应将放射性核素连接到被标记分子上所形成的化合物。制备高比度、高纯度和具完整免疫活性的标记物是建立高质量放射免疫分析法的重要条件。在放射免疫技术中,常用的放射性核素有放射γ射线和β射线两大类。前者主要为 125I、131I、57Cr 和 60Co;后者为3H、14

放射免疫分析中造成测量误差的因素

     造成误差的可能来源有以下几方面:  1.各种仪器:设备的准确性、稳定性、效率以及被污染等情况带来的误差。如:①由于放射性测量仪器的稳定性、效率、样品试管的材料和均匀性及被测物的放射性强度等原因。②由于样品的自吸收,本底校正,测定时间,可能的污染等原因。③在试验室中所有的移液管、微量取样器以

蛋白质与多肽激素的放射免疫分析

蛋白质与多肽激素的放射免疫分析第一节 概述  1960年,美国学者Yalow 和Berson 创立了放射免疫分析(Radioimmunoassay,RIA),并首先用于糖尿病人血浆中胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破,开辟了医学检测史上的一个新纪元。它使得那些原先认为是无法

放射免疫分析顺序饱和加样程序

一、基本原理先将标准物或血样品与抗血清混匀,免疫反应6~24h,使抗原与抗体充分结合,甚至达到平衡,然后再加入标记抗原,与抗体反应12~24h,最后分离B与F,这称为顺序饱和分析法。应用顺序饱和加样,可以提高测定方法的灵敏度。Utiger在做人促甲状腺激素(TSH)放射免疫分析时,将标记物延至第2天

放射免疫分析技术主要用于检测

放射分析技术以抗原抗体反应为基础,同时具有很高的敏感性,能用于体内微量生物活性物质的测定。

放射免疫分析顺序饱和加样程序

 1.基本原理先将标准物或血样品与抗血清混匀,免疫反应6~24h,使抗原与抗体充分结合,甚至达到平衡,然后再加入标记抗原,与抗体反应12~24h,最后分离B与F,这称为顺序饱和分析法。  应用顺序饱和加样,可以提高测定方法的灵敏度。Utiger在做人促甲状腺激素(TSH)放射免疫分析时,将标记物延至

放射免疫分析平衡饱和加样程序

1.基本原理所谓平衡饱和,是指抗原和抗体反应达到再不结合,也不解离的平衡状态,称为饱和状态,即平衡饱和。所以,有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。2.加样程序一般先加标准物或被测样品,再加抗血清,最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合,提高

放射免疫分析平衡饱和加样程序

一、基本原理所谓平衡饱和,是指抗原和抗体反应达到再不结合,也不解离的平衡状态,称为饱和状态,即平衡饱和。所以,有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。二、加样程序一般先加标准物或被测样品,再加抗血清,最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合,提高

临床化学检查方法介绍放射免疫分析

放射免疫分析介绍:  放射免疫技术为一种将放射性同位素测量的高度灵敏性、精确性和抗原抗体反应的特异性相结合的体外测定超微量(10-9-10-15g)物质的新技术。广义来说,凡是应用放射性同位素标记的抗原或抗体,通过免疫反应测定的技术,都可称为放射免疫技术,经典的放射免疫技术是标记抗原与未标抗原竞争有

放射免疫分析的质量控制的目的和内容

放射免疫分析的质量控制包括两方面的内容:一方面对测定结果做精确分析;另一方面鉴定常规测定方法,对那些测定结果不好的方法加以改进,并建立新的测定方法。质量控制分四个方面:①在一个测定方法内产生的误差。②在同一实验室内不同方法之间产生的误差。③用同一测定方法,在各实验室之间产生的误差。④采用不同方法,在

放射免疫分析的注意事项及检查过程

  注意事项  晨起空腹静脉采血。  检查时:保持心理平衡,维持血液成分的相对稳定。  检查过程  从检验者处得到血液样本后,送放射检验科进行检验。具体过程:分别在一定数量的试管中加入不同浓度的血液样品,每管加入等量的放射性标记抗原和一定量的抗体,在4℃或37℃下保温,待反应平衡后进行分离,测量放射

放射免疫分析中测量的误差如何控制和避免

①选择准确性高的方法。对各种方法进行比较,淘汰粗糙及难以重复的方法。②建立方法对比。用相同的测量方法和不同的测量方法在同一实验室和不同实验室,在同一地区和不同地区,在同一时间和不同时间,对同一样品进行对比,检查产生误差的原因。③建立各种类型的标准。对标准品应规定纯度及制备方法、使用年限及贮存条件。④

实际生活中放射免疫分析法的应用

  此法用于在内分泌学中测定胰岛素、生长激素、甲状旁腺激素、血管紧张素、催乳素、黄体化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鉴别、诊断、研究激素的生理和药理作用,目前较多用于研究激素与受体结合的机理。在传染病学方面广泛用于乙型肝炎抗原的亚型分类测定。在临床免疫学上测定免疫球蛋白 G、免疫球蛋白E及抗脱

放射免疫分析的正常值及临床意义

  正常值  检测范围:  常规免疫:mg~μg(10-3~10-6 g);  荧光免疫酶免疫: μg~ng(10-6 ~10-9 g);  放射免疫,发光免疫:ng~pg(10-9 ~10-12 g);  PCRpg~fg(10-12 ~10-15 g)。  临床意义  激素类检测:  1、在垂体

关于放射免疫分析法的基本信息介绍

  1960年美国化学家R.S.耶洛和S.A.贝尔森提出此法,耶洛因此于1977年获得诺贝尔生理学或医学奖。  她从小酷爱自然科学。在大学里,她热衷于物理学,却致力於医学研究,她工作於纽约市布隆克斯区退伍军人医院,致力于「胜太荷尔蒙的放射免疫分析」。居里夫人自传和核子物理学家美籍意大利人费米的讲演,

放射免疫分析法的优缺点分别有哪些?

RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结果等