PCR仪常见问题及回答，值得一看！
一、遇到的问题 1. cDNA产量的很低 可能的原因： RNA模板质量低 对mRNA浓度估计过高 反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足 同位素磷32过期 反应体积过大，不应超过50μL 2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系 与反应起始时RNA的总量及纯度有关 建议在试验中加入对照RNA 第一链的反应产物在进行PCR扩增时，在总的反应体系中的含量不要超过1/10 建议用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物(GSP)用于第一链合成。由于RNA模板存在二级结构，如环状结果，有可能导致GSP无法与模板退火；或SSⅡ反转录酶无法从此引物进行有效延伸。 目的mRNA中含有强的转录中止位点，可以试用以下方法解决： a.将第一链的反应温度提高至50℃。 b.使用随机六聚体代替Oligo(dT)进行第一链反应。......阅读全文
梯度PCR仪与普通PCR仪的区别是什么？
PCR仪是广泛应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等领域的一款仪器设备，在实验室中的应用频率很高，而随着科技的发展以及行业实际工作的需要，梯度PCR仪等开始出现，而用户在进行了解的时候，往往不知道梯度PCR仪与普通PCR仪的区别，因此给他们的选择带来了一定的困难，因此下面就来简单介绍一下
快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是zui大变
PCR仪RACE的PCR结果有杂带
RACE PCR杂带或非特异性PCR条带可能是由于以下原因： *GSP与其他cDNA的非特异性结合会导致在扩增目的产物时得到无关产物。 *GeneRacer引物和cDNA的非特异性结合会导致产生一端带有GeneRacer引物序列的PCR产物。 *RNA降解。 *PCR管或试剂污染。 注
PCR新手指南：PCR仪的故障分析
PCR仪是一种在实验室使用频率及使用时间非常高的仪器，因此故障率也是比较高的。PCR仪的故障主要有以下几类：1、制冷半导体故障2、温度传感器故障3、控制板故障4、电源板故障5、热盖故障6、软件故障7、其他故障下面就这几类问题做简单分析。1、制冷半导体故障制冷半导体故障率与制冷半导体的质量、温度变化次
PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是zui大变
PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是最大变温速度
PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是zui大变温
德国艾本德eppendorf－5332－PCR仪维修－PCR基因扩增仪
艾本德Eppendorf 5332 PCR仪维修这款设备是德国艾本德公司的一款经典机型.市场占有率很高.虽然年限较长,但是很多用户还在使用.随着使用年数的增加,故障率随之增加.这台机器的故障是通电自检报故障,不能正常进入工作状态.检查机器的各部分电路,发现温度传感器出现老化偏差.更换老化的稳定传感器
荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别是什么？
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统，实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的，而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段，定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作，而反之就不行了，况且这样代价太大了，一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的功能
荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别是什么？
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统，实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的，而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段，定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作，而反之就不行了，况且这样代价太大了，一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的功能不
PCR仪|基因扩增仪工作原理
什么是PCR技术？PCR（Polymerase Chain Reaction）技术，中文译为聚合酶链式反应，是一种在体外（试管、切片…）扩增核酸的技术。PCR的基本反应包括以DNA为模板的反应和以mRNA为模板的反应。PCR技术是模拟体内天然DNA（脱氧核糖核酸）的复制过程。以扩增DNA为例，其基本
热循环仪(PCR仪)德国Biometra
热循环仪(PCR仪)--德国Biometra 热循环仪(PCR仪)--德国Biometra Biometra热循环仪具有下列突出优点： 智能热盖——预设的热盖压力使实验具有良好的操作性和重复性。 极低功耗——比同类产品极大地降低了功耗，因而噪音低，产热少，优
热循环仪(PCR仪)德国Biometra
·荷兰 Haffman公司最新研制的智能化仪器，它是数显DGM的改进型。它有以下几个特点；测量范围宽、精确度高、再现性好、没有偏移、绝对压力测量、先进识别系统。可为多达10个不同产品类型设定程序。体积比数显DGM型更小巧。优点：用户友善的操作和保养，耐用和人体工程学的手提式设计，备有重型电池，有
基因扩增仪（PCR仪）技术原理
基因扩增仪（PCR仪）技术原理：标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性，低温复性，适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光，随着循环次数的增加，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长，
基因扩增仪（PCR仪）技术原理
基因扩增仪（PCR仪）技术原理：标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性，低温复性，适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光，随着循环次数的增加，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长，通
PCR仪PCR注意事项及解决方案
1、PCR 污染PCR 技术的敏感性极高，极微量的污染即可导致假阳性的产生，因此，了解 PCR 污染的原因，采取相应的措施预防和消除 PCR 污染就十分重要。PCR 污染主要是随机污染，包括 PCR 反应前污染及反应后污染。（1）PCR 反应前污染主要是样品 DNA 的交叉污染。提取 DNA 使用的
pcr仪的工作原理
利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制的目的。
PCR仪定期运行维护
1.PCR仪器需要定期检测，视制冷方式而定一般半年至少一次。 2.PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的，当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1～2℃时，可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。 3.PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制，要求越短越好，当PCR仪的
实时定量PCR仪概述
实时定量PCR仪是一种用于生物学、基础医学、临床医学领域的分析仪器，于2016年2月23日启用。 ViiA7TM系统实现了很好的可重复性，孔间差异、批间差异、不同仪器间差异降至最低。仪器可与标准96孔板，快速96孔板，384孔及TaqMan微流体芯片和各种试剂完全兼容，在任何规模的实验室均可实
定量PCR仪的应用
定量PCR仪的应用实时荧光定量PCR技术（Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR）是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied biosystems公司推
实时荧光定量PCR仪
在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统，就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同，只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记，使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析
PCR仪反应主要步骤
PCR仪的要素基本的PCR须具备1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料（四种脱氧核苷酸）及水。 PCR仪工作原理 利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因
定量PCR仪的应用
实时荧光定量PCR技术（Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR）是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied biosystems公司推出，在PCR反应体
PCR仪的分类原则
简单的说，PCR仪就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR仪，原位PCR仪，实时
PCR仪有哪些分类
普通的PCR仪把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，叫传统的PCR仪，也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的，对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究，教学，医学临床，检验检疫等机构。梯度PCR仪把一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件
pcr仪的反应步骤
分别是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓 Denaturing乃是将DNA加热（至90~95℃）变性， 将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板. 而Annealing 则是令 Prim
实时荧光定量PCR仪
在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统，就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同，只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记，使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机
PCR仪的分类原则
简单的说，PCR仪就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR仪，原位PCR仪，实时
梯度PCR仪的适用
PCR仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应（Picymerase Chain Reaction , PCR）为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种病原体检测及基因分
PCR仪改进与完善
Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的Klenow片段，其缺点是：①Klenow酶不耐高温， 90℃会变性失活，每次循环都要重新加。②引物链延伸反应在37℃下进行，容易发生模板和引物之间的碱基错配，其PCR产物特异性较差，合成的DNA片段不均一。此种以Klenow酶催化