在做高效液相时流动相用完有气体进入会产生什么后果
系统的流路中存在气泡。由于气泡的存在,会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰,严重时会造成分析灵敏度下降;气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定,使基线起伏。造成上述现象的主要原因有三条:一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡;二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净;三是在注入样品时不注意混入了空气。为了避免这类问题的出现,液相色谱实际分析过程中必须重视对流动相进行脱气处理。常用的脱气方法有以下几种:1. 吹氦脱气法 使用在液体中比空气溶解度低的氦气,在0.1Mpa压力下,以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。此法使用于所有的溶剂,脱气效果较好,但在国内因氦气价格较贵,本法使用较少;2. 加热回流法 此法的脱气效果较好;3. 抽真空脱气法 此时可使用微型真空泵,降压至0.05-0.07MPa即可除区溶解的气体。显然使用水泵连接抽滤瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂......阅读全文
高效液相色谱进样量
可以的,不过最多只能进20微升,因为定量环是20微升的。
高效液相层析的相关介绍
高效液相层析(又名高压液相色谱),70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达3.5万KPa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填
高效液相层析的特点介绍
高压 液相色谱法以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~3.5万KPa。 高速 流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于 1h
高效液相层析操作注意要点
1)首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。 2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3)正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直
如何分析高效液相色谱图
分析色谱图的方法:手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定)。打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中,拔出针头好立刻关闭六通阀,一般随六通阀关闭电脑自动采样,等主峰跑
了解高效液相色谱的装置
高效液相色谱的装置主要有:输液泵,色谱柱,进样器,检测器,馏分收集器,数据获取和处理系统等。(一)输液泵:泵是一套高效液相色谱设备中重要的单元部件,是驱动溶剂和样品通过色谱分离柱和检测系统的高压源,其性能好坏直接影响整个仪器和分析结果的可靠性。用于分析目的的泵应当流量稳定、耐高压(30—60MPa)
高效液相色谱柱的选择
在高效液相色谱中,对色谱填料的要求十分严格,色谱填料的选择将关系到分离效果的好坏,所以我们的难题就是,该如何选择色谱填料呢?对此,杭州格图科技教您如何选择高效液相色谱柱。 首先,要选择合适的色谱填料,就必须对此有一定的认识和了解,因为色谱填料的选择范围太宽了,分别为聚合物填料、
高效液相层析法生化检验
高效液相层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。高效液相层析(HPLC)在经典液相层析法基础上,引进气相层析的理论而发展起来的一项新颖快速的分离技术。具有分离能力强、测定灵敏度高、可在室温下进行、应用范围广等优点,对分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和
高效液相色谱柱的管理
高效液相色谱柱的管理1 色谱柱的管理制定色谱柱管理的标准操作规程并严格执行。每一根新购进的色谱柱必须造册登记,内容包括:生产公司、品名、型号、规格、购进时间、启用时间、单价、柱内保护溶液等。色谱柱分类存放,硅胶柱、化学键合硅胶柱、氰基或氨基柱、离子交换树脂柱、凝胶柱各用一个色谱柱盒,盒上贴上标签,注
高效液相色谱柱故障排除
高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组
高效液相色谱柱的使用
高效液相色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。
高效液相色谱柱的保养
色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。我们在对色谱柱使用
高效液相色谱的维护如何?
高效液相色谱以它定量分析结果准确、分析周期短、分析范围广及分析检测限低等优势,在食品添加剂、药物成分分析等多领域得到了广泛的应用。 本文就液相色谱仪在实际操作时应注意的事项及维护做了简单介绍。 主要部件介绍 输液系统 输液系统主要包括在线脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置
高效液相层析法生化检验
高效液相层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。高效液相层析(HPLC)在经典液相层析法基础上,引进气相层析的理论而发展起来的一项新颖快速的分离技术。具有分离能力强、测定灵敏度高、可在室温下进行、应用范围广等优点,对分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和
高效液相色谱该如何保养
高效液相色谱的日常操作 1、流动性相的抽作规定: 高效液相级色谱醇,再次纯净水,缓存盐必须要过虑; 流动性相脱气步骤尤为重要(可选用抽滤,超声波脱气步骤等方式 ) 2、吸滤头: 独特状况下可拆下来滤头提取以分辨在其中是不是阻塞;也可以用注射针汲取流动性相根据吸滤头搞
高效液相色谱柱的选择
怎样选择色谱柱现代高效液相色谱中,分离效果好坏的一个重要指标是色谱填的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。一. 硅胶基质填料1·正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS
高效液相色谱柱的选择
1 硅胶基质填料正相色谱:正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相
高效液相色谱柱的选择
一、硅胶基质填料 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱
高效液相色谱光化学
1、引 言 磺胺(Sulfonamides,SAs)是一类广谱抗菌药物,广泛应用于水产养殖业和畜牧业,是预防和治疗细菌感染性疾病的化学药物。磺胺类药物还用于马、牛的传染性脑膜炎,羊下痢、猪下痢和弓形体病,并且对于禽类球虫病具有较好疗效。由于养殖业中磺胺类药物的使用导致了动物源性食物中残留,
高效液相色谱的测量方式
色谱柱的填料和流动相的组分应按各品种项下的规定.常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶很常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检
高效液相色谱柱温箱
在高效液相色谱分析系统中,对色谱柱温度控制的要求越来越高,药典及诸多新的分析方法,也对柱温给出条件,由于色谱柱恒温箱可以精确、稳定的控制色谱柱的使用温度,对于提高色谱柱的柱效,改善色谱峰的分离度,缩短保留时间,降低反压,保证分析样品结果的重复性,具有不可忽视的作用。使其成为高效液相色谱仪的重要配套装
高效液相色谱柱子的分类
高效液相色谱柱分类:1、吸附色谱;2、分配色谱;3、离子色谱;4、分子排阻色谱法/凝胶色谱;5、键合相色谱;6、亲和色谱
高效液相色谱的色谱柱
填料和流动相的组分应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。在用
如何分析高效液相色谱图
分析色谱图的方法:手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定)。打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中,拔出针头好立刻关闭六通阀,一般随六通阀关闭电脑自动采样,等主峰跑
怎样清洗高效液相的系统
装双通,流速0.5~1ml/min反相系统:10%、30%、50%甲醇按顺序冲洗100ml,70%甲醇冲30ml正相系统:流动相、用于过渡到水的溶剂各100ml以上,水有时间就多冲点,最后再从低浓度的甲醇慢慢置换回70%甲醇(正相有些实验比较麻烦,注意流动相之间的相容问题就好)
高效液相色谱柱如何选择
看你要测定的物质分类以及所用流动相的成分及运行梯度,色谱柱的作用是分离和萃取。色谱柱关系到分离效果的因素主要是物质在不同组分中的分配系数 在不同相中的分配系数 以及亲和力.。
如何分析高效液相色谱图
分析色谱图的方法:手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定)。打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中,拔出针头好立刻关闭六通阀,一般随六通阀关闭电脑自动采样,等主峰跑
高效液相基线不稳的原因
几种可能性:你的水相和有机相是怎么混合的?不要用在线排气,人为混合,然后减压抽滤之后再试一试。这根柱子的粒径是多少。长度是10cm,那么粒径呢?是5um?还是3.5um或是更小?粒径很小的柱子就不能开太大流速。柱压高不说,也没有必要。甲醇是不是干净?你的波长太低了。190nm的波长,甲醇已经有吸收了
高效液相色谱柱子的分类
高效液相色谱柱分类:1、吸附色谱;2、分配色谱;3、离子色谱;4、分子排阻色谱法/凝胶色谱;5、键合相色谱;6、亲和色谱
如何选择高效液相色谱柱
怎么选择色谱柱?首先确定我们需要检测什么样品。在根据样品选择使用的色谱柱,还有品牌型号,然后根据商家的推荐结合自己的样品来挑选。下面为大家介绍哈填充柱和毛细管柱填充柱比毛细管柱具有更高的样品容量,虽然这一差距由于HP发明了大孔 530mm 毛细管而大大缩小。检测器灵敏度的改进也减少了对大剂量样品的需