流式做简标抗体一抗,二抗分别孵多长时间

(1)单抗包被-抗原-酶标二抗-底物显色。本法首先也是用特异性抗体包被于固相载体,经洗涤后加入含有抗原之待测样品,如待检样品中有相应抗原存在,即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合,经保温孵育洗涤后,即可加入酶标记特异性抗体,再经孵育洗涤后,加底物显色进行测定,底物降解的量即为欲测抗原的量。(2)单抗包被-抗原-二抗-酶标二抗-底物显色。(改良双抗体夹心法)本法首先是将特异性抗体a包被于固相载体,经洗涤加入含有欲测抗原之待检样品。经孵育洗涤后再加一次未标记的特异性抗体b,而这次加入的抗体b于第一次包被于固相载体上的特异性抗体a对被测抗原来说都是特异性的,但不是用同种动物免疫制备的,否则可出现非特异性反应。经孵育洗涤后,再加酶标记抗b抗体,再经孵育洗涤后加底物显色进行测定。这种方法与双抗体夹心法不同之处是多加了一层抗体。因此,放大的倍数更高,故比双抗体夹心法更加灵敏。同时避免标记特异性抗体,而另一优点是只要标记一种抗抗体,即可达到......阅读全文

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

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免疫荧光标记为什么不直接标记一抗而标记二抗

因为一种一抗只识别一种底物,如果每种一抗都需要荧光标记,那这样成本很高。而二抗既可以和一抗结合,又带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗,提高了通用性。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体,即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。一抗二抗都是一种可以特异结

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

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磷酸化抗体二抗应该用bsa稀释吗

磷酸化抗体的一抗必须用BSA稀释,可以是1%~5%对于敏感性和特异性差的抗体会有帮助二抗其实没有用BSA稀释的要求,可以用脱脂奶粉稀释

Jackson-Immunoresearch公司二抗推荐的其产品保存方法

 l        对于未标记的抗体如单克隆抗体IgG部分,从正常血清中纯化的蛋白,Gamma球蛋白:物理状态:无菌过滤的液体保存:无菌条件下保存在2-8°C,每天准备新鲜的工作液。 l          对于正常血清,抗血清,过氧化物酶抗过氧化物酶免疫复合物物理状态:冻干粉重溶和保存:冻干粉保存在

elisa检测中二抗时间延长会造成什么影响

  二抗孵育  参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶标记的二抗。  吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如

磷酸化抗体二抗应该用bsa稀释吗

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磷酸化抗体二抗应该用bsa稀释吗

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临床医生抗高血压治疗应遵循的原则(二)

 “因此,J点的存在只是一个学术概念,实际上人们无法找到一个普遍适用于所有高血压人群的固定数值。”蒋雄京如是说。那么,在目前无法确定人群的J点在哪里的情况下,降压治疗应达到什么样的血压水平呢?蒋雄京认为,这就涉及到高血压的个体化治疗。降压首先要达标,要满足《中国高血压防止指南》的要求:普通高血压患者

抗核抗体检测的临床应用专家共识(二)

建议4 推荐以HEp-2细胞为实验基质的IIF法是进行ANA检测的参考方法和首选方法。建议5 采用以HEp-2细胞为实验基质的IIF法进行ANA检测时,HEp-2细胞在实验基质中每显微镜视野(放大倍数为200倍)应可见3~5个有丝分裂细胞;二抗应使用荧光素标记的抗人IgG抗体;IIF法检测ANA的稀

实验中在选择二抗时的注意事项

(1)一抗种属来源主要根据一抗种属来源来决定确定二抗的类型,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(如羊抗小鼠、兔抗小鼠等均可)。(2)一抗类型二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体.单克隆抗体的类别及亚类通常

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第二节-抗动脉粥样硬化药

第二节 抗动脉粥样硬化药    动脉粥样硬化是心脑血管疾病的主要病理基础,其所致的冠心病是发达国家的首要死亡原因。动粥的发病与遗传、饮食等因素有密切关系。一、            调血脂药(一).HMG-CoA还原酶抑制剂   他汀类[药理作用] 抑制HMG-CoA还原酶,从而阻断HMG-CoA向

抗埃疫苗进入第二轮人体实验

  世界卫生组织日前同意进行瑞士医药公司提出的第二轮抗埃博拉疫苗人体注射实验。世卫组织称,第二轮抗埃疫苗人体注射实验将由日内瓦大学各校立医院组织实施,如果本轮实验结果安全可靠,明年1月将在非洲国家大范围投入使用。世卫组织同意瑞士在日内瓦挑选115名健康志愿者注射抗埃疫苗,在西非国家一线抗击埃博拉疫病

二抗四度孵育一个小时可以吗

可以的二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。