化学发光免疫分析法几个常见问题及处理办法
化学发光免疫分析法( CLIA )是将化学发光与免疫反应相结合而建立起来的用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫分析技术。这种方法兼有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高特异度,并且具有无放射性危害、自动化程度高等优点,目前已趋于代替放射免疫分析( RIA )和酶联免疫测定( EIA )而成为临床免疫检测中应用最广泛的分析技术 。笔者从事 CLIA 免疫检测10余年,遇到过许多问题,现把日常工作中几个常见问题和处理办法进行总结如下。 1,钩状效应 “钩状效应”是指免疫检测中使用双抗体夹心法时,抗原抗体反应在比例适中时形成的检测信号与所测的抗原或抗体水平呈正比关系,但当抗原或抗体的水平超过一定界限时,检测信号反而随着水平的增加而下降的现象。CLIA 本质上还是利用抗原抗体反应原理对微量物质进行检测,所以同样存在钩状效应的问题。在 CLIA 免疫检测中,最容易出现钩状效应的检测项目包括甲胎蛋白(AFP)、催乳素(PRL......阅读全文
化学发光底物检测方法结果阳性的原因和处理办法
认为二抗及底物活性良好; Western Blot 系统需要进一步优化 优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法:斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原,抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。抗原和抗体浓度可通
雷达物位计常见问题及解决办法
一、雷达物位计的天线结疤 常见问题:通常,介电常数较小的挂料现象,在干燥状态下对仪表测量基本没有影响,但介电常数偏高的挂料现象,常会导致测量结果不准确。 解决办法:针对这一情况,建议采用压缩空气吹扫或清水冲洗的方式解除挂料现象,如果结疤较为顽固,应及时采用酸性清洗液清洗碱性结疤污垢,但在清洗
质粒提取常见问题及解决办法
涂布棒在酒精蘸一下,然后烧一下,能不能保证把所用的菌烧死? 参考见解:涂布棒可以在酒精中保藏,但是酒精不能即时杀菌。蘸了酒精后再烧一小会,烧的是酒精而不是涂布棒。建议涂布棒还是干烧较长时间后,冷却了再涂。同时作多个转化时,应用几个涂布棒免得交叉污染。原先测序鉴定没有问题的细菌,37℃摇菌后发现质粒大
免疫沉淀(IP)常见问题分析与解决办法
免疫沉淀(IP)常见问题分析 问题 可能原因 解决办法 高背景 吸取了不溶于去污剂中的蛋白(沉淀) 离心后立刻吸取上清,如果发生了重悬,则需要再次离心
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色 ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。 ③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。 对照/标本无染色 ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。 ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。 对照/标本无染色 ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。 ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗
化学发光免疫分析法应用于地高辛血药浓度的测定
地高辛是从毛花洋地黄叶中提取的一种二级苷,是临床上应用于治疗心脏疾病的强心苷类药物之一,对急慢性充血性心力衰竭、室上性心动过速、心房颤动和心房扑动等病症的治疗效果明显[1-3]。但该药物的作用机制较为复杂,治疗指数不高,有效治疗的浓度范围较窄,且药动学和药效学在不同个体间差异较大,很容易导致中毒
旋转蒸发仪常见问题及解决办法
旋转蒸发仪是我们实验室zui常用的设备,那么使用过程中出现问题如何解决呢,看到以下几段话,想必大家都能快速了解是哪方便面出现故障以及如何解决它们!一.电机飞车(只有zui高速)故障现象1.检查测速发电机线圈是否断路,用万用表量七芯插头“1、2”脚(插头对正槽两边)正常电阻400Ω左右。2.发电机线圈
旋转蒸发仪常见问题及解决办法
旋转蒸发仪是我们实验室最常用的设备,那么使用过程中出现问题如何解决呢,看到以下几段话,想必大家都能快速了解是哪方便面出现故障以及如何解决它们!一.电机飞车(只有最高速)故障现象1.检查测速发电机线圈是否断路,用万用表量七芯插头“1、2”脚(插头对正槽两边)正常电阻400Ω左右。2.发电机线圈与外壳短
离心机常见问题及解决办法
1. 急停开关出现异常问题分析此类报警一般在离心机出现紧急故障按下急停开关后或设备重启时出现此类报警。处理方法只需对设备进行复位键,如复位失败需等30s后驱动变频器开关能自动切断后再进行复位即可。2. 分散单元位置不对问题分析此类报警一般在离心机开启后准备进行操作时或在分散过程中刮刀走到位后出现,由
COD测定中常见问题及解决办法
1、 采不到试剂或水样报警 (1)采样管堵塞造成无法提到试剂,检查堵塞位置,清洗或更换堵塞管路。 (2)如果九通阀堵塞在外部无法清除堵塞物的情况下方可拆开九通阀进行清洗。 (3)采样管漏气,检查采样管和九通阀相连的各个螺丝,是否压紧,有无漏气现象,如有请从新连接管路并压紧。 (4)高低
DNA测序常见问题分析及解决办法
常见问题 具体情况 可能的原因 处理办法 备注 样品准备问题
电泳槽常见问题及解决办法
电泳槽时凝胶时间不对,那么通常胶在60min,1H内凝,如果凝的太慢,可能是TEMEN,APS剂量不够或者失效。APS应该现配现用,TEMED不稳定,容易被氧化成黄色。如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量过多,此时胶太硬易裂,电泳时易烧胶。纹理和托尾现:由于样品溶解不佳引起的,克服的方法可以在
温度变送器故障分析及处理办法
温度变送器应用的非常广泛,因为使用环境、现场、以及配套的仪表的千差万别,工程师、技术员或者维修人员在使用过程中遇到过各种各样的问题。在此,笔者结合多年的工作经验,简要地分析一下几个主要的引起温度变送器故障的原因。 1、温度传感器引起的故障 这是常见的也是好判断的故障。在使用过程中,一
废液的分类方法及处理办法
1.化学废液 废液应根据其化学特性选择合适的容器和存放地点,通过密闭容器存放,不可混合贮存,容器标签必须标明废物种类、贮存时间,定期处理。一般废液可通过酸碱中和、混凝沉淀、次氯酸钠氧化处理后排放,有机溶剂废液应根据性质进行回收。 2.生物废液 生物类废液应根据其病源特性、物理特性选择合适的
化学发光分析法简介
化学发光又称为冷光(cold ligh),是由化学反应而产生的光辐射。化学发光分析是一种新型的分析方法,具有极高的灵敏度(如用荧光素、荧光素醇和三磷酸腺苷(ATP)的化学反应可测定2X10 "'mol-L 的ATP)、选择性较好、仪器简单、分析速度快(多在1min之内)、线性范围可宽达几
化学发光免疫分析的分类及特点
化学发光免疫分析(ChemiLuminescence ImmunoAssay, CLIA)一、定义:化学发光是一种特异的化学反应,有机分子吸收化学能后发生能级跃迁,产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体,当其返回到基态而发出光子,即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析技术,即为化
化学发光免疫分析的分类及特点
化学发光免疫分析 (ChemiLuminescence ImmunoAssay, CLIA) 一、定义: 化学发光是一种特异的化学反应,有机分子吸收化学能后发生能级跃迁,产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体,当其返回到基态而发出光子,即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形
甲醛分析仪常见问题及解决办法
甲醛分析仪广泛应用于工业、农业、医药、科研机构等行业。能对烟草、造纸、食品、茶叶、饲料、谷物、化工原料、制药原料、纺织原料等样品所含的游离水份进行含量测试及数据打印。甲醛分析仪使用时常见问题解答 1、仪器显示负值或数值波动 仪器显示负值通常是人呼出气体的影响,检测时应将采样管进气口离开检测者1
原子吸收分析法中电离干扰及解决办法
电离干扰:容易电离的元素增加将大大增加电子数量而引起等离子体平衡转变,通常会减少分析信号。解决方法主要是从控制合适的火焰温度和加入消电离剂入手。
球磨机常见问题及处理方法参考
球磨机的轴承位和轴承室,在重载低速、重载高速的高扭矩启动下以及在设备振动、径向冲击的作用下,轴承室或轴承位发生金属疲劳,产生*变型。 球磨机减速机/轴承室若出现磨损,该类问题传统方法难以现场修复解决,外协修复受部件材质和磨损尺寸的限制难以修复,通常采取更换新部件解决。 减速机不断在改进,配件更
化学发光分析法的特点
利用化学发光进行化学分析的方法。化学反应能产生某种处于电子激发态的产物,当这种产物分子发生辐射跃迁或将能量转移给其他会发光的分子使该分子再发生辐射跃迁时,便产生发光现象。这种由于吸收了化学能,使分子产生电子激发而发光的现象称为化学发光。
化学发光分析法的应用
化学发光分析的灵敏度高,是痕量分析的重要手段之一,在环境监测、临床分析、生物化学等领域里,例如污染物测定、酶分析、免疫测定法和痕量金属分析等方面得到广泛的应用。例如,致癌物亚硝胺经热解后产生亚硝酰自由基NO,后者与臭氧反应,产生激发态二氧化氮NO壗,最后成为二氧化氮而发光,可用于亚硝胺的检测,灵敏度
旋转蒸发仪故障及对应处理办法
旋转蒸发仪,主要用于在减压条件下连续蒸馏大量易挥发性溶剂。尤其对萃取液的浓缩和色谱分离时的接收液的蒸馏,可以分离和纯化反应产物。旋转蒸发仪的基本原理就是减压蒸馏,也就是在减压情况下,当溶剂蒸馏时,蒸馏烧瓶在连续转动。结构:蒸馏烧瓶可是一个带有标准磨口接口的梨形或圆底烧瓶,通过一高度回流蛇形冷凝管与减
旋转蒸发仪故障及对应处理办法
旋转蒸发仪,主要用于在减压条件下连续蒸馏大量易挥发性溶剂。尤其对萃取液的浓缩和色谱分离时的接收液的蒸馏,可以分离和纯化反应产物。旋转蒸发仪的基本原理就是减压蒸馏,也就是在减压情况下,当溶剂蒸馏时,蒸馏烧瓶在连续转动。结构:蒸馏烧瓶可是一个带有标准磨口接口的梨形或圆底烧瓶,通过一高度回流蛇形冷凝管与减
旋转蒸发仪的故障及处理办法
旋转蒸发仪是蒸发、浓缩、结晶、干燥、分离、溶媒回收等过程不可少的仪器设备,被广泛应用于医药、化工、生物制品等行业科研和生产过程中。在使用过程中出现简易故障,如何自行处理排除呢,下面来讲解一下。 1、真空度达不到设定值 在使用旋转蒸发仪进行提纯时,如遇到蒸馏速度慢,回收率低下等问题,可能是真空系统
化学发光免疫分析
化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起