正相液相色谱方法
正相液相色谱方法建立的一般模式与反相液相色谱类似。正相液相色谱的色谱柱选择范围较宽，氰基柱通常是首选；与氰基柱相比，硅胶柱可获得更大的值，适合于异构体和疏水性溶质的分离，但分析时必须严格控制流动相中水含量，也不适于梯度分离:二醇基柱和氨基柱稳定性较差，仅在其他类型正相色谱柱无法完成分离时采用；氧化铝柱具有独特的分离选择性，但有柱效低、保留值不定、回收率低等缺点，很少使用。一般来说，柱尺寸为0.46cm×25μm×5μm，初始流速设为2ml/min，柱温为35℃或室温，初始进样量较大，但不应超过50μl或50μg。正相液相色谱流动相首选是正己烷和丙醇组成的混合溶剂，正已烷-丙醇不仅在低紫外波长区吸收较弱，还可提供较宽的溶剂强度范围，适于分离极性差异较大的样品。除正己烷外，溶解性较好的1,1,2—三氟三氯乙烷（FC113）也可作为混合溶剂中的A溶剂，由于在低波长吸收较强，只能用于235m以上的检测，并且其对臭氧的破坏作用也限制了其使......阅读全文
什么是正相键合相色谱法
正相键合相色谱法 1. 氰基与氨基化学键合相 是正相键合色谱法较常用的固定相。流动相与以硅胶为固定相的吸附色谱法的流动相相似，也是烷烃（常用正已烷等）加适量极性调整剂而构成。氰基键合相的分离选择性与硅胶相似，但极性小于硅胶，即用相同的流动相及其它条件相同时，同一组分的保留时间将小于硅胶。许多
什么是正相色谱和反相色谱
正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非
正相色谱和反相色谱的区别
1、固定相不同：正相硅胶具有极性基的表面，而反相硅胶是经过改性，表面键合烷基链（例如 C-18），极性更小，因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同：由于反相条件下，修饰了硅胶表面的羟基，使其极性降低，使得其适用性变得更加宽广（相对比反相而言），各类极性的大小分子，天然产物，都可以在反相
正相色谱和反相色谱的区别
1、固定相不同：正相硅胶具有极性基的表面，而反相硅胶是经过改性，表面键合烷基链（例如 C-18），极性更小，因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同：由于反相条件下，修饰了硅胶表面的羟基，使其极性降低，使得其适用性变得更加宽广（相对比反相而言），各类极性的大小分子，天然产物，都可以在反相
正相色谱和反相色谱的区别
1、固定相不同：正相硅胶具有极性基的表面，而反相硅胶是经过改性，表面键合烷基链（例如 C-18），极性更小，因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同：由于反相条件下，修饰了硅胶表面的羟基，使其极性降低，使得其适用性变得更加宽广（相对比反相而言），各类极性的大小分子，天然产物，都可以在反相
什么是正相色谱和反相色谱
正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非
正相色谱和反相色谱的区别
1、固定相不同：正相硅胶具有极性基的表面，而反相硅胶是经过改性，表面键合烷基链（例如 C-18），极性更小，因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同：由于反相条件下，修饰了硅胶表面的羟基，使其极性降低，使得其适用性变得更加宽广（相对比反相而言），各类极性的大小分子，天然产物，都可以在反相
反相色谱与正相色谱的差异
在液-固吸附色谱,，液-液分配色谱这两种液相色谱中才涉及到正相色谱及反相色谱。液-固吸附色谱（固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强，K值越大，保留时间越长）液-液分配色谱（是将固定液涂在担体上作为固定相的，它的分离原理与液液萃取的原理相同，从而服从分配定律。在
正相色谱和反相色谱的区别
在正相色谱中，一般采用极性键合固定相，硅胶表面键合的是极性的有机基团，键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基（-CN）、氨基（-NH2）、二醇基（DIOL）键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂，如烃类溶剂，或其中加入一定量的极性溶剂（如醇、乙腈等），以调节流动相的洗脱
液相色谱流动相小议
一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流
液相色谱流动相脱气
流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化，对分
液相色谱流动相的优化组合方法
液相色谱应用广泛的是反相色谱，其流动相的优化组合直接关系到分离效果。八十年代二元流动相组成优化依赖于容量因子(k’)的对数值与极性溶剂的摩尔分数关系，根据两者线性关系，可以估算溶质的保留值。曾有人确定过14种二元溶剂系统的容量因子与流动相的关系。Scott,Snyder和Soczeuinski的色谱
液相色谱柱注意事项和维护－液相色谱柱活化方法
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等
正相液相色谱仪类型
正相液相色谱仪类型有多种。1、按分离目的可分：实验室正相液相色谱仪和工业正相液相色谱仪。2、按分离对象的属性可分：有机化合正相液相物色谱仪和无机化合物正相液相色谱仪。3、按进样自动性可分：自动进样正相液相色谱仪和手动进样正相液相色谱仪。4、按固定相性质可分：硅胶固定相正相液相色谱仪和化学键合固定相正
什么是正相色谱法？
正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和
正相液相色谱法简介
正相液相色谱为典型的液-固吸附色谱。溶质在柱中固定相上反复进行吸附-解吸过程，根据不同被测物在吸附剂上吸附作用的强弱进行分离。溶质和固定相间的吸附作用包括:①溶质和溶剂分子对吸附剂表面特定位置的竟争作用，这使得溶剂组成的改变往往会引起分离情况发生很大变化；②溶质所带官能团与吸附剂表面相应的活性中心之
正相色谱柱可以反冲吗
液相色谱柱在使用过程中常见问题 液相色谱是一种高效的分析手段，液相色谱柱是色谱分析系统的“心脏”，由于被分析样品种类繁多，加之样品基质复杂，色谱柱极易被强保留物质污染。这些强保留物质通常难以洗脱，多次上样后，聚集在柱头端，堵塞筛板，甚至可能与填料发生相互作用导致填料变性，这会导致柱效下降，分离
高效液相色谱之高效反相液相色谱（二）
附：色谱柱操作说明，（以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例）1. 色谱柱常规参数订货号：Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如，Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱（High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC）又叫高压、高速、近代液相色谱，通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法，到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面，现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
液相色谱的分类和高效液相色谱用途
制备型加压液相色谱，按照色谱柱和样品量的大小，分为：（1）低压液相色谱；（2）中压液相色谱；（3）高压液相色谱；（4）快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠，没有统一、明确的标准。 1、快速色谱 柱压通常为2bar（或30psi）左右，对于那些容易分离的简单混
高效液相色谱之高效反相液相色谱（一）
反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色
液相色谱柱的选择方法
在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。2.聚合物基质：应用pH值范围宽，
液相色谱柱的保养方法
一、 新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间，因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理：首先，配好65%乙腈/水或者纯甲醇溶剂备用，所有进入HPLC仪器的溶剂必须经过0.2um或者0.45um过滤膜过滤并脱气；再按柱子的正确方向连接柱子进口端(连接时注意
液相色谱柱的保养方法
此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、 新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间，因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理：首先，配好65%乙腈/水或者纯甲醇
液相色谱柱的保养方法
此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、 新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间，因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理：首先，配好65%乙腈/水或者纯甲醇
液相色谱柱的选择方法
一、液相色谱柱选择的简单思路 1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操纵本钱等等。 2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。 3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。 二、液相色谱柱选择的条件 A填料基质
液相色谱柱的清洁方法
高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的一种分离分析技术，是现代分离和测定的重要手段。自问世以来，它以其分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高、沸点高但不能汽化热不稳定的生理活性物质等优点，在生物化学、医学和临床分析等领域得到了广泛的应用。高效液相色谱(HPLC)柱是一种消耗品，随着使
液相色谱柱的保养方法
此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、 新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间，因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理：首先，配好65%乙腈/水或者纯甲醇
液相色谱柱的安装方法
1、液相色谱柱的结构：a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ
液相色谱方法论证方案
HPLC标准方法的论证方案序号论证方案1应预备数据表明所需方法的性能2应有为其他操作者使用的书面分析步骤3以一个以上的系统或操作者，用包括期望组分和期望被测物浓度的样品系统地论证方法的性能，比较不同时间和不同实验室之间的实验数据4应得到色谱柱的期望寿命以及柱间重现性的数据5研究不正常的结果，以纠正潜