液相色谱仪离子交换色谱洗脱方式的选择
离子交换色谱洗脱方式有三种：一是改变缓冲液pH，使蛋白质从吸附状态变为解吸附状态。如在阴离子交换色谱中，通过降低流动相pH使吸附在柱子上的带负电荷的蛋白质带正电，从而达到解吸附，在阳离子交换色谱中则是通过升高流动相pH的方法达到解吸附；二是增加缓冲液的离子强度，将吸附强的分子从离子交换剂上替换下来；三是缓冲液pH和离子强度同时改变。无论哪一种方法，都可用阶段洗脱和梯度洗脱两种方式进行。阶段洗脱是用几个不同pH缓冲液或几个不同盐浓度的缓冲液逐步进行洗脱。即pH和离子强度变化不连续。而在梯度洗脱中，缓冲液的洗脱能力是连续增加的，由于后者分辨率更好，因此被广泛采用。 在经典色谱中需用梯度混合器来制造线性梯度，梯度混合器是由两个容器构成，两个容器安放在同一个水平上，一个盛起始缓冲液，另一个盛含较高离子强度或不同pH的缓冲液。二者用管子相连，以保持溶液的流体静力平衡。当缓冲液从第一个容器流入柱内，第二个容器的缓冲液进入第一个容器......阅读全文
液相色谱仪进样方式简介
液相色谱仪的进样装置要求密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力和流量影响小。HPLC进样方式有隔膜进样、停流进样、阀进样和自动进样器进样等。一、隔膜进样：用微量注射器将样品注入专门设计的与HPLC色谱柱相连的进样头内，可把样品直接送到色谱柱填充床的中心，死体积几乎等于零
液相色谱仪进样方式解析
液相色谱仪进样方式有隔膜进样、阀进样和自动进样器进样等。进样要求重复性好，死体积小，保证中心进样，进样时色谱柱压力和流量波动小，便于实现自动化等。一、隔膜进样：用微量注射器针头穿过橡皮隔膜进样是最简便的进样方式。由于可以把样品直接送到色谱柱填充床的中心，死体积几乎等于零，往往可获得最好的柱效。由于隔
离子交换层析的洗脱操作注意事项
洗脱时应满足以下要求：①洗脱液体积应足够大，一般要几十倍于床体积，从而使分离的各峰不至于太拥挤。②梯度的上限要足够高，使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快，要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸，会引起区带扩散；而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。洗脱馏份的分析按一定
液相色谱仪的色谱柱怎么选择和使用
液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。
离子交换色谱仪的选择性系数
离子交换色谱仪是利用不同待测离子对固定相亲和力的差别实现分离的，固定相采用离子交换树脂，树脂上分布有固定的带电荷基团和可游离的平衡离子，待测样品电离后产生的离子可与树脂上可游离的平衡离子进行可逆交换。离子交换的一般形式为R－A + B = R－B + A，达到平衡时，样品离子B对于A型树脂亲和力的大
高效液相色谱仪的最基本组件和梯度洗脱的含义
一、参考百度百科：http://baike.baidu.com/view/971281.htm 在所有色谱技术中，液相色谱法（liquid chromatography，LC）是最早（1903年）发明的，但其初期发展比较慢，在液相色谱普及之前，纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。到了
液相色谱仪流动相的选择原则
液相色谱仪分析中，选择流动相时应考虑流动相与填料的作用、纯度、与检测器的匹配、粘度、对样品的溶解度和样品回收等方面。一、流动相与填料的作用：流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流
如何正确选择适合的液相色谱仪？
液相色谱仪是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。 现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有、快速、灵敏等特点。一台品质优良的液相色谱系统应从以下几个方
液相色谱仪进样器的选择
进样装置要求：密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。HPLC进样方式可分为：隔膜进样、停流进样、阀进样、自动进样。 1.隔膜进样。用微量注射器将样品注进专门设计的与色谱柱相连的进样头内，可把样品直接送到柱头填充床的中心，死体积几乎即是零，可以获得zui佳
液相色谱仪流动相的选择方法
液相色谱仪分析中，流动相溶剂的洗脱能力与溶剂极性相关。一、正相色谱的流动相：在正相色谱中，溶剂强度随极性的增强而增加。正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。二、反相色谱的流动相：在反相色谱中，溶剂强度随极性的增强而减弱。反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂，再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂
液相色谱仪选择分离方法的原则
液相色谱仪选择分离方法的原则：一、样品相对分子量＜2000：1、溶于有机溶剂（较弱或中等极性）：（1）反相键合相色谱仪：1）C18C8为固定相。2）甲醇、乙腈和四氢呋喃为流动相。（2）正相键合相色谱仪：1）－CN和－NH2为固定相。2）有机溶剂为流动相。（3）液固吸附色谱仪：1）硅胶为固定相。2）有
分享选择液相色谱仪的小技巧
1．漂移 漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离原点的距离，通常用来衡量仪器稳定快慢。高品质的仪器能在较短的时间内达到稳定，从而在一定程度上提高了分析效率。 2．系统的，整体开发 这里指的是仪器的整体开发，是一个完整的系统。目前市场上有这个现象，说我的泵是进口的，或者是检测器怎么好，用了什么很
液相色谱仪流动相溶剂的选择
液相色谱仪分析选择流动相时，溶剂极性是选择的重要依据。一、溶剂强度：溶剂强度表示溶剂对样品的洗脱能力，决定于溶剂与溶质分子之间的作用力，是描述色谱性能的主要指标。目前还没有一个统一标准来描述不同类型液相色谱体系中的溶剂强度，而是采用相对极性和溶解度等参数作为溶剂强度指标。分子之间的相互作用有静电作用
高效液相色谱仪分离条件的选择
高效液相色谱仪分离条件的选择包括减小柱内和柱外展宽等条件。一、 减小柱内展宽： 1、固定相： 选用粒径小、分布均匀的球形固定相。 首选化学键合相，匀浆法装柱。 2、流动相： 选用低粘度的流动相，有利于增大组分在溶剂中的扩散系数，减少传质阻力。 3、
液相色谱仪填料的种类与选择
液相色谱仪填料可以是陶瓷性质的无机物基质，也可以是有机聚合物基质。液相色谱仪填料中的无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大，在溶剂中不容易膨胀。液相色谱仪填料中的有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩，溶剂或溶质容易渗入有机基质中，导致填料颗粒
色谱用语洗脱体积
色谱用语,从进样开始到某组分在柱后出现浓度极大值时流出溶剂的体积。又称洗脱体积。VR=F×tR
离子交换层析的加样与洗脱的介绍
加样与洗脱 加样： 层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度，所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围，同时要注意离子强度应低，可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的。样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前，以离心法除去。为了达到满意的分离效果，上样量要适当，不要超过柱的负荷
如何选择液相色谱仪教你搞定
一.主要技术指标优异如何选择液相色谱仪?首先是如何看指标。液相色谱仪的指标很多，有泵的、检测器的、色谱柱等等。我们认为要看主要技术指标，根据国家标准，仪器的主要指标有噪音，漂移，zui小检测浓度，定性定量重复性等。这些指标都要放在系统，回路里去看，去比较。就是需要把各单元装置都要联接好，如接好色谱柱
如何选择液相色谱仪保护柱？
怎样选择保护柱，但又不影响分离分析？通常，在选择保护柱之前首先要考虑的是样品是否清洁，对于大部分分析工作者来说，一只1cm长的保护柱便能提供充分的保护作用。但是，如果样品非常不清洁，或工作中发现经常要更换1cm的保护柱，那么就应该选用2cm或3cm的保护柱，保护柱越长自然所装填的色谱填料就越多，则其
液相色谱仪的进样方式有哪些？
液相色谱仪的进样方式按采用的工具分为两种：注射器进样、阀进样。根据进样时液流状态不同，注射器进样又分为流动进样和停流进样两种。 一、注射器进样 注射器进样装置分为有垫式和无垫式，具体优缺点如下： 1、有垫式进样 优点：注射器针头穿过能出行密封的垫，将样品注入色谱柱顶端，这种装置结构简
液相色谱仪的进样方式有哪些？
液相色谱的进样方式按采用的工具分为两种：注射器进样、阀进样。根据进样时液流状态不同，注射器进样又分为流动进样和停流进样两种。 一、注射器进样注射器进样装置分为有垫式和无垫式，具体优缺点如下： 1、有垫式进样 优点：注射器针头穿过能出行密封的垫，将样品注入色谱柱顶端，这种装置结构简单，样品量调节方便，
离子色谱(ion－chromatography,IC)分离方式和检测方式的选择
分析者对待测离子应有一些一般信息，首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况，如无机还是有机离子，离子的电荷数，是酸还是碱，亲水还是疏水，是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子，如Cl-或K+，最好用HPIC分离。水合能
高效液相色谱仪进样方式解析
高效液相色谱仪进样方式有隔膜进样、阀进样和自动进样器进样等。进样要求重复性好，死体积小，保证中心进样，进样时色谱柱压力和流量波动小，便于实现自动化等。一、隔膜进样：用微量注射器针头穿过橡皮隔膜进样是最简便的进样方式。由于可以把样品直接送到色谱柱填充床的中心，死体积几乎等于零，往往可获得最好的柱效。由
液相色谱仪色谱分离选择性的改善方法
液相色谱仪分析中，通过向流动相中加入改性剂调节pH值和调节流动相的溶剂极性强度，可以改善分离的选择性。一、向流动相中加入改性剂调节pH值：1、抑制溶质离子化：反相液相色谱中，常向含水流动相中加入酸、碱或缓冲溶液，使流动相的pH值控制在一定数值，抑制溶质离子化，减少谱带拖尾，改善峰形，以提高分离选择性
液相色谱仪分析时什么情况下采用梯度洗脱
液相色谱仪的梯度洗脱是指在一个分析周期内按一定程序连续变化流动相的浓度配比、极性、pH值或离子强度。梯度洗脱适合：一、具有较宽K范围的样品，所有的组分的色谱峰的K值不能在0.5～20之间的样品。二、相对分子质量大于1000的大分子样品，尤其是生物样品。三、样品中含有高保留时间的干扰成分，在一次分析中
分级梯度洗脱的概念和离子交换剂介绍
分级梯度洗脱是依据各种离子或离子化合物与离子交换剂的结合力不同而进行分离纯化的。离子交换层析的固定相是离子交换剂，它是由一类不溶于水的惰性高分子聚合物基质通过一定的化学反应共价结合上某种电荷基团形成的。离子交换剂可以分为三部分：高分子聚合物基质、电荷基团和平衡离子。电荷基团与高分子聚合物共价结合，形
离子色谱仪分离方式的选择
决定离子色谱仪分离方式的主要因素是待测离子的疏水性和水合能。1、水合能高和疏水性弱的离子，如 Clˉ和 K+，最好用离子交换色谱分离。2、水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸（ClO4ˉ）和四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或离子对色谱分离。3、有一定疏水性也有明显水合能的 pKa 值在 1 至
离子色谱仪分离方式的选择
决定离子色谱仪分离方式的主要因素是待测离子的疏水性和水合能。1、水合能高和疏水性弱的离子，如Clˉ和K+，zui好用离子交换色谱分离。2、水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸（ClO4ˉ）和四丁基铵，zui好用亲水性强的离子交换分离柱或离子对色谱分离。3、有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1至7之
离子色谱仪分离方式的选择
决定离子色谱仪分离方式的主要因素是待测离子的疏水性和水合能。1、水合能高和疏水性弱的离子，如Clˉ和K+，最好用离子交换色谱分离。2、水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸（ClO4ˉ）和四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或离子对色谱分离。3、有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1至7之间的离子
离子色谱仪分离方式的选择
决定离子色谱仪分离方式的主要因素是待测离子的疏水性和水合能。1、水合能高和疏水性弱的离子，如Clˉ和K+，zui好用离子交换色谱分离。2、水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸（ClO4ˉ）和四丁基铵，zui好用亲水性强的离子交换分离柱或离子对色谱分离。3、有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1至7之