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MTT法简介

MTT法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下,外源性MT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒( Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在570nm(参比波长630m)波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MT结晶形成的量与活细胞数成正比......阅读全文

MTT法简介

MTT法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下,外源性MT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒( Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫

四唑盐(MTT)比色实验——MTT法

实验方法原理活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色结晶物,用酶联免疫检测仪在490  nm 波长处测定其光吸收值,可间接反映细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。 实验材料细胞

MTT法实验原理

原理:活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物甲臜,并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。DMSO能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比。再用酶标仪测定OD值。

什么是MTT法?

MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值,可间接反映

MTT法操作步骤

(1)单细胞悬液接种于96孔培养板;103-104细胞/孔,每孔培养基总量200微升(96孔培养板每孔容积370微升),37℃、5%CO2培养箱中培养一段时间(根据实验目的决定培养时间)(2)加入2毫克/毫升的MTT液(50微升/孔);继续培养3小时。(3)吸出孔内培养液后,加入DMSO液(150微

MTT法实验原理

原理:活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物甲臜,并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。DMSO能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比。再用酶标仪测定OD值。

MTT法实验步骤

贴壁细胞1、收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。2.、5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板

MTT法实验原理与MTT 溶液的配制方法

通常,此法中的mtt浓度为5mg/ml。因此,可以称取mtt0.5克,溶于100ml的磷酸缓冲液(pbs)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。需要注意的是,mtt法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细

MTT法实验原理与MTT 溶液的配制方法

原理:活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物甲臜,并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。DMSO能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比。再用酶标仪测定OD值。

MTT法实验原理与MTT溶液的配制方法

通常,此法中的mtt浓度为5mg/ml。因此,可以称取mtt0.5克,溶于100ml的磷酸缓冲液(pbs)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。需要注意的是,mtt法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细