高效液相色谱仪流动相(MOBLLEPHASE)的问题介绍
甲醇和乙腈在高效液相色谱分析法中常常被用来配制流动相。高效液相色谱法中常用的试剂最好是高等级的专用试剂,如色谱纯试剂。在要求不太严格时,优级纯甚至分析纯的试剂也能用。高效液相色谱分析法中常用的是紫外检测器,因此,从降低基线噪音和提高分析灵敏度上来考虑,应该使用紫外吸收小且杂质含量少的色谱纯试剂。 1、流动相的过滤。配制好的流动相在使用前一定要先用0.5um孔径的微孔滤膜来过滤。这是因为溶液中含有很多肉眼难以发现的微小颗粒,如果不把它们滤除掉,就会堵塞泵口、柱头上的过滤器,这样就堵塞了流动相的正常通道,使色谱柱的阻力增加,柱压升高,柱效下降。碰到这种情况时,要换用经过滤的流动相,并将堵塞的滤器拆下来浸泡在20%的硝酸水溶液中以超声波清洗机清洗20分钟,以除去滤片上的堵塞物。 2、流动相的脱气。流动相在使用前必须脱气,以尽可能的除去溶解在流动相中的气体,否则,这些气体会使柱填料的性能降低,还能够对检测器的信号产生很大的干扰。......阅读全文
高效液相色谱仪中把流动相跑光了怎么办
没有问题的,别着急。现在压力上不去是因为有空气在泵头,泵体工作但无法泵液,不同品牌的液相操作不一样,不过所有品牌通用的一点是可以把排液阀打开,然后大流速冲一下,将气泡排除。如果是岛津液相,可以把流动相瓶放在高处,将出口单向阀拆开,然后让其自然势能流出溶液,再装上单向阀,一般就可以搞定了。
高效液相色谱仪分析开发流动相调整的三个原则
高效液相色谱仪分析与开发流动相调整的三个原则是从强到弱、三重规则和精细调整。一、由强到弱:一般使用90英寸的乙腈或甲醇水或缓冲溶液进行测试。可以快速得到分离结果,并根据峰值调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。二、三倍规则:对于有机溶剂(乙腈或甲醇)的量每减少10%,保留因子增加约3倍,这是三倍规则。调
为什么高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤
用于高效液相色谱的流动相必须事先除气,否则容易在系统中逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响色谱柱的分离效率、检测器的灵敏度、基线的稳定性,甚至使其无法检测。噪音增加,基线不稳定,突然跳跃。此外,溶解在流动相中的氧可以与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)发生反应。溶解气体也会引起溶剂ph值的变化,从而
为什么高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤
用于高效液相色谱的流动相必须事先除气,否则容易在系统中逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响色谱柱的分离效率、检测器的灵敏度、基线的稳定性,甚至使其无法检测。噪音增加,基线不稳定,突然跳跃。此外,溶解在流动相中的氧可以与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)发生反应。溶解气体也会引起溶剂ph值的变化,从而
高效液相色谱仪流动相选择应该遵循什么样的原则?
1.流动相的性质要求液相色谱理想的流动相溶剂应具有粘度低、与检测器相容性好、易于获得纯产品、毒性低等特点。选择流动相时应考虑以下方面:流速不会改变填料的任何性质 离子交换树脂的低交联度和排斥色谱填料有时会使有机相发生一定的膨胀或收缩,从而改变填料床的性能。 碱性流动相不能用于硅胶柱系统 酸性流
高效液相色谱仪流动相选择应该遵循什么样的原则
1.流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选择流动相时应考虑以下几个方面:①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性
高效液相色谱仪流动相选择应该遵循什么样的原则
1.流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选择流动相时应考虑以下几个方面:①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性
高效液相色谱仪开关机顺序及对流动相的要求
1、高效液相色谱仪开关机顺序分析准备工作完成后依次打开稳压电源高压输液泵、柱温箱、检测仪,然后关闭各部分的自检打开与仪器连接的计算机启动工作软件分析完毕,关闭工作软件,依次关闭检测器,柱温箱,高压输液泵。2、高效液相色谱仪对流动相的要求为保证液相色谱仪器的正常使用所有流动相必须是色谱等级并在过滤杂质
高效液相色谱仪流动相选择应该遵循什么样的原则
1.流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选择流动相时应考虑以下几个方面:①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性
高效液相色谱流动相如何脱气
高效液相色谱仪(HPLC)现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样,在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样,你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据,首先你要保养好它,使它处于一个良好的待机状态,这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获
液相色谱仪流动相的要求
液相色谱流动相是液体,对组分有亲合力,并参与固定相对组分的竞争,正确选择流动相溶剂直接影响样品组分的分离。一、溶剂对于待测样品必须具有合适的极性和良好的选择性。二、溶剂与检测器匹配:对于紫外吸收检测器,不能用对紫外光有吸收的溶剂。对于示差折光检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达
液相色谱仪流动相的贮存
液相色谱仪流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂(如甲醇和乙酸等)可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂被污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐和乙酸盐缓冲
液相色谱仪流动相的极性
液相色谱仪的流动相又称溶剂,溶质和溶剂分子之间的色散力作用、偶极作用、氢键作用和介电作用使溶质与溶剂分子之间出现共作用,共作用程度称为溶剂的极性。一、色散力作用:瞬间偶极矩导致分子间的相互作用。二、偶极作用:或诱导偶极分子间的相互作用。三、氢键作用:质子(或氢键)接受体和质子(或氢键)给予体之间的相
高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分介绍
应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检
高效液相色谱仪流动相溶剂的要求
高效液相色谱仪流动相为溶剂,既有运载作用,又和固定相一样,参与对组分的竞争,因此溶剂的选择对分离十分重要。一、溶剂对于待测样品必须具有合适的极性和良好的选择性。二、溶剂要与检测器匹配:1、对于紫外吸收检测器,应选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长长。溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,
高效液相色谱仪流动相溶剂的要求
高效液相色谱仪流动相为溶剂,既有运载作用,又和固定相一样,参与对组分的竞争,因此溶剂的选择对分离十分重要。一、溶剂对于待测样品必须具有合适的极性和良好的选择性。二、溶剂要与检测器匹配:1、对于紫外吸收检测器,应选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长长。溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,
实验室高效液相色谱仪选择流动相时应考虑的要素
选择流动相时应考虑的要素:1)流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。2)纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在
实验室高效液相色谱仪流动相的选择和性质要求
流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。流动相选择1)由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。2)三倍规则:每减少10%的有机溶剂
高效液相色谱仪、流动相、色谱柱、检测器、泵的保养维护
液相色谱仪是利用混合物在液-固或互不相溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行分离和分析鉴定的仪器,应用极其广泛。流动相流动相:保持贮液瓶清洁,对专用贮液瓶应定期清洁;定期(如半个月)在稀硝酸溶液中超声、清洁过滤器,清洁后用纯水清洗到中性,保持过滤器畅通。使用的流动相应为HPLC级或同等级,在配置
高效液相色谱流动相的性质要求
流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
高效液相色谱流动相的注意事项
一、普通C8及C18反相色谱柱当色谱柱使用较长时间之后,就可能发生柱压升高、分离度不好、柱效降低、峰形不好等情况,这时就需要根据故障原因对色谱柱进行清堵与再生,以延长色谱柱的使用寿命。具体原因及处理方法如下:1)筛板堵塞与柱头塌陷主要现象有柱压严重升高或不稳定、色谱峰拖尾、色谱峰变宽、色谱峰分叉、秃
高效液相色谱流动相和固定相
液相色谱有正反之说,所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相:a.反相流动相:有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了,磷酸盐缓冲液,醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相:乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰
流动相出现问题,液相色谱图出现的问题
液相色谱中的许多问题都能在谱图上反映出来,其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。而面对常常发现的HPLC 谱图异常的问题,如何做到真正解决问题,则需坚持这几个原则:一具体问题具体对待原则; 二先外设
流动相的特点和常见的流动相介绍
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。用作流动相的物质有:气体、液体、超临界流体等。常见的流动相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。
液相色谱仪对流动相的要求
液相色谱仪对流动相的要求:1.流动相:首先必须是HPLC级的,这一条相信大家都做到了。2.脱气:由于流动相里含有微量空气,经泵的压力作用,会在流通池里产生气泡,这对分析产生一定的影响,如噪音增大,甚至于掩盖信号峰。因此,流动相在使用前必须经超声脱气30分钟以上。3.过滤:由于流动相里有很微小
液相色谱仪流动相的选择方法
液相色谱仪分析中,流动相溶剂的洗脱能力与溶剂极性相关。一、正相色谱的流动相:在正相色谱中,溶剂强度随极性的增强而增加。正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。二、反相色谱的流动相:在反相色谱中,溶剂强度随极性的增强而减弱。反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂,再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂
液相色谱仪流动相的贮存方法
液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂,导致溶剂被污染。被污染的溶剂如用于液相色谱仪系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成的变化,同时防止空气中的氧和二氧化碳溶入流动相中。磷酸盐、乙酸
液相色谱仪流动相脱气的办法
液相色谱仪所用的流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。才外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果带来误差。 溶解氧能与某些溶剂形成有
液相色谱仪流动相的选用要求
液相色谱仪流动相的选用要求包括流动相性质要求、流动相选择、流动相pH值、流动相脱气、流动相过滤、流动相贮存、卤代溶剂应特别注意的问题和HPLC用水等方面。一、流动相性质要求:HPLC中,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k值减小;较弱的溶剂使溶质在填料表面的吸附增加,相应的容量因子k值
液相色谱仪流动相的选择原则
液相色谱仪分析中,选择流动相时应考虑流动相与填料的作用、纯度、与检测器的匹配、粘度、对样品的溶解度和样品回收等方面。一、流动相与填料的作用:流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流