荧光免疫技术显微镜检查过程及注意事项
标本经荧光抗体染色后,需要在荧光显微镜下观察。荧光显微镜是免疫荧光化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成,是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。在荧光显微镜检查时,首先要选择好的光源或滤光片,滤光片的正确选择是获得良好荧光观察效果的重要条件。激发滤光片的作用是提供合适的激发光。根据光源和荧光色素的特点,可选用以下三类激发滤板,提供一定波长范围的激发光。紫外光激发滤板:此滤板可使400nm以下的紫外光透过,阻挡400nm以上的可见光通过;紫外蓝光激发滤板:此滤板可使300~450nm范围内的光通过;紫蓝光激发滤板:它可使350~490nm的光通过;最大吸收峰在500nm以上者的荧光素(如罗达明色素)可用蓝绿滤板激发。荧光显微镜检查的注意事项:①应在暗室中进行检查,进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出的强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标......阅读全文
免疫荧光技术的标本的制作过程
免疫荧光技术在实际应用上主要有直接法和间接法。直接法是在检测样品上直接滴加已知特异性荧光标记的抗血清,经洗涤后在荧光显微镜下观察结果。免疫荧光直接法可清楚地观察抗原并用于定位标记观察。间接法是在检测样品上滴加已知的细菌特异性抗体,待作用后经洗涤,再加入荧光标记的第二抗体。如研制成的抗沙门氏菌荧光抗体
细菌感染免疫检测的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无特殊要求。 检查前禁忌:进行血清试验的一般要求空腹检测,其它的检测方法则要求暴饮暴食和剧烈运动后检测。 检查时要求:避免血清被污染,和听从医生的安排。 检查过程 细菌感染免疫检测的抗原的测定方法有:凝集试验:玻片法凝集试验、胶乳凝集法、协同凝集试验、反向间接血凝
脑脊液免疫球蛋白的注意事项及检查过程
注意事项 检查前:停止服用药物 检查时:放松身体,消除紧张焦虑的情绪 不适宜人群:没有 检查过程 (1)患者侧卧于硬板床上,背部与桌面垂直,头部尽量向前胸屈曲,两手抱膝紧贴腹部,使躯干尽可能呈弓形;或由助手在术者对面用一手挽患者头部,另一手挽双下肢腘窝处并用力抱紧,使脊柱尽量后凸以增宽
放射免疫分析的注意事项及检查过程
注意事项 晨起空腹静脉采血。 检查时:保持心理平衡,维持血液成分的相对稳定。 检查过程 从检验者处得到血液样本后,送放射检验科进行检验。具体过程:分别在一定数量的试管中加入不同浓度的血液样品,每管加入等量的放射性标记抗原和一定量的抗体,在4℃或37℃下保温,待反应平衡后进行分离,测量放射
脑脊液免疫球蛋白的注意事项及检查过程
注意事项 检查前:停止服用药物 检查时:放松身体,消除紧张焦虑的情绪 不适宜人群:没有 检查过程 (1)患者侧卧于硬板床上,背部与桌面垂直,头部尽量向前胸屈曲,两手抱膝紧贴腹部,使躯干尽可能呈弓形;或由助手在术者对面用一手挽患者头部,另一手挽双下肢腘窝处并用力抱紧,使脊柱尽量后凸以增宽
细菌感染免疫检测的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无特殊要求。 检查前禁忌:进行血清试验的一般要求空腹检测,其它的检测方法则要求暴饮暴食和剧烈运动后检测。 检查时要求:避免血清被污染,和听从医生的安排。 检查过程 细菌感染免疫检测的抗原的测定方法有:凝集试验:玻片法凝集试验、胶乳凝集法、协同凝集试验、反向间接血凝
体液免疫检测法的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无特殊要求。 检查前的禁忌:空腹,禁忌暴饮暴食,和剧烈运动。 检查时的要求:空腹抽血,抽取血清检测,注意血清不被污染。 检查过程 进行血清的检测,首先是B细胞对抗原的识别和抗原递呈。等到B细胞活化、增殖和分化后就可以合成分泌抗体并发挥效应了。
免疫印迹技术的检查过程
(1) 蛋白质样品获得:细菌诱导表达后,可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞,真核细胞加匀浆缓冲液,机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃,13,000g离心15min。取上清液作为样品。 (2) 电泳:制备电泳凝胶,进行SDS-PAGE。 (3) 转移:(半干式转移) ① 电泳结束后
荧光免疫技术
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibod
免疫浊度技术的检查过程及不适宜人群
检查过程 免疫浊度技术是利用可溶性抗原、抗体在液相中特异结合,形成一定大小的抗原抗体复合物,使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时,形成的复合物随抗原量增加而增加,反应液的浊度亦随之增加,与一系列的标准品对照,即可计算出样品的含量。 不适宜人群 不合宜人群:无特殊要求。在服用免疫力药物
尿免疫球蛋白(ig)的注意事项及检查过程
注意事项 检查前:禁止剧烈运动,保持良好的饮食和作息,检查前一周停用甘草、生胃酮、苯丙胺、两性霉素B、巴比妥等药物。检查前3天禁饮酒。 检查时:即先排出一部分尿弃去,以冲掉留在尿道口及前尿道的细菌,然后将中段尿留取送检。 不适宜人群:月经期中的女性,感冒患者。 检查过程 收集受检测者的
病毒感染免疫检测的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无特殊要求。 检查前禁忌:禁暴饮暴食和剧烈运动,宜空腹,处于平静状态。 检查时要求:应在发病1-2天内进行检测。病毒在室温中易失去活性,采集后应低温保存并尽快送检,最好于采集后1-2小时内送检。 检查过程 近年来采用免疫标记技术,即荧光素、放射性核素、过氧化物酶等
免疫球蛋白轻链的注意事项及检查过程
注意事项 检查前准备: 1、晚餐后不要大量饮水,用次晨第一次尿液进行检查。 2、小便标本应取中段尿最为纯净。 检查时要求: 1、尿液检查必须用清洁容器留取新鲜尿液及时检查。 2、避开经期安排此项检查。 不适宜人群: 1、没有不适宜人群。 检查过程 本检查使用比浊法进行检验。
人类免疫缺陷病毒抗体(hiv)的注意事项及检查过程
注意事项 HIV感染还可用PCR方法检测。对阳性结果应结合其他检查项目和临床情况进行综合分析。对可疑结果应进行随访,随访期至少6个月。 检查过程 按试剂盒说明书操作。凡待测样品被ELISA法判为阳性,必须重新取样,双孔重复测定,仍阳性,视为HIV-1/2抗体ELISA法检测阳性。用本法大规
病毒感染免疫检测的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无特殊要求。 检查前禁忌:禁暴饮暴食和剧烈运动,宜空腹,处于平静状态。 检查时要求:应在发病1-2天内进行检测。病毒在室温中易失去活性,采集后应低温保存并尽快送检,最好于采集后1-2小时内送检。 检查过程 近年来采用免疫标记技术,即荧光素、放射性核素、过氧化物酶等
自身免疫抗体检测的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无要求。 检查前禁忌:早晨空腹检测,因此一般禁忌进食后检查。 检查时要求:注意血清标本不被污染和按照医生的安排去做。 检查过程 研究对象取静脉血2ml,分离血清,20℃保存待测。酶联免疫吸附(ELISA)法。测定结果采用χ2检验。
免疫荧光检查的检查方法及临床意义
检查方法 免疫荧光检查可分直接法、间接法、夹心法和补体法。 1. 直接法 将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。 (1)滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10分钟后弃去,使标
免疫荧光技术
免疫荧光技术1) 直接法1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。3.PBS洗涤3×3分钟。4.0.1%伊文氏兰复染。5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。6.缓冲甘油封片,镜检。 2) 间接法1.标本固定后,PBS洗涤3
免疫荧光技术
免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种.它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记抗体获得成功。经过几十年的发展,该技术已相当成熟。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的
免疫荧光技术
基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。试剂与仪器l 磷酸盐缓冲盐水(PBS):
荧光免疫技术介绍
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantib
免疫荧光技术
实验方法原理 直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应,形成抗原—荧光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度,确定相应抗原的存在与否及其所在部位。实验材料 抗体试剂、试剂盒 PBS伊文氏兰仪器、耗材 显微镜实验步骤 1. 标本经固定后,PBS洗涤3×3 分钟;2. 加荧光素标记的抗体,湿
泪液分泌型免疫球蛋白A的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:婴儿 检查前禁忌:.1不要长时间观看电视节目、操作电脑和玩电子游戏。 2注意防止眼外伤,异物入眼要用正确的方法处理。 3不用手揉眼睛,不用脏手帕或脏毛巾擦眼睛。不与他人共用毛巾、脸盆等浴具。 4不直视太阳(尤其是在正午)和电焊光,以免烧伤眼睛。 5患上眼疾要及时
泪液分泌型免疫球蛋白A的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:婴儿 检查前禁忌:.1不要长时间观看电视节目、操作电脑和玩电子游戏。 2注意防止眼外伤,异物入眼要用正确的方法处理。 3不用手揉眼睛,不用脏手帕或脏毛巾擦眼睛。不与他人共用毛巾、脸盆等浴具。 4不直视太阳(尤其是在正午)和电焊光,以免烧伤眼睛。 5患上眼疾要及时
血清免疫球蛋白M(IgM)的注意事项及检查过程
注意事项 一、抽血前的注意事项 1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。 3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。 二、抽血后应注意 1、抽血
寄生虫感染免疫检测的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无特殊要求。 检查前禁忌:禁止暴饮暴食和辛辣食品,影响检测结果。适宜早晨空腹后的血、粪便或尿。 检查时要求:标本应及时送去实验室检测,避免标本受污染。 检查过程 感染寄生虫者,应取血、粪便或尿标本作实验室检查。医生也可抽取可能感染器官或组织的液体送检。这些标本通常
眼睑检查的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:在不需要患者特别合作的情况下,而且能测量出睑裂的大小变化情况,利于精确诊断和治疗。 检查前禁忌:手要干净、干燥。 检查时要求:这些检查只限医生动手,体检者只要听从指挥即可。 检查过程 眼睑检查:一般是在自然光线下用望诊和触诊
泪器检查的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:这个没什么范围规定,眼睛没事就不必要检查。 检查前禁忌:避免情绪刺激,治疗眼部炎症,减少反射性泪液分泌。 检查时要求:根据不同病因进行对症治疗与处理,去除病因,控制泪液的分泌。 检查过程 注意泪腺有无肿物,泪点大小、位置和泪囊部皮肤的变化,指压泪囊部有无分泌物从泪
脊柱检查的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:孕妇。 检查前禁忌:怀孕期间检查要采取一定的保护措施,以免 X 线对胎儿造成影响。脊柱检查前,要先行脊柱正侧、斜位照片等。 检查时要求:检查放松心情,检查过程有可能有异常疼痛的情况,如实反应情况。 检查过程 检查脊柱时,应脱去上衣,双足并拢站立位,双下肢直立,双手
胸廓检查的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无 检查前禁忌:休息不良,饮食不当,过度疲劳。 检查时要求:积极配合医生的工作。 检查过程 通过听诊,视诊,叩诊,触诊等方法观察了解胸口的正常与否,从而确定症状。