液相色谱仪各种检测器的应用范围

HPLC中常用的检测器分有如下几种,紫外吸收检测器(UVD)、二极管阵列检测器(PDAD)、荧光检测器(FLD)、示差折光检测器(RID)、蒸发光散射检测器(ELSD)、质谱检测器(MSD)等。下面就分别介绍简单介绍一下。光学类检测器1、紫外吸收检测器(UVD)是目前HPLC中应用最广泛的检测器。它的主要特点是灵敏度高,线性范围宽,对流速和温度变化不敏感,可用于梯度洗脱。它要求被检测样品组分有紫外吸收,属于选择性检测器。2、二极管阵列检测器(PDAD)是20世纪80年代才出现的一种光学多通道检测器,它可以看作是UVD的一个分支。在对每个洗脱组分进行光谱扫描,经计算机处理后,得到光谱和色谱结合的三维图谱。其中吸收光谱用于定性(确证是否是单一纯物质),色谱用于定量,常用于复杂样品(如生物样品、中草药)的定性定量分析。3、荧光检测器(FLD)同样属于选择性检测器,其灵敏度在目前常用的HPLC检测器中是最高的,应用也较多,仅次于UVD。......阅读全文

高效液相色谱仪应用举例(四)

例12.甾族化合物分析样 品:含孕酮等4种物质的混合物色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,四元梯度泵,色谱工作站检测器:Mark ⅡA型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器漂移管温度为135℃,氮气流速为1.2L/min。色谱柱:Hyperil C18 ,5μm,柱长25cm,柱径4.6

高效液相色谱仪应用举例(二)

例5.茶碱分析(茶叶)样 品:含茶碱等三种物质的混合物色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站检测器:UV紫外检测器,280nm色谱柱:Micro μBondapak C18 ,8μm,柱长25 cm,柱径4.6 mm流动相:二甲基二酰胺:甲醇:醋酸:水 = 23.5:1:0.5:7

液相色谱仪的发展趋势

液相色谱仪的发展趋势液相色谱-质谱联用(LC-MS)图星色谱、质谱的在线联用将色谱的分离能力与质谱的定性功能结合起来,实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析,同时也简化了样品的前处理过程,使样品分析更简便。液相色谱流动相流速一般为1mL/min,如果流动相为甲醇,其汽化后换成常压下的气体流速为560

制备液相色谱仪与方法开发

制备色谱是以分离出纯物质为目的的色谱系统,分析色谱是以分析出样品组分信息为目的的色谱系统,基于他们目的的不同,制备色谱相对于分析色谱有很多不同特征,不能简单等同。当我们在实验室中想得到纳克乃至毫克级的纯物质时,稍微改装下分析型色谱系统就能简单轻松的完成,不过,若所需制备的纯品量很大,此时,再用分析型

高效液相色谱仪应用举例(五)

例16.多肽分析(生物)样 品:含G-Y等3种多肽物质的混合物色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站检测器:ELSD美国Alltech MKⅢ蒸发激光散射检测器漂移管温度为110℃,氮气流速为2.19L/min色谱柱:AlltimaTM C18 ,5μm,柱长25cm,柱径4.6m

液相色谱仪的日常维护技巧

一、泵泵是液相色谱仪的心脏,须精心维护和保养。处于良好工作状态的泵,其基线平稳,保留时间重现性好,梯度洗脱时压力变化缓慢而平稳。要使泵具备良好的操作性能,应该保持泵系统的洁净。具体做法如下:1.要选择优质的溶剂和试剂,在进入仪器前用0.45um膜过滤,并进行脱气处理。2.泵开始使用时,一定要对其排气

液相色谱仪检测器简介

液相色谱仪检测器有溶质性检测器和总体检测器两种基本类型。溶质性检测器仅对样品组分的理化性质有响应,有紫外检测器、荧光检测器和电化学检测器等。总体检测器对样品组分和洗脱剂总的理化性质有响应,有示差折光检测器、蒸发激光散射检测器和电导检测器等。一、紫外吸收检测器:1、可变波长紫外吸收检测器:连续光源(如

高效液相色谱仪的优点(一)

高效液相色谱仪是20世纪60年代末发展起来的分离分析技术,随着不断改进和发展,目前已成为重要的应用极为广泛的化学分离分析手段。   一、与气相色谱仪相比:  1、气相色谱仪只限于分析气体和沸点较低的化合物,仅占有机物总数的20%(分子量<200)。而高效液相色谱仪主要用于分析高沸点、热稳定性差和摩

液相色谱仪色谱法分类

  液相色谱仪色谱法根据分离原理的不同,可分为:   液-液色谱法(或称液-液分配色谱法)   流动相和固定相都是液体。试样溶于流动相后,在色谱柱内经过分界面进入固定液(固定相)中,由于试样组分在固定相和流动相之间的相对溶解度存在差异,因而溶质在两相间进行分配。跟气一液分配色谱有相似之处:分

液相色谱仪流动相如何贮存?

流动相一般储存在玻璃聚四氟乙烯或不锈钢容器中,但不能储存在塑料容器中因为许多有机溶剂如甲醇和乙酸可以从塑料表面沥滤增塑剂所以溶剂被污染这些被污染的溶剂,如果用于液相色谱,可能会导致柱效降低储存容器必须紧密封闭以防止由溶剂挥发引起的成分变化,从而防止氧气和二氧化碳溶解到流动相中。磷酸盐和醋酸缓冲液容易

液相色谱仪的局限性

液相色谱仪的溶剂成本高于气相色谱仪,易污染环境。液相色谱仪的梯度洗脱操作比气相色谱仪复杂。液相色谱仪的检测器不如气相色谱仪的检测器。液相色谱仪不能替代气相色谱仪分离组成十分复杂的物质。液相色谱仪不能替代中、低压柱色谱仪分离受压易分解、变性的具有生物活性的生化样品。气相色谱仪原理:气相色谱法是利用气体

高效液相色谱仪的基本操作

一、实验准备阶段需要配置好实用所需的流动相,要注意所使用的流动相不能对实验或设备造成影响或损害(比如堵塞或腐蚀)。准备好流动相之后,需要对仪器及色谱柱进行冲洗和平衡,确保仪器压力正常,基线稳定。样品填写需要经过必要的净化处理,过0.45um以下微孔滤膜确保样品是澄清溶液,并装入合适的液相色谱样品瓶待

高效液相色谱仪脱气常用方法

在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC 也已成为不可或缺的分析仪器。流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。下面分析一下,高效液相色谱脱气的必要性,并总结归纳了脱气常用的方法。一、脱气的必要性    流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC

安捷伦液相色谱仪的主要应用

  1.安捷伦1200系列四元泵适用于方法开发、研究和各种需要连续而广泛地进行溶剂选择溶剂的应用,在选择溶剂和自动化方面具有大的灵活性。   2.安捷伦1200四元系统可以在使用不同溶剂的方法之间进行快速切换,可以使用二元、三元和四元梯度,是市场上灵活的系统。   3.和任何安捷伦120

液相色谱仪馏分收集器

馏分收集器对于液相色谱仪以分离为目的的制备色谱中馏分收集器是必不可少的组件。现代的馏分收集器可以按样品分离后组分流出的先后次序,或按仪器设备色谱峰的起止信号,或按时间根据预先设定好的程序自动完成收集工作。馏分收集器功能:如果所进行的色谱分离不是为了纯粹的色谱分析,而是为了做其它波谱鉴定,或获取少量试

液相色谱仪的保养与维修!

一、仪器的保养1、整机保养(1)短期停机在完成一天工作以后,都要停机等第二天再继续工作,则可按以下步骤停机。A)关闭二次仪表(记录仪、积分仪或色谱工作站)。B)关闭检测器电源(同时切断柱箱温度检测器的电源)。C)停止恒流泵工作,然后切断其电源。D)用二次蒸馏水冲洗进样阀的进样孔(在“LOAD” 和“

实验室液相色谱仪分类

实验室制备液相色谱仪分类方法 实验室制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按进样自动性可分:实验室制备自动进样液相色谱仪和实验室制备手动进样液相色谱仪。2、按固定相和活动相的极性大小可分:实验室制备正相液相色谱仪和实验室制备反相液相色谱仪。3、按产地可分:国产实验室制备液相色谱仪和进口实验室制备液相色谱

液相色谱仪故障解决方法

一、流动相脱气不充分  流动相受热,或者流动相不同组分混合时会有气体产生,气泡进人泵内引起压力波动,增加噪音,色谱图上出现毛刺。可试用下列方法解决问题流动相再脱气采用更有效的脱气方法(如通氮气保护)或两种方法配合使用改系统内混合为系统外低压预混合。如果仍有毛刺,应考虑在检测器后面加阻尼器。  二、流

液相色谱仪的相关维护(二)

样品的要求  保证样品的清洁,进样前尽量使用0.22m的滤膜滤过,避免样品太脏而堵塞色谱柱或离子源的毛细管;  样品溶剂必须是色谱纯,应该和流动相比例一致;进样浓度不宜太高,因为太高浓度的样品容易污染灵敏度高的仪器,进而影响检验结果。  由于液质的流速较小(ESI一般为0.2mL/min),所以配置

高效液相色谱仪主要系统介绍

高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、.分离系统、检测系统和数据处理系统,下面将分别叙述其各自的组成与特点。 1.进样系统 一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。 2.输液系统 该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压

液相色谱仪常见故障处理

  1、气泡溢出  流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出, 进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻 塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵

高效液相色谱仪的原理特点

  高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱,也可以拓展为制备系统,采用高压混合器连接两个高压恒流泵,利用RS232通讯,即可实现梯度分析;    便于用户自由选择与搭配,混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成,用途广泛;    可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等

液相色谱仪使用及工作原理

工作原理:流动相通过输液泵流经进样阀,与样品溶液混合,流经色谱柱,在色谱柱中进行吸附、分离,最后每一组分分别经过检测器转变为电讯号,在色谱工作站上出现相应的样品峰。液相色谱的使用:首先对样品进行预处理,然后进样,进样完毕后,清洗进样口,每次分析结束后,清洗通道,最后关闭仪器。

液相色谱仪的原理及应用

  液相色谱仪是指利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相

如何选择液相色谱仪保护柱?

怎样选择保护柱,但又不影响分离分析?通常,在选择保护柱之前首先要考虑的是样品是否清洁,对于大部分分析工作者来说,一只1cm长的保护柱便能提供充分的保护作用。但是,如果样品非常不清洁,或工作中发现经常要更换1cm的保护柱,那么就应该选用2cm或3cm的保护柱,保护柱越长自然所装填的色谱填料就越多,则其

制备型高效液相色谱仪类型

制备型高效液相色谱仪类型有多种。1、按分离目的可分:化验室制备型高效液相色谱仪和工业制备型高效液相色谱仪。2、按色谱柱形状可分:制备型高效液相填充柱色谱仪和制备型高效液相毛细管柱色谱仪。3、按固定相和流动相的极性大小可分:正相制备型高效液相色谱仪和反相制备型高效液相色谱仪。4、按分离对象的离子性质可

液相色谱仪色谱柱柱填料

 液相色谱柱装填的固定相,其基体材料多为粒度5~10µm或3~5µm的全多孔球形或无定形硅胶。以后又发展了无机氧化物基体(如三氧化二铝、二氧化钛、二氧化皓、三氧化钨)、高分子聚合物基体(如苯乙烯-二乙烯基苯共聚微球,丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯的聚合物微球)和脲醛树脂微球,它们多为3~10µm的全多孔微球

液相色谱仪样品检测要点

液相色谱仪是一种精度极高的检测仪器,在环境、食品、生物、医药行业都有广泛的应用。本文简单介绍在液相色谱仪检测分析样品的几个要点。    流动相比例调整:我国药品标准中没有规定色谱柱的长度及填料的粒度,因此每次检测一个新样品时都须重新调整流动相,所以建议*次检验样品时配备适量的流动相即可,以免浪费。制

液相色谱仪色谱柱的保养

正常情况下,液相色谱仪色谱柱至少可以使用3~6个月,能完成数百次分离。但若操作不慎,将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性,必须对色谱柱进行仔细保养。一、色谱柱的保护:1、流动相和样液都需用0.45um孔径的滤膜过滤。2、加3~5cm保护柱。3、进样阀进样。4、用纯甲醇保存色

安捷伦液相色谱仪的规范操作

1. 目的:明确安捷伦液相色谱仪的规范操作,确保数据的准确性。2. 范围:适用于安捷伦液相色谱仪。3. 职责:检验人员对此负责。4. 操作规程:4.1 系统组成 本系统由1个溶剂二元输送泵(分主/A泵和副/B泵)、手动进样阀、柱温箱、检测器、化学工作站和电脑等组成。4.2 准备 4.2.1使用前应根