对流免疫电泳的操作
1.制琼脂板 以pH8.6离子强度0.05巴比妥缓冲液配成1%~1.5%琼脂凝胶板,厚度2mm~3mm. 2.打孔 琼脂冷却后,按图打孔,打成对的小孔数列,孔径0.3cm~0.6cm,孔距0.4cm~1.0cm.挑去孔内琼脂,封底。 3.加样 一对孔中,一孔加已知(或待测)抗原,另一孔加待测(或已知)抗体。 4.电泳 将抗原孔置于负极端。电压2.5V/cm~6V/cm,或电流强度3mA/cm~5mA/cm,电泳时间30min~90min.......阅读全文
多克隆抗体的免疫电泳
【实验原理】 免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特异性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中,在抗原和
免疫电泳基本原理
免疫电泳基本原理:先将待侧样本作琼脂凝胶电泳,各蛋白抗原组分被分成不同的区带,然后与电泳方向平行挖一小槽,加入相应的抗血清,把分成区带的蛋白抗原成分作双向免疫扩散,在各区带相应的位置形成沉淀弧。
对流免疫电泳是什么?
对流免疫电泳是免疫电泳技术中的一种,还包括免疫电泳、火箭电泳等方法。在pH值8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,而且它分子又较大,所以泳动慢,受电渗作用的影响也大,往往不能抵抗电渗作用,故在电泳时,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质常带较强的负电荷,分子又较小,所以泳动快,虽然由于电渗作
免疫电泳的试验方法
1.取已溶化的1%离子琼脂倾注于玻片上制成琼脂板。 2.冷却凝固后,按照模板于挖槽线上下两侧各打孔一个,并分别用微量加样器加入待检血清及人IgG各15μl。 3.置电泳槽内,注意电泳标本应放负极“―”一侧。并将已浸透缓冲液的滤纸一端覆盖于琼脂板两侧各约0.5mm,另一端浸于电泳液中。 4.
免疫电泳的检查过程
先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳,然后在琼脂板中央挖一横槽,加入已知相应的免疫血清,两者经一定时间相互扩散后,就会在抗原、抗体比例最适处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和外形,参照已知抗原、抗体形成的电泳图,即可分析样品中所含成分。此方法样品用量少、特异性高、分辨力强。但所分析的物质必须有抗原性
交叉免疫电泳的方法介绍
一种对样品中各蛋白组分进行定性分析或定量测定的技术。即借助区带电泳使蛋白质抗原分离,继而将含特异性抗体的琼脂糖插入至区带一侧,旋转90。再进行电泳,形成与火箭免疫电泳形状相似的沉淀峰。
免疫电泳的临床意义
异常结果:近年来本法主要用于:血清蛋白组分的分析,如多发性骨髓瘤、肝病、全身性红斑狼疮等;抗原、抗体的纯度的检测;抗体各组分的研究等。也常用于检测血清中乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、甲胎蛋白,各类免疫球蛋白的定性和半定量。 需要检查的人群:有相关疾病和症状者,特别是肝病者,还有新生儿可以作预防
免疫电泳实验_溶液的准备
免疫电泳(immunoelectrophoresis) 技术是基于抗原的电泳迁移以及与抗体的专一性免疫亲和或沉淀反应来鉴定其强度和特异性。在大部分电泳中,样品中的抗原通过含有相应抗体的 pH 8.6 的薄层琼脂糖凝胶,抗原在 pH 8.6 时通常带强负电,与在含有抗体的凝胶中电泳时发生免疫反应。本实
火箭免疫电泳的操作步骤
1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复
火箭免疫电泳的概念简介
火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与
免疫电泳的临床意义
异常结果:近年来本法主要用于:血清蛋白组分的分析,如多发性骨髓瘤、肝病、全身性红斑狼疮等;抗原、抗体的纯度的检测;抗体各组分的研究等。也常用于检测血清中乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、甲胎蛋白,各类免疫球蛋白的定性和半定量。 需要检查的人群:有相关疾病和症状者,特别是肝病者,还有新生儿可以作预防
免疫电泳的临床意义
异常结果 近年来本法主要用于血清蛋白组分的分析,如多发性骨髓瘤、肝病、全身性红斑狼疮等;抗原、抗体的纯度的检测;抗体各组分的研究等。也常用于检测血清中乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、甲胎蛋白,各类免疫球蛋白的定性和半定量。 需要检查的人群 有相关疾病和症状者,特别是肝病者,还有新生儿可以
免疫电泳技术的优点
(一)加快了沉淀反应的速度; (二)电场规定了抗原抗体的扩散方向,使其集中,提高了灵敏度; (三)可将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开,再分别与抗体反应。
免疫电泳的检查过程
先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳,然后在琼脂板中央挖一横槽,加入已知相应的免疫血清,两者经一定时间相互扩散后,就会在抗原、抗体比例最适处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和外形,参照已知抗原、抗体形成的电泳图,即可分析样品中所含成分。此方法样品用量少、特异性高、分辨力强。但所分析的物质必须有抗原性
免疫电泳的检查过程
先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳,然后在琼脂板中央挖一横槽,加入已知相应的免疫血清,两者经一定时间相互扩散后,就会在抗原、抗体比例最适处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和外形,参照已知抗原、抗体形成的电泳图,即可分析样品中所含成分。此方法样品用量少、特异性高、分辨力强。但所分析的物质必须有抗
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
免疫电泳的临床意义
异常结果:近年来本法主要用于:血清蛋白组分的分析,如多发性骨髓瘤、肝病、全身性红斑狼疮等;抗原、抗体的纯度的检测;抗体各组分的研究等。也常用于检测血清中乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、甲胎蛋白,各类免疫球蛋白的定性和半定量。 需要检查的人群:有相关疾病和症状者,特别是肝病者,还有新生儿可以作预防
火箭免疫电泳的方法简介
火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。
交叉免疫电泳的方法介绍
一种对样品中各蛋白组分进行定性分析或定量测定的技术。即借助区带电泳使蛋白质抗原分离,继而将含特异性抗体的琼脂糖插入至区带一侧,旋转90。再进行电泳,形成与火箭免疫电泳形状相似的沉淀峰。
免疫电泳的注意事项
检查前禁忌:禁忌暴饮暴食,特别是辛辣食物。禁忌剧烈运动。 检查时要求:空腹抽血检测。听从医生的要求。
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
免疫电泳的检查过程
先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳,然后在琼脂板中央挖一横槽,加入已知相应的免疫血清,两者经一定时间相互扩散后,就会在抗原、抗体比例最适处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和外形,参照已知抗原、抗体形成的电泳图,即可分析样品中所含成分。此方法样品用量少、特异性高、分辨力强。但所分析的物质必须有抗原性
免疫电泳的检查过程
先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳,然后在琼脂板中央挖一横槽,加入已知相应的免疫血清,两者经一定时间相互扩散后,就会在抗原、抗体比例最适处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和外形,参照已知抗原、抗体形成的电泳图,即可分析样品中所含成分。此方法样品用量少、特异性高、分辨力强。但所分析的物质必须有抗原性
火箭免疫电泳的操作步骤
1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复
什么是对流免疫电泳?
对流免疫电泳是免疫电泳技术中的一种,还包括免疫电泳、火箭电泳等方法。
免疫电泳的临床意义
异常结果:近年来本法主要用于:血清蛋白组分的分析,如多发性骨髓瘤、肝病、全身性红斑狼疮等;抗原、抗体的纯度的检测;抗体各组分的研究等。也常用于检测血清中乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、甲胎蛋白,各类免疫球蛋白的定性和半定量。 需要检查的人群:有相关疾病和症状者,特别是肝病者,还有新生儿可以作预防
关于火箭免疫电泳原理简介
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制
对流免疫电泳的定义
在pH值8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,而且它分子又较大,所以泳动慢,受电渗作用的影响也大,往往不能抵抗电渗作用,故在电泳时,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质常带较强的负电荷,分子又较小,所以泳动快,虽然由于电渗作用泳动速度减慢,但仍能向正极泳动。如将抗原置阴极,抗体置阳极,电泳时