做WB时羊抗鼠二抗的稀释比例一般是多少
【1】抗体的说明上,都给出了一个范围,可以以这个范围为根据摸索。开始的时候可以把膜剪成几小块,每一块用不同的一抗二抗浓度,这样就可以比较快的摸出适宜的浓度。有些时候也有一定的经验的:我用的是SANTA CRUZ的抗体,一抗建议的稀释比是1:200-1000,我用的是1:400效果挺好的。周围的人用的这个公司的其他一抗也是建议这个稀释比,他们也是稀释成了1:400,效果也挺好的。所以,如果用的是这个公司的一抗,如果建议的稀释比和上面相同的话,建议先用1:400试一下。【2】如果背景深,考虑二抗浓度高了,可以降低二抗浓度。当然没封闭好等很多其他原因也可以引起背景过高。【3】如果杂带较多,可以考虑降低一抗的浓度。如果没有条带,则可以考虑增加一抗的浓度。【4】当然,在摸索抗体浓度的同时,要保证其他步骤的完善、合理性:转膜成功、封闭的要好、上样量是否合理(不要太大了)等。......阅读全文
免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
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免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
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一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
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一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
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一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
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一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
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一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度
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免疫荧光标记为什么不直接标记一抗而标记二抗
因为一种一抗只识别一种底物,如果每种一抗都需要荧光标记,那这样成本很高。而二抗既可以和一抗结合,又带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗,提高了通用性。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体,即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。一抗二抗都是一种可以特异结
免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求
一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。
磷酸化抗体二抗应该用bsa稀释吗
磷酸化抗体的一抗必须用BSA稀释,可以是1%~5%对于敏感性和特异性差的抗体会有帮助二抗其实没有用BSA稀释的要求,可以用脱脂奶粉稀释
Jackson-Immunoresearch公司二抗推荐的其产品保存方法
l 对于未标记的抗体如单克隆抗体IgG部分,从正常血清中纯化的蛋白,Gamma球蛋白:物理状态:无菌过滤的液体保存:无菌条件下保存在2-8°C,每天准备新鲜的工作液。 l 对于正常血清,抗血清,过氧化物酶抗过氧化物酶免疫复合物物理状态:冻干粉重溶和保存:冻干粉保存在
elisa检测中二抗时间延长会造成什么影响
二抗孵育 参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶标记的二抗。 吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如
磷酸化抗体二抗应该用bsa稀释吗
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二抗孵育 参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶标记的二抗。 吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如
磷酸化抗体二抗应该用bsa稀释吗
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临床医生抗高血压治疗应遵循的原则(二)
“因此,J点的存在只是一个学术概念,实际上人们无法找到一个普遍适用于所有高血压人群的固定数值。”蒋雄京如是说。那么,在目前无法确定人群的J点在哪里的情况下,降压治疗应达到什么样的血压水平呢?蒋雄京认为,这就涉及到高血压的个体化治疗。降压首先要达标,要满足《中国高血压防止指南》的要求:普通高血压患者
抗核抗体检测的临床应用专家共识(二)
建议4 推荐以HEp-2细胞为实验基质的IIF法是进行ANA检测的参考方法和首选方法。建议5 采用以HEp-2细胞为实验基质的IIF法进行ANA检测时,HEp-2细胞在实验基质中每显微镜视野(放大倍数为200倍)应可见3~5个有丝分裂细胞;二抗应使用荧光素标记的抗人IgG抗体;IIF法检测ANA的稀
实验中在选择二抗时的注意事项
(1)一抗种属来源主要根据一抗种属来源来决定确定二抗的类型,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(如羊抗小鼠、兔抗小鼠等均可)。(2)一抗类型二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体.单克隆抗体的类别及亚类通常
磷酸化抗体二抗应该用bsa稀释吗
磷酸化抗体的一抗必须用BSA稀释,可以是1%~5%对于敏感性和特异性差的抗体会有帮助二抗其实没有用BSA稀释的要求,可以用脱脂奶粉稀释
第二节-抗动脉粥样硬化药
第二节 抗动脉粥样硬化药 动脉粥样硬化是心脑血管疾病的主要病理基础,其所致的冠心病是发达国家的首要死亡原因。动粥的发病与遗传、饮食等因素有密切关系。一、 调血脂药(一).HMG-CoA还原酶抑制剂 他汀类[药理作用] 抑制HMG-CoA还原酶,从而阻断HMG-CoA向
抗埃疫苗进入第二轮人体实验
世界卫生组织日前同意进行瑞士医药公司提出的第二轮抗埃博拉疫苗人体注射实验。世卫组织称,第二轮抗埃疫苗人体注射实验将由日内瓦大学各校立医院组织实施,如果本轮实验结果安全可靠,明年1月将在非洲国家大范围投入使用。世卫组织同意瑞士在日内瓦挑选115名健康志愿者注射抗埃疫苗,在西非国家一线抗击埃博拉疫病
二抗四度孵育一个小时可以吗
可以的二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。