实验室分析方法液液分配色谱法流动相概念和应用
流动相与固定液应尽量不互溶,或者二者的极性相差越大越好。根据流动相与固定相极性的差别程度,可将液液色谱分为正相分配色谱(流动相极性小于固定相极性,极性小的先流出,适于强极性和中等极性组分分离)和反相分配色谱(流动相极性大于固定相极性,极性大的先流出,适于非极性或弱极性组分分离)。固定相:由载体和固定液组成。常用的固定液有b,b’-氧二丙腈、聚乙二醇、聚酰胺、正十八烷、角鲨烷等。应用:同系物组分的分离。例:分离水解蛋白质所生成的各种氨基酸,分离脂肪酸同系物等。......阅读全文
高效液相色谱流动相选择
流动相选择1)由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。2)三倍规则:每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察
液相色谱流动相的贮存
液相色谱流动相的贮存流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸
液相色谱流动相的贮存
流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉,应
液相色谱流动相的特点
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点: (1)流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 (2)流动相与样品不产生化学反应 (3)流动相的黏度要尽量小,以便得到好的分离效果;降低柱压降,延长泵的
液相色谱流动相的选择
在化学键合相色谱法中,溶剂的洗脱能力直接与它的极性相关。在正相色谱中,溶剂的强度随极性的增强而增加;在反相色谱中,溶剂的强度婕缘脑銮慷跞酢?BR>正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂,再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂,如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。极性
高效液相色谱流动相选择
流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 流动相选择 1:由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况
液相色谱流动相不过滤
因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2μm或0.45μm)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。
液相色谱流动相的特征
流动相要求液相色谱的流动相必须符合下列要求:(1)能溶解样品,但不能与样品发生反应。(2)与固定相不互溶,也不发生不可逆反应。(3)粘度要尽可能小,这样才能有较高的渗透性和柱效。(4)应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时,溶剂要不吸收紫外光。(5)容易精制、纯化、毒性小,不易着火,价格尽量低等
液相色谱流动相走空
泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。
液相色谱流动相的脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果
实验室分析方法色谱法-固定液定义和对固定液的要求
一般是一种高沸点的有机物的液膜,通过对不同组份的不同分子间的作用,使组份在色谱柱中得到分离。对气相色谱用的固定液,一般有如下几点要求:1.在操作温度下蒸气压低,热稳定性好,与被分析物理或载气不产生不可逆反应;2.在操作温度下呈液态,而且粘度愈低愈好。物质在高粘度的固定液中传质速度慢,柱效率因而降低。
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液。传质速度慢,柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30~40μm
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液。传质速度慢,柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30~40μm
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液。传质速度慢,柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30~40μm
如何-选择-液相色谱流动相ph和-溶剂-要求
当然要根据你测定的物质来确定。一般极性小的物质,有机相会相对大一些,极性大的物质就可以小一些。有些特殊的物质会易溶于酸或碱,根据这些来进行调整。简单说就是保证你的测定物质可以溶于流动相。此外的一些缓冲盐比较复杂,最好在网上搜索类似的方法加以改进。注意的是要保证你的方法在色谱柱的适用范围内,如果方法特
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
液相色谱有正反之说,所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相:a.反相流动相:有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了,磷酸盐缓冲液,醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相:乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
高效液相色谱仪流动相和固定相都有哪些?1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液传质速度慢,柱效低 现采用10μm以下的小颗粒。向左转|向
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液。传质速度慢,柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30~40μm
简述液-液分配色谱法的基本信息介绍
流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,服从于下式: 式中,cs—溶质在固定相中浓度;cm--溶质在流动相中的浓度; Vs—固定相的体积;Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似
实验室分析方法液固吸附色谱法固定相的特点和应用
通常是硅胶、氧化铝、活性炭等固体吸附剂。硅胶最常用。流动相:极性大的试样需用极性强的洗脱剂,极性弱的试样宜用极性弱的洗脱剂。应用:几何异构体分离和族分离,如农药异构体;石油中烷、烯、芳烃的分离。不适于强极性的离子型样品的分离,不适于分离同系物(因为它对相对分子质量的选择性较小)。
液液分配色谱
液-液分配色谱 (一)、分离原理 流动相与固定相为互不相溶的两种液体,组分既溶解于固定相,也溶解于流动相,根据在两相中溶解度的不同分配,相当于液--液萃取。在一定色谱条件下 (二)、固定相 在惰性载体表面涂敷或键合一层固定液薄膜,前者称涂层固定相,后者称键合固定相。由于固定液在流动相中的
气液层析的概念和应用
中文名称气液层析英文名称gas-liquid chromatography;GLC定 义固定相由固体的惰性载体和固定液构成,载体提供一个惰性表面,使基本不挥发的液体能够在其表面铺展成薄而均匀的液膜,成为分配平衡的一相,流动相为惰性气体的一种气相层析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与
液固层析的概念和应用
中文名称液固层析英文名称liquid-solid chromatography;LSC定 义固定相为固体,流动相为液体的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
关于高效液相色谱的液—固分配原理介绍
流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm式中:X
高效液相色谱色谱法检测样品大概多少体积的流动相
不同的样品洗脱体积是不同的,以保留时间计算,大概在7min-15min出峰为宜,当然这是对单一样品来说的,如果目标峰或干扰峰较多,则首先要考虑的是分离度。这样计算的话(1ml/min的流速),一个样品大概需要10-20ml的流动相,另外色谱柱的平衡也需要消耗流动相。
分配系数的概念和应用
分配系数是指在一定温度下,达到分配平衡时某一物质在两种互不相溶的溶剂中的活度(常近似为浓度)之比,为一常数。分配系数可用于表示该物质对两种溶剂的亲和性的差异。对分配系数的测定可提供该物质在环境行为方面许多重要的信息。常用的溶剂体系是由水和一种与水不互溶的有机溶剂组成,如正辛醇-水体系,所得的分配系数
快速蛋白质液相层析的概念和应用
中文名称快速蛋白质液相层析英文名称fast protein liquid chromatography;FPLC定 义以高流率代替高效液相层析高压力的一种改良的中压(< 5 MPa)液相层析技术。具有快速、容量大和分辨率高的特点。可使用多种层析介质,多用于蛋白质的分离,也可以用于其他物质的分离。应
液相色谱在液相检验中的应用方法
液相色谱法是一种以液体为流动相的色谱法,液相色谱法是现在应用十分广泛的一种液相色谱法,这种方法是20世纪60年代兴起的,经过不断的完善和发展,现已被应用于各个领域。在医药分析领域,液相检验的应用已经普及,而液相色谱法作为液相检验中的一种重要手段,也得到了大力的推广与应用,目前实验室常用的P2
液相色谱质谱仪流动相的要求
流动相的要求 每次开机前,保证超纯水和流动相的新鲜,泵的各个管路不应余留上次残留的溶剂。 流动相需符合HPLC与LC-MS要求等级,流动相中尽量加易挥发的盐,尽量不使用表面活性剂之类; 否则容易导致离子抑制,表面活性剂产生的加合物和离子簇会干扰质谱数据。 如果遇到离子抑制,可以把样品峰往后推
液相色谱流动相注意事项
一、 流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中, 溶剂应当易于除去