弱精不育患者与正常生育能力者精浆蛋白质的双向电泳图谱分析
【摘要】 目的: 探讨2-DE技术在人类正常与弱精不育者精浆全蛋白中筛选差异蛋白的应用。方法: 先用IPG-DALT 技术对12 例弱精不育与5 例正常精浆蛋白进行分离,银染后,经PDQUest 2D 比较二者间差异蛋白点。 结果: 在不育精浆中高丰度存在而正常精浆中低表达的有55个蛋白斑点(3个在正常缺失),在正常精浆中存在而在不育精浆中低表达的有43个(3个在不育缺失)。 结论: 成功建立了正常与弱精不育精浆蛋白的2-DE 图谱并分析表达差异蛋白,为弱精症精浆差异表达蛋白的质谱鉴定奠定了基础。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
精浆生化检测在男性生殖诊断中的应用
[导读] 目前,精子动力学、精子形态学和生精细胞学的分析[1],以及精液脱落细胞学的检出[2],已成为临床上评价男性生育功能的重要手段[3],但是男性不育是一组比较复杂的临床综合征。随着男科生殖研究的深入,精浆中的生化指标越来越受到重视,它不仅可以了解精浆中各种成分的主要组织分泌来源,更反映睾丸、
临床化学检查方法介绍精浆的生化检查介绍
精浆的生化检查介绍: 精浆的生化检查是对精浆进行生物化学检测。精浆主要由附属性腺(前列腺、精囊腺、尿道球腺)和附睾的分泌物组成,因此精浆生化检查对评估附属性腺的功能以及研究附属性腺对男性生育的影响有重要意义。精浆的生化检查正常值: (1) 果糖的测定:一般用间苯二酚法,正常值为256±104mg
精浆酸性磷酸酶测定(ACP)参考值
80~1000U/ml(速率法);>200U/1次射精 (β-硝基酚法)。
关于精浆弹性硬蛋白酶的检测原理介绍
包被于固相载体的抗弹性硬蛋白酶单抗可与精浆中弹性硬蛋白酶相结合,结合的待测物再与特异性酶标记物反应,最后通过底物显色,其吸光度大小与精浆标本中弹性硬蛋白酶浓度相关。精浆弹性硬蛋白酶的检测步骤: (1)准备适当数量的包被微孔。标准品、稀释标本加样量均为100μl/孔。五个标准品浓度依次为3000
关于精浆弹性硬蛋白酶的判读标准简介
(PMN-Elastase)精浆弹性硬蛋白酶是检测炎症的手段之一,精浆弹性硬蛋白酶可作为静止型生殖道感染的诊断及愈后检测指标。 判断标准:判断标准数值:< 290ng /ml, 隐性感染: 290 ~1000ng/ml, 确证感染: > 1000ng/ml。急性炎症时, 弹性硬蛋白酶复合物浓度
蛋白质的双向电泳实验_等电聚焦法
蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦( Isoelect rofocusing, IEF) , 根据蛋白质的等电点不同进行分离; 第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE ) , 按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后, 可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。本实验目的是
精浆α葡萄糖苷酶的临床意义是什么
异常结果: 当输精管结扎后,该酶活力显著降低。测该酶对鉴别输精管阻塞和睾丸生精障碍所致的无精症有一定意义。 需要检测的人群: 无精者
r精浆蛋白测定(rsm)的检查过程
待测物与特异性酶标记物反应,最后通过底物显色,其吸光度大小与精浆标本中弹性硬蛋白酶浓度相关。
精浆α葡糖苷酶测定的方法和临床意义
.测定方法及评价 比色法可测定精浆中α-葡糖苷酶的活性。葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成量,反映α-葡糖苷酶的活性。国内临床上较为常用。 临床意义 α-葡糖苷酶活性下降,见于阻塞性无精子症,具有肯定性诊断价值。
r精浆蛋白测定(rsm)的临床意义
前列腺癌者r-SM阳性率达68%,且血清r-sm水平与病情相关,病情越重,水平越高。而前列腺肥大症阳性率仅1%,泌尿生殖系统以外恶性肿瘤的阳性率为零。 结果阳性可能疾病: 前列腺癌。
精浆的生化检查的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:暂时未明。 检查前禁忌:留精液前,病人应停止性交4-7天。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、苯乙酸睾丸酮、苯丙酸诺龙。检查前1个月内应停止饮酒,这点必须做到。 检查时要求: (1) 采取精液时,可用软皂或石蜡油做阴茎按摩,将标本收集在无菌的试管中;也可用避孕套(冲洗干净,
临床化学检查方法介绍精浆α葡萄糖苷酶介绍
精浆α-葡萄糖苷酶介绍: 精液中的α-葡萄糖苷酶主要由附睾上皮细胞分泌,是附睾的特异性酶和标记酶,可催化蛋白质的糖类组成部分或低聚糖的分解,为精子成熟提供适宜的能量,该酶可作为附睾的功能性指标。精浆α-葡萄糖苷酶正常值: (42.7±20.9)U/L。精浆α-葡萄糖苷酶临床意义: 异常结果:
精浆α葡糖苷酶测定测定方法与临床意义
1.测定方法及评价比色法可测定精浆中α-葡糖苷酶的活性。葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成量,反映α-葡糖苷酶的活性。国内临床上较为常用。2.临床意义α-葡糖苷酶活性下降,见于阻塞性无精子症,具有肯定性诊断价值。
精浆的生化检查的正常值及临床意义
正常值 (1) 果糖的测定:一般用间苯二酚法,正常值为256±104mg/dl。 (2) 微量元素:对男性生殖和生殖内分泌功能有重要作用。正常精液中锌为130±5 6μg/ml ,铜:1.85±0.15μg/ml,铁:0.81±0 04μg/ml。 (3) 柠檬酸:通过furth herr
精浆的生化检查的临床意义及注意事项
临床意义 异常结果: (1) 精浆果糖含量测定:精浆果糖浓度大于8.3mmol/L或13mmol/一次射精。精浆果糖降低见于雄激素分泌不足和精囊炎;精浆果糖为零也可见于先天性精囊缺如,输精管或精囊发育不良所致的无精症及逆行射精;而单纯性输精管阻塞性无精症果糖含量正常。 (2) 精浆酸性磷酸
蛋白质作图的定义
中文名称蛋白质作图英文名称protein mapping定 义对某种组织或细胞全部蛋白质进行分析所作的图谱。如蛋白质双向电泳图谱。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
技术生物所举行双向电泳技术基本原理与操作专项培训
现场示范 为提高科研人员实验操作技能,保障仪器操作规范,中科院技术生物所于6月20日邀请通用电气工程师围绕双向电泳技术展开原理与技能培训,以帮助相关研究人员从蛋白质组学层面,更精准地进行生物样品的蛋白质动态变化研究。培训共20余名研究人员参与,大家就相关实验中遇到的问题展开深入探讨
双向电泳
实验概要本实验介绍了双向电泳技术,先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到二维分布的蛋白质图。实验原理双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上
双向电泳
蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.coli蛋白,并表明蛋白质谱不是稳定的,而是随环境而变化. 双向电泳原理简明,第一向进行等电聚焦,蛋白质沿pH梯度分离,至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行分子量
精浆的生化检查的检查过程及相关疾病有哪些
检查过程 做精液的生化检查时,精液标本要置于35℃-37℃水浴箱内,液化后取1.2-1.5ml离心15 分钟,取上层精浆作生化测定。该项检查目前开展较多的是果糖、微量元素、柠檬酸、蛋白质、酸性磷酸酶、乳酸脱氢酶x等。 (1) 果糖的测定:一般用间苯二酚法,正常值为256±104mg/dl。果
血液融浆机种类分析
血液溶浆机名称叫法:化浆机、血浆机、融浆机、溶浆机、恒温解冻仪、解冻仪实验大概过程:通过对栏中的水加热或摇摆,对血浆进行解冻,正常温度37度。(一般过了42度,血浆会坏,血浆只能解冻一次)市场一般有三种血浆:100CC、200CC、400CC(很少) 一般一栏可以解冻1-2袋,一栏放的少,解冻的快,
双向电泳操作步骤——双向电泳操作步骤
实验方法原理双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。实验材料细胞样品试剂、试剂盒ddH2O溴酚蓝指示剂
蛋白质组学的主要功能
蛋白质组学集中于动态描述基因调节,对基因表达的蛋白质水平进行定量的测定,鉴定疾病、药物对生命过程的影响,以及解释基因表达调控的机制.作为一门科学,蛋白质组研究并非从零开始,它是已有20多年历史的蛋白质(多肽)谱和基因产物图谱技术的一种延伸.多肽图谱依靠双向电泳(Two-dimensionalgele
蛋白质组的主要功能
蛋白质组学集中于动态描述基因调节,对基因表达的蛋白质水平进行定量的测定,鉴定疾病、药物对生命过程的影响,以及解释基因表达调控的机制. 作为一门科学,蛋白质组研究并非从零开始,它是已有20多年历史的蛋白质(多肽)谱和基因产物图谱技术的一种延伸. 多肽图谱依靠双向电泳(Two-dimensional g
简述蛋白质组的主要功能
蛋白质组学集中于动态描述基因调节,对基因表达的蛋白质水平进行定量的测定,鉴定疾病、药物对生命过程的影响,以及解释基因表达调控的机制. 作为一门科学,蛋白质组研究并非从零开始,它是已有20多年历史的蛋白质(多肽)谱和基因产物图谱技术的一种延伸. 多肽图谱依靠双向电泳(Two-dimensional
蛋白质组的主要功能
蛋白质组学集中于动态描述基因调节,对基因表达的蛋白质水平进行定量的测定,鉴定疾病、药物对生命过程的影响,以及解释基因表达调控的机制. 作为一门科学,蛋白质组研究并非从零开始,它是已有20多年历史的蛋白质(多肽)谱和基因产物图谱技术的一种延伸. 多肽图谱依靠双向电泳(Two-dimensional g
蛋白质双向电泳(twodimensional-electrophoresis)过程与体会2
2.3.2 第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)选用DYY-Ⅲ型(北京六一仪器厂生产)电泳槽(规格为200×200×1mm),分离胶浓度为12%,无浓缩胶。待胶聚合后,将电聚焦后已经平衡的胶条平放于浓缩胶顶端(避免胶条拉直),并用1%琼脂糖(电极缓冲液配制)封胶,特别应注意避免胶条与
蛋白质双向电泳(twodimensional-electrophoresis)过程与体会3
二、一向电泳(13cm的holder)(1)取大约70-100ng的蛋白与溶胀液混合总体积达到250vl(2)将上述溶液加到holder 的两个电极之间。(3)去掉胶条的保护膜,胶面朝下,先将胶条尖端朝胶条槽的尖端方向放入胶条槽中,慢慢下压胶条,并前后移动,避免生成气泡,最后放下胶条平端,使溶液浸湿
蛋白质双向电泳(twodimensional-electrophoresis)过程与体会1
双向电泳IEF (sigma)IEF(not IPG)/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下,适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的,嘻嘻!IEF用Biorad的圆盘电泳槽(不行用国产的吧,不推荐),SDS-PAGE用六一厂的就可以了(ft,六一厂应该给我money吧,给你做广告
生物素与细胞表面的膜蛋白是怎样结合的
通过生物素化标记分析细胞膜亚蛋白质组Analysis of Cell Membrane Subproteome by Biotinylation of Proteins添加成功!您可以在“我的服务”中查看您添加的引用通知列表,并且配置获取通知的方式。关闭细胞膜在许多基本生物学作用过程中扮演着重要角色