关于单克隆抗体技术的细胞筛选的介绍
杂交瘤细胞在融合后2周左右即可筛选，即把分泌所需抗体的杂交瘤孔从众多的孔中选出来，通常也称为抗体检测。抗体检测的方法很多，通常根据所研究的抗原和 实验室的条件而定。但作为杂交瘤筛选的抗体检测方法必须具有快速、准备、简便，便于一次处理大量样品等特点。因为往往有几百个样品需要在短短几个小时就报 告结果，以便决定杂交瘤细胞的取舍。所以选用抗体检测方法的原则是快速、敏感、特异、可靠、花费小和节省人力。一般说来，在融合之前就必须建立好抗体检测 方法，并克服可能存在的问题。另一个重要问题是抗体检测方法所需要的“动力学范围”，即检出背景以上的最强与最弱信号之比，依所用的检测抗原是否纯净而 定。如杂交瘤抗体是针对纯化的蛋白质抗原的，100%的抗原参与反应，一个阳性/阴性判别系统就够了。另一方面，如果杂交瘤抗体是针对细胞表面微量的蛋白 抗原，检测系统可能需要能测出微弱信号，则动力学范围至少应为10：1，最好为100：1。另外，检测方法的选择还......阅读全文
单克隆抗体技术的临床应用介绍
单克隆抗体技术在临床应用中为疾病的诊断、治疗提供了新手段，作为治疗用药物，单克隆抗体主要应用于肿瘤、自身免疫疾病、器官移植排斥及病毒感染等领域。单克隆抗体也可用于肿瘤的导向治疗，将针对某一肿瘤抗原的单克隆抗体与化疗或放疗药物连接，利用单克隆抗体的专一性识别结合特点，将药物携带至靶细胞并直接将其杀
关于高通量筛选应用的介绍
充分利用药用资源 由于高通量筛选依赖数量庞大的样品库，实现了药物筛选的规模化，较大限度地利用了药用物质资源，提高了药物发现的几率，同时提高了发现新药的质量。 微量筛选系统 由于高通量筛选采用的是细胞、分子水平的筛选模型．样品用量一般在微克级（μg），节省了样品资源，奠定了“一药多筛”的物质基础
关于重组子的筛选方法介绍
1、抗生素筛选法：菌株为某种抗生缺陷型，而质粒上带有该抗性基因（如氨苄青霉素，卡拉霉素等）这样只有转化子才能在含该抗生素的培养基上长出。本实验利用抗生筛选转化子。 2、互补法：至今使用的许多载体（如PUC系列）有含有一个大肠杆菌DNA的短区段，其中含有β－半乳糖苷酸基因（lacZ）的调控序列和
细胞的筛选驯化和保藏方法介绍
实现悬浮培养首先需要选择合适的宿主细胞，细胞系的特征直接影响放大的可能性以及放大技术的选择。同一种细胞在悬浮培养和贴罐培养时对同一病毒的敏感性不同；同一株细胞不同的克隆对营养条件有不同的需求，对病毒敏感性亦可能不同。 常根据毒株特性，综合考虑所用毒株能在何种细胞上增殖、表达，悬浮或贴壁细胞属性足否适
关于cDNA文库的筛选鉴定的介绍
1．核酸杂交 是最常用，最可靠的方法之一，可大规模地分析文库的克隆子。 1．同源探针：至少含有所需cDNA克隆的一部分确切序列，常用于以一个部分克隆分离cDNA文库中的全长克隆。 2．部分同源探针：探针的序列与所要筛选的cDNA克隆的序列相关但不相同，常用于克隆家族基因。 3．总cDNA
高通量筛选的技术进展相关介绍
我国进行药物高通量筛选的优势首先是化合物来源广泛，且多为天然；其次是对化合物生物活性的筛选目的较明确，无目的合成的化合物较少；第三，我国传统药物为筛选研究提供了一个巨大的资源库，可从中药中提取分离筛选新的化合物。这些优势为药物的高通量筛选打下了坚实基础。 我国药物高通量筛选初现规模：药物高通量
关于单克隆抗体的抗原准备介绍
抗原，是指能够刺激机体产生（特异性）免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合，发生免疫效应（特异性反应）的物质。 抗原的基本特性有两种， 一是诱导免疫应答的能力，也就是免疫原性， 二是与免疫应答的产物发生反应，也就是抗原性。 很多物质都可以成为抗原，抗原的具体分类可以参见
关于单克隆抗体药物的展望介绍
单克隆抗体药物在生物技术制药中占有重要地位，并逐渐成为生物医药领域发展的主要方向。从全球市场来看，抗体药物成了国际制药业争夺的焦点，并购成为国际制药业巨头快速切入抗体产业的捷径。此外，目前市场上75%的抗体药物将于2015年ZL到期，这也给我国生物制药公司提供了介入抗体药物的时机。单抗药物治疗主
关于单克隆抗体的克隆方法介绍
1．配2.5%的琼脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。 2．将117ml完全DMEM液和3ml10倍浓度的DMEM液混合，置45℃水浴预热。 3．将琼脂糖与DMEM液混合，即为含0.5%琼脂糖的完全DMEM液，并加75×108脾细胞。 4．每块平皿加10ml，于室温中凝固。 5．
关于单克隆抗体的制备过程介绍
1.免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。 2.细胞融合 采用二
关于－单克隆抗体药物的分类介绍
单抗药物一般分为:治疗疾病（尤其是肿瘤）的单抗药剂、抗肿瘤单抗偶联物、治疗其他疾病的单抗。单抗药剂针对的靶点通常为细胞表面的疾病相关抗原或特定的受体。如:最早被美国FDA批准用于治疗肿瘤的单抗药物利妥昔单抗；抗肿瘤单抗偶联物，或称免疫偶联物(Immunoconjugate)由单抗与有治疗作用的物
Cell：光学混合筛选技术几天内筛选人细胞中的数千基因
如今，在一项新的研究中，来自美国麻省理工学院和布罗德研究所的研究人员开发出一种方法，该方法将大规模混合筛选与基于图像的细胞行为分析相结合。这种称为光学混合筛选（optical pooled screen）的方法允许人们在空间和时间分辨率下研究基因如何影响细胞过程，而其他的混合筛选方法则无法做到这
关于单克隆抗体的动物免疫的介绍
单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠，鼠单抗的应用范围相当广泛，一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术。 免疫原分为可溶性抗原和颗粒性（细胞）抗原，用无菌盐水稀释并与佐剂混合，腹腔注射抗原与佐剂彻底混匀后形成的稳定乳状液，在免疫原提供持续的免疫应答基础上进行加强免疫 周期
单克隆抗体的细胞融合关键介绍
1．技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。2．融合试验最大的失败原因是污染，融合成功的关键是提供一个无毒无菌的操作环境。
单克隆抗体技术的技术特点
一是特异性,针对特定的单一抗原表位,它具有高度的特异性,抗肿瘤抗体药物的研究表明,其特异性主要表现为特异性结合、选择性杀伤靶细胞、体内靶向性分布以及具有更强的疗效。二是多样性,主要表现在靶抗原的多样性、抗体结构的多样性、作用机制的多样性等方面。三是定向性,抗体药物可以定向制造,就是根据需要制备具有不
单克隆抗体技术的技术特点
①蛋白质的精细结构；②淋巴细胞亚群的表面新抗原；③组织相容性抗原；④激素和药物的放射免疫（或酶免疫）分析；⑤肿瘤的定位和分类；⑥纯化微生物和寄生虫抗原；⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合，将药物带至病灶部位。因此，单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊
单克隆抗体技术的技术应用
疾病诊断利用单抗进行疾病的诊断目前主要表现在人类疾病和畜禽传染病的诊断方面，尤其在一些感染性疾病和肿瘤的诊断方面。主要通过鉴定病原体或肿瘤抗原来诊断人是否感染相应疾病。疾病治疗目前利用单抗对疾病进行治疗已取得了很大的成果，主要是将单抗同药物耦联，再与病原体或肿瘤的特异抗原结合后发挥作用。食品卫生目前
单克隆抗体技术的技术特点
一是特异性，针对特定的单一抗原表位，它具有高度的特异性，抗肿瘤抗体药物的研究表明，其特异性主要表现为特异性结合、选择性杀伤靶细胞、体内靶向性分布以及具有更强的疗效。二是多样性，主要表现在靶抗原的多样性、抗体结构的多样性、作用机制的多样性等方面。三是定向性，抗体药物可以定向制造，就是根据需要制备具有不
关于圆素胶原蛋白的筛选介绍
1、原料粉 原料来源：骨胶原蛋白基本采用药用明胶为原料。骨胶原蛋白中富含弹力蛋白，对于改善皮肤松弛，延缓衰老的效果会更明显。因此无论从工艺还是效果上，纯骨胶原蛋白更适合为人体吸收。 2、萃取工艺 酸碱水解与酶解的差别：酶法工艺为目前最为理想和安全的技术，不会破坏分子结构，但相应的萃取成本也
关于过敏原筛选的基本介绍
过敏原筛选是敏筛过敏源检测系统采用免疫印迹方法或者吸入致敏物质而发生的过敏反应而进行过敏原筛选的等手段进行筛选过敏原的方法。 异常结果：皮肤过敏又称为“敏感性”皮肤。皮肤过敏主要是指当皮肤受到各种刺激如不良反应的化妆品、化学制剂、花粉、某些食品、污染的空气等等，导致皮肤出现红肿、发痒、脱皮及过
关于高通量筛选的基本－应用介绍
1、充分利用药用资源 由于高通量筛选依赖数量庞大的样品库，实现了药物筛选的规模化，较大限度地利用了药用物质资源，提高了药物发现的几率，同时提高了发现新药的质量。 2、微量筛选系统 由于高通量筛选采用的是细胞、分子水平的筛选模型． 样品用量一般在微克级（μg），节省了样品资源，奠定了“一药多
高通量筛选技术的实验方法介绍
高通量筛选的实验方法分子水平和细胞水平的实验方法（或称筛选模型）是实现药物高通量筛选的技术基础。由于药物高通量筛选要求同时处理大量样品，实验体系必须微量化，而这些微量化的实验方法应根据新的科研成果来建立。第四军医大学周四元研究认为，药物高通量筛选模型的实验方法，根据其生物学特点，可分为以下几类：
转染细胞的筛选原则
1．确定抗生素作用的最佳浓度：不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细胞8 孔，接种量以第二天长成25%单层为宜，置CO2 孵箱中37℃培养过夜。2) 将培养液换成含抗生素的培养基，抗生
转染细胞的筛选方式
1．确定抗生素作用的最佳浓度：不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细胞8 孔，接种量以第二天长成25%单层为宜，置CO2 孵箱中37℃培养过夜。2) 将培养液换成含抗生素的培养基，抗生
关于单克隆抗体的研究进展介绍
单克隆抗体药物的发展起源于1975年，杂交瘤技术的问世使大量制备均一的鼠源单克隆抗体成为可能。1986年第一个抗移植后免疫排斥反应的鼠源单克隆抗体muromonab-CD3(OKT3)，经美国食品药品监督管理局（Food and Drug Administration, FDA）批准上市，但是来
单克隆抗体制备饲养细胞的相关介绍
在体外的细胞培养中，单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖，必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖，加入的细胞称之为饲养细胞（Feedercell）。在细胞融合和单克隆的选择过程中，就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体，因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细胞
细胞转染所需细胞的筛选方法
1．确定抗生素作用的最佳浓度：不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细胞8 孔，接种量以第二天长成25%单层为宜，置CO2 孵箱中37℃培养过夜。2) 将培养液换成含抗生素的培养基，抗生
关于生精细胞检测技术的介绍
生精细胞检测技术是由中国男性不育专家曹兴午教授创立的。曹兴午教授，曾任北京中日友好医院男科主任，现任中国性学会常务理事、性医学专委会秘书长、学术工作部副部长；《中国性科学》、《中国医学检验》、《中国社区医学》等三种杂志编委、研究员。参编20部著作，发表论文近100篇，科普文章400篇，曾多次获优
关于细胞破碎技术机械法的介绍
1、高压匀浆破碎法（homogenization） 高压匀浆器是常用的设备，它由可产生高压的正向排代泵（positive displacenemt pump）和排出阀（discharge valve）组成，排出阀具有狭窄的小孔，其大小可以调节。细胞浆液通过止逆阀进入泵体内，在高压下迫使其在排出
关于细胞破碎的原理与技术介绍
高压均质机是由一个高压柱塞泵及特殊结构的均质阀组成，需处理的物料在柱塞所造成的高压条件下进入可调节压力大小的阀组中，失压后的物料从可调节限流缝隙中以极高的流速（1000米/秒，最高可达1500米/秒）喷出，撞在阀组件之一的冲击环上 1、空穴效应 被柱塞压缩的物料内积聚了极高的能量，通过可调节