简述DNA连接酶的用途

DNA连接酶主要用于基因工程,将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合,故也称“基因针线”。 人教版高中生物选修3中提到的E·coliDNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端;T4DNA连接酶,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。......阅读全文

DNA连接酶是怎样发现的?

  DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必

DNA-连接酶参与哪些过程

DNA连接酶主要应用于基因工程中连接两个粘性末端时使用。DNA连接酶主要用于基因工程,将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合,故也称“基因针线”。

DNA-连接酶参与哪些过程

dna连接酶在人体中也有存在,不过并不是用来复制dna从而进行细胞分裂的,人体细胞分裂所需的酶是dna聚合酶。人体中的dna连接酶是用来将入侵人体的外援细菌或病毒的dna剪碎的,在没有外源细菌或病毒入侵时,dna连接酶不发挥作用基因工程中的dna连接酶大多取自于原核生物体内

Taq-DNA连接酶的基本信息

中文名称Taq DNA连接酶英文名称Taq DNA ligase定  义编号:EC 6.5.1.1。存在于水生嗜热菌(Thermus aquaticus)中的DNA连接酶,催化可与目标DNA完全杂交的两条相邻寡核苷酸的5′-PO4和3′-OH的连接反应。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(

Taq-DNA连接酶的基本信息

中文名称Taq DNA连接酶英文名称Taq DNA ligase定  义编号:EC 6.5.1.1。存在于水生嗜热菌(Thermus aquaticus)中的DNA连接酶,催化可与目标DNA完全杂交的两条相邻寡核苷酸的5′-PO4和3′-OH的连接反应。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(

DNA连接酶的发现及研究历史

DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是

DNA聚合酶及DNA连接酶的功能和区别

DNA聚合酶,以已有的核酸序列作为模板,将4种脱氧核苷酸(A、T、G、C)按照模板的碱基排列顺序,以“碱基互补原则”依次连接,聚合成为一条新的DNA链。 DNA连接酶,是将DNA片段上的缺刻连接起来的酶。    一、DNA聚合酶    (一)DNA聚合酶I     DNA聚合酶I(DNA pol

T4DNA连接酶的主要种类

  常用的DNA连接酶有两种:来自大肠杆菌的DNA连接酶和来自噬菌体的T4DNA连接酶。二者的作用机理类似。T4连接酶作用分三步:  (1) T4DNA连接酶与辅助 因子ATP形成酶-AMP复合物。  (2) 酶-AMP复合物结合到具有5’-磷酸基和3’-羟基切口的DNA上,使DNA腺苷化。  (3

T4DNA连接酶的基本特性

  大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。  DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子,和DNA聚合酶Ⅰ

DNA连接酶黏端和平端的区别

黏端和平端的区别:用限制酶切割后得到的末端齐平就是平末端,一长一短就是粘性末端根据限制性内切酶切割DNA所产生的产物末端,发现限制性内切酶对DNA的切割有两种方式,即平切和交错切。所谓平切,就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,这样产生的末端就是平末端。交错切就是限制性内切酶在DNA

DNA连接酶的衔接物连接法介绍

  所谓衔接物(linker),是指用化学方法合成的一段由10~12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端,用多核苷酸激酶处理使之磷酸化,然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物

DNA连接酶的常见种类和作用机制

1、T4DNA连接酶T4DNA连接酶是目前应用比较多的病毒基因组编码的DNA连接酶,在基因重组中广泛使用。噬菌体类型较多,目前研究发现T4噬菌体能够合成T4DNA连接酶,并且已经能够从被T4嗜菌体感染的大肠杆菌中提取该酶,此外科学家也已经定位该酶的合成基因,即噬菌体T4的30基因。T4DNA连接酶具

什么是DNA连接酶?有哪些种类?

DNA 连接酶是生物体内重要的酶,其所催化的反应在DNA的复制和修复过程中起着重要的作用。DNA连接酶分为两大类:一类是利用ATP 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP的DNA 连接酶,另一类是利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖NAD

关于DNA连接酶的连接手段的介绍

  目前已知有三种方法可以用来在体外连接DNA片段:  第一种方法是,用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;  第二种方法是,用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly(dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶

卫星DNA的用途

体细胞克隆卫星DNA可以把某一个体的遗传物质完整地传递下去,因而它对于保存并传播优良个体和珍稀濒危动物的基因组具有重大意义。确定异种重构胚的核是否来自于供体的核就显得异常关键。中国科学院昆明动物研究所丁波、张亚平等人建立了一种从早期囊胚中提取DNA以进行核内和核外DNA分析的方法。用这种方法从异种克

卫星DNA的用途

体细胞克隆卫星DNA可以把某一个体的遗传物质完整地传递下去,因而它对于保存并传播优良个体和珍稀濒危动物的基因组具有重大意义。确定异种重构胚的核是否来自于供体的核就显得异常关键。中国科学院昆明动物研究所丁波、张亚平等人建立了一种从早期囊胚中提取DNA以进行核内和核外DNA分析的方法。用这种方法从异种克

T4-RNA连接酶的来源和用途

用途:用RNA 3'末端标记;RNA和RNA分子间连接;寡核苷酸的环化;tRNA修饰;5' RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链;在蛋白质特定位点引入非天然氨基酸。来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4噬菌体。活性定义:37℃30分钟内,催化1 nmol 5'-[P]-(

T4DNA连接酶的基本内容

  T4DNA连接酶是ATP依赖的DNA连接酶,催化两条DNA双链上相邻的5′磷酸基和3′羟基之间形成磷酸二酯键。可接双链DNA的平末端、相容黏末端及其中的单链切口,在分子生物学中有广泛的应用。T4DNA连接酶是经原核表达,柱层析纯化获得的高纯T4DNA接酶,SDS-PAGE显示为一条62kD的蛋白

T4--DNA连接酶的基本信息

中文名称T4 DNA连接酶英文名称T4 DNA ligase定  义编号:EC 6.5.1.1。来自感染T4噬菌体的大肠杆菌,催化双链DNA平头末端或黏性末端相邻核酸的5′-PO4和3′-OH连接反应的酶,还可催化双链RNA和双链RNA或DNA连接,但不能催化单链核酸的连接。可修补在双链DNA、RN

T4DNA连接酶的结构与作用

T4DNA连接酶是ATP依赖的DNA连接酶,催化两条DNA双链上相邻的5′磷酸基和3′羟基之间形成磷酸二酯键。可接双链DNA的平末端、相容黏末端及其中的单链切口,在分子生物学中有广泛的应用。T4DNA连接酶是经原核表达,柱层析纯化获得的高纯T4DNA接酶,SDS-PAGE显示为一条62kD的蛋白条带

T4DNA连接酶的特性及种类

  特性  大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。  DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子,和DNA

T4-DNA连接酶的基本信息

中文名称T4 DNA连接酶英文名称T4 DNA ligase定  义编号:EC 6.5.1.1。来自感染T4噬菌体的大肠杆菌,催化双链DNA平头末端或黏性末端相邻核酸的5′-PO4和3′-OH连接反应的酶,还可催化双链RNA和双链RNA或DNA连接,但不能催化单链核酸的连接。可修补在双链DNA、RN

DNA连接酶的连接方法有哪几种?

第一种方法是,用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;第二种方法是,用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly(dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;第三种方法是,先在DNA片段末端加上化学合成

卫星DNA的用途介绍

体细胞克隆卫星DNA可以把某一个体的遗传物质完整地传递下去,因而它对于保存并传播优良个体和珍稀濒危动物的基因组具有重大意义。确定异种重构胚的核是否来自于供体的核就显得异常关键。中国科学院昆明动物研究所丁波、张亚平等人建立了一种从早期囊胚中提取DNA以进行核内和核外DNA分析的方法。用这种方法从异种克

揭示非洲猪瘟病毒DNA连接酶的分子机制

  ASFV(African swine fever virus,非洲猪瘟病毒)病毒是一种独特的双链DNA病毒,既能感染野生猪,也能感染家猪。一旦爆发,将会导致近100%受感染猪的死亡。自1921年被发现以来,ASFV病毒受到了科研人员的广泛关注,但目前仍没有任何有效的疫苗被报道。ASFV病毒对全球

T4DNA连接酶的内容与储存方法

名称:T4DNALigase数量:20ml 保存条件:-20℃DNA连接名称:10xLigationBuffer 数量:100ml 保存条件:-20℃T4DNA接酶活性为3u/ml,单位定为Weiss单位(0.01Weiss单位活性的T4DNA接酶在16℃时20ml体系反应20分钟,可以连接95%的

关于T4DNA连接酶的作用机制介绍

  T4DNA连接酶是目前应用比较多的病毒基因组编码的DNA连接酶,在基因重组中广泛使用。噬菌体类型较多,目前研究发现T4噬菌体能够合成T4DNA连接酶,并且已经能够从被T4嗜菌体感染的大肠杆菌中提取该酶,此外科学家也已经定位该酶的合成基因,即噬菌体T4的30基因。T4DNA连接酶具有连接黏性末端和

简述依那普利的用途

  血管紧张素转化酶抑制剂(ACE-I),是继卡托普利之后世界上第2个上市的ACE-I。治疗高血压的作用和卡托普利相似,但比卡托普利强,作用缓慢而持久。和卡托普利一样,和利尿药双氢氯噻嗪配成复方,疗效一般可提高15%-30%。用于原发性、肾性高血压、肾血管性高血压、恶性高血压等,还适用于充血性心力衰

简述安替比林的用途

  1.硝酸、亚硝酸及碘的分析试剂。测定能形成络合阳离子的元素(如铋、锡、锑和汞等)。重量分析测定钛。  2.该品为解热镇痛药,这类非甾抗炎药具有较强的解热镇痛、抗炎及抗风湿作用。但由于不良反应严重,临床应用已日趋减少,其中的一些老品种已逐渐趋向淘汰。安替比林、氨基比林、安乃近等片剂都是卫生部198

简述酮康唑的用途

  酮康唑为咪唑类抗真菌药,其作用机制为抑制真菌细胞膜麦角甾醇的生物合成,影响细胞膜的通透性,抑制其生长。酮康唑可用于治疗浅表和深部真菌病,如皮肤和指甲癣、阴道白色念珠菌病、胃肠真菌感染等,以及由白色念珠菌、类球孢子菌、组织胞浆菌等引起的全身感染。