反义寡核苷酸的基本内容

反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS2ODNs),是用硫原子将磷酸骨架上的非成键氧原子取代后形成的一类新的寡核苷酸类似物,长度在5~40核苷酸之间。它克服了寡核苷酸在血清中易被核酸酶降解的特性,在合成这一类反义寡核苷酸中,常常需要对合成产物的长度,纯度等进行准确测定,以免影响后一步的活性实验和使用效果。毛细管凝胶或流动胶电泳方法已被广泛应用于单链或双链寡核苷酸的分离研究......阅读全文

反义RNA按作用机制分类

反义RNA是指与mRNA互补后,能抑制与疾病发生直接相关基因的表达的RNA。它封闭基因表达,具有特异性强、操作简单的特点,可用来治疗由基因突变或过度表达导致的疾病和严重感染性疾病。根据反义RNA的作用机制可将其分为3类:Ⅰ类反义RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分编码区,直接抑制翻译,

反义RNA的人工合成

既然反义RNA在原核生物中对基因表达起着重要的调控作用,那么人工设计在天然状态下不存在的反义RNA来调节靶基因的表达,想必也是可能的。这已在不少实验中得到证实。1.由于对靶mRNA的SD序列的上游区的结构了解甚少,因此,在要设计Ⅱ类反义RNA用于和靶mRNASD序列上游区结合,以期达到调节该mRNA

应用混合寡核苷酸引物引导的cDNA扩增(MOPAC)

实验方法原理 对于仅仅知道某种蛋白质的部分序列,而要克隆其基因的最佳方法是,利用已知氨基酸序列设计相应的寡核苷酸,用此寡核苷酸作为探针去筛选基因文库钓取全长基因或者用寡核苷酸作为引物进行 PCR 扩增靶基因。这两种方法都会遇到寡核苷酸所编码的遗传密码子的简并性问题。实验材料 热稳定 DNA 聚合酶D

应用混合寡核苷酸引物引导的cDNA扩增

            实验方法原理 对于仅仅知道某种蛋白质的部分序列,而要克隆其基因的最佳方法是,利用已知氨基酸序列设计相应的寡核苷酸,用此寡核苷酸作为探针去筛选基因文库钓取全长基因或者用寡核苷酸作为引物进行 PCR 扩增靶基因。这两种方法都会遇到寡核苷酸所编

应用混合寡核苷酸引物引导的cDNA扩增(MOPAC)

对于仅仅知道某种蛋白质的部分序列,而要克隆其基因的最佳方法是,利用已知氨基酸序列设计相应的寡核苷酸,用此寡核苷酸作为探针去筛选基因文库钓取全长基因或者用寡核苷酸作为引物进行 PCR 扩增靶基因。这两种方法都会遇到寡核苷酸所编码的 遗传密码子的简并性问题。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译

Science关注:向着RNA开炮的反义新药

  来自Science网站的新闻报道,根据一项临床试验发布的结果,采用具有漫长、曲折历史的一种方法策略,一种新药似乎可以减轻克罗恩病(Crohn’s disease)的症状。这一以核苷酸作为基本构件的药物是生物技术公司Celgene做出的一场豪赌,去年Celgene付出7.1亿美元的巨款将这一药物收

Science关注:向着RNA开炮的反义新药

  来自Science网站的新闻报道,根据一项临床试验发布的结果,采用具有漫长、曲折历史的一种方法策略,一种新药似乎可以减轻克罗恩病(Crohn’s disease)的症状。这一以核苷酸作为基本构件的药物是生物技术公司Celgene做出的一场豪赌,去年Celgene付出7.1亿美元的巨款将这一药物收

关于基因治疗的反义技术介绍

  又称反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotides)技术,是指利用人工合成的反义RNA和反义DNA来阻断基因的转录或复制,控制细胞生长在中间阶段,使编码蛋白质的基因能转录为mRNA,因而不能翻译成相应的蛋白质,以达治疗某一疾病的目的、用反义DNA已对某些癌症进行临床试

关于反义RNA的基本信息介绍

  反义RNA是指与mRNA互补后,能抑制与疾病发生直接相关基因的表达的RNA。它封闭基因表达,具有特异性强、操作简单的特点,可用来治疗由基因突变或过度表达导致的疾病和严重感染性疾病。根据反义RNA的作用机制可将其分为3类:Ⅰ类反义RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分编码区,直接抑制翻

两篇Nature证实基因沉默药物有望治疗两种致命的神经疾病

  在两项针对小鼠的研究中,研究人员证实一种经设计抵抗导致脊髓小脑共济失调2型(spinocerebellar ataxia type 2, SCA2)的基因突变的药物可能也被用来治疗肌萎缩性脊髓侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis, ALS)。这两项研究均于201

寡核苷酸的主要应用

寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 [2]  。寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。调控寡核苷酸用于抑制RNA

寡核苷酸的应用介绍

寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中  。寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。调控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防

寡核苷酸的应用特点

寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 。寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。调控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防止

寡核苷酸的优化设计

关键词:寡核苷酸;优化设计中图分类号:Q524     在核酸分子杂交、DNA序列测定和通过PCR放大DNA片段等实验中,都需要使用寡核苷酸作为探针或引物,而对这些反应的质量起最重要影响作用的,就是这些寡核苷酸探针或引物。用优化的寡核苷酸进行实验能够很快得到好的结果,而用不够合适的寡核苷酸时,常常得

寡核苷酸引物的作用

PCR技术中的引物的本质和作用。引物是一小段单链DNA或RNA,引物可以做为DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点,在细胞外的条件下,只有通过引物,DNA才可以开始进行复制。引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模

简述寡核苷酸的应用

  寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 [2] 。  寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。  调控寡核苷酸用于

寡核苷酸的应用介绍

寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 。寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。调控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防止

寡核苷酸的相关操作

In this section, you will find techniques related to oligonucleotides, such as oligo purification by acrylamide gel, annealing two oligos to make doub

寡核苷酸的基本介绍

  寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段,但在使用这一术语时,对核苷酸残基的数目并无严格规定,在不少文献中,把含有30甚至更多核苷酸残基的多核苷酸分子也称作寡核苷酸。寡核苷酸可由仪器自动合成,它可作为DNA合成的引物(Prime

关于寡核苷酸的简介

  寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段,但在使用这一术语时,对核苷酸残基的数目并无严格规定,在不少文献中,把含有30甚至更多核苷酸残基的多核苷酸分子也称作寡核苷酸。寡核苷酸可由仪器自动合成,它可作为DNA合成的引物(Prime

寡核苷酸阵列的概念

微阵列(DNA Microarray)也叫寡核苷酸阵列(Oligonucleotide array),是人类基因组计划(Human Genome Project,HGP)的逐步实施和分子生物学的迅猛发展及运用的产物,它是生物学家受到计算机芯片制造和广为应用的启迪,融微电子学、生命科学、计算机科学和光

寡核苷酸探针的简介

  基因探针,即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩瀚的基因组中把目的基因显示出来。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:①应是单链,若为双链,必须先行变性处理。②应带有容

反义RNA的调控细菌基因的表达功能

反义RNA对编码CAP的基因的调控作用已如前述。这里再介绍一下micF RNA对ompF基因的表达的调控。ompF蛋白质是大肠杆菌的外膜蛋白的主要成分这一。micF RNA是从另一基因(ompC基因)附近的DNA序列转录而来,和o-mpFn RNA的5'端有70%的序列互补,因此在体外mic

分子遗传学词汇反义DNA

中文名称:反义DNA定义:反义DNA又称反义链。在20世纪60年代的文献上常把作为转录模板的那条链称为有义链或称有义DNA,而另一条单链就称为反义DNA或称反义链,而较近期的文献则相反,把不作模板转录的链称为有义DNA或称编码链,作为模板转录的链称为反义链或反义DNA,或模板链。

反义技术——RNA干扰(RNA-interference,RNAi)

最近由于RNA干扰(RNA interference,RNAi)的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的(1),是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在RNAi领域取得的进步,已经有许多这方面的综述发表(2-4)。RNA干扰是由长的双链 RNA

Nature捷报一种新型基因药物在多类型小鼠模型上获得成功

  在小鼠研究中,研究人员发现一种用于治疗脊髓小脑共济失调2型(spinocerebellar ataxia type 2 ,SCA2)的基因药物,也可用于肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis ,ALS)。  “我们的研究结果为治疗这种破坏性疾病提供了希望,”

PNAS:研究反义RNA的一条捷径

  双链DNA在转录过程中打开,其中一条链生成作为蛋白翻译模板的信使RNA。偶尔,另一条DNA也能产生一个反义的RNA分子(asRNA),这种反义RNA的序列与信使RNA互补。许多细胞中都存在这样的asRNA,但人们并不了解这些分子有何功能。近日,科学家们开发了一个分离和鉴定反义RNA的新

反义RNA调控细菌基因的表达功能介绍

  反义RNA对编码CAP的基因的调控作用已如前述。这里再介绍一下micF RNA对ompF基因的表达的调控。ompF蛋白质是大肠杆菌的外膜蛋白的主要成分这一。micF RNA是从另一基因(ompC基因)附近的DNA序列转录而来,和o-mpFn RNA的5'端有70%的序列互补,因此在体外m

关于反义RNA的人工合成的介绍

  既然反义RNA在原核生物中对基因表达起着重要的调控作用,那么人工设计在天然状态下不存在的反义RNA来调节靶基因的表达,想必也是可能的。这已在不少实验中得到证实。  1.由于对靶mRNA的SD序列的上游区的结构了解甚少,因此,在要设计Ⅱ类反义RNA用于和靶mRNASD序列上游区结合,以期达到调节该

Cell-亮点|-反义lncRNA如何调控基因的表达?

  反义lncRNA(antisense lncRNA)是指由基因(通常是蛋白编码基因)的反义链转录,并与该基因的mRNA存在序列重叠的RNA分子。随着对非编码RNA研究的深入,研究发现约70%的基因均有反义lncRNA【1】。更为重要的是,反义lncRNA往往与其正义链基因的表达存在相关性,提示反