细胞培养的概念
细胞培养是细胞在受控条件下(通常在其自然环境之外)生长的过程。感兴趣的细胞已被后从活组织中分离出来,他们随后可以严格控制的条件下维持。这些条件因每种细胞类型而异,但通常由合适的容器组成,该容器带有底物或培养基,可提供必需的营养素(氨基酸、碳水化合物、维生素、矿物质)、生长因子、激素和气体,并调节理化环境(pH缓冲液、渗透压、温度)。大多数细胞需要表面或人工底物(贴壁或单层培养),而其他细胞则可以自由漂浮在培养基中(悬浮培养)生长。大多数细胞的寿命是由遗传决定的,但是一些细胞培养细胞已经“转化”为永生细胞,如果提供了最佳条件,它们将无限期繁殖。实际上,术语“细胞培养”现在是指来源于多细胞真核生物的细胞,特别是动物细胞的培养,与其他也能生长细胞的培养类型相反,例如植物组织培养、真菌培养和微生物培养。细胞培养的历史发展和方法与组织培养和器官培养有着密切的联系。病毒培养也与病毒相关,以细胞为宿主。......阅读全文
细胞培养的步骤
细胞培养的步骤:1、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。将融化的细胞移入离心管中,加入37℃预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混
细胞培养
细胞培养是一种常用的实验室技术,其中原核或真核细胞在受控条件下生长。大规模哺乳动物细胞培养被广泛用于生物技术中,特别是用于生产疫苗,蛋白质,酶,抗体和激素。细胞培养还用于许多研究**域,特别是在制药**域,其中将细胞用作研究许多疾病(例如癌症或心脏病)的模型。细胞用于靶标鉴定和验证,基于细胞的测定法
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮?
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮? 1、收到细胞,先要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢
细胞培养细胞培养的操作步骤及注意事项
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮?
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮? 1、收到细胞,先要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如2
细胞培养中支原体污染对细胞培养的危害
1. 支原体污染的普遍性支原体污染是细胞培养领域遇到的性问题,据文献报道,综合美国食品药品监督管理局(FDA)、美国模式菌种收集中心(ATCC)等机构收到的相关数据,世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。该数据未统计中国大陆的数据,但可以确定,大陆地区的支原体污染比例与此相当,或更严
细胞培养实验中细胞培养液的相关介绍
现代生物技术均通过细胞作为载体来进行,无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基,即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质,就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境,使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞
巨噬细胞培养常用细胞培养器皿介绍
常用细胞培养器皿有培养瓶、培养板、培养皿等。常准备量是使用量的三倍。器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面几种。巨噬细胞1、液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液、血清等液体,常用规格有500ml、250ml、100ml等几
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
骨骼肌细胞培养和肌细胞培养
骨骼肌细胞培养 1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。 2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。 3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化
大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术
大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM
猪甲状腺细胞培养实验_细胞培养技术
实验方法原理由于甲状腺富含纤维性组织,所以甲状腺的消化分离一般采用胶原酶与胰蛋白酶联合消化法,用单一的胰蛋白酶消化效果一般;促甲状腺激素(TSH)是培养甲状腺细胞必备的,它能够起到促进甲状腺细胞生长的作用。实验材料猪甲状腺试剂、试剂盒F-12培养基胎牛血清胰蛋白酶胶原酶Ⅳ牛 TSH仪器、耗材眼科剪滴
特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验
实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每
细胞培养的真菌污染?
真菌污染真菌污染是细胞培养过程中最常见的一种,尤其在梅雨季节进行细胞培养更易污染。
原代细胞培养的应用
1、为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段; 2、为传代培养创造条件; 3、服务于临床实践,用于药物筛选等。
细胞培养的前期准备
一.常用设备 准备室的设备: 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品规(放置消毒过的物品)、包装台。配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)。培养室的设备:液氮罐、储品柜(存放杂物)、
细胞培养技术的分类
动物细胞培养在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用
细胞培养污染的预防
体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。 一般预防可从以下几方面着手:1、添加抗生素各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用
物细胞培养的要求
植物细胞培养⑴光照:离体培养的植物细胞对光照条件不甚严格,因为细胞生长所需要的物质主要是靠培养基供给的。但光照不但与光合作用有关,而且与细胞分化有关,例如光周期可对性细胞分化和开花调控作用,所以以获得植株为目的的早期植物细胞培养过程中,光照条件特别重要。以植物细胞离体培养方式获得重要物质,如药物的过
细胞培养的环境要求
1.无菌环境无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内,解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵,但细胞在体外培养的过程中,缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖,必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基
细胞培养的无菌环境
在冻存过程中保护剂的选择使用,细胞的密度,降低温度速度以及复苏时的温度,融化速度等等都对细胞活力有影响。 常用的仪器设备,则就是有无菌室,超净工作台,三重纯水蒸馏器,抽气泵,压力蒸气消毒器,电热恒温培养箱,培养器具,细胞计数板和电子细胞技术仪等等。 而对于无菌室结构一般由更衣间,缓冲间,操作间三个部
植物细胞培养的简介
细胞培养分为动物细胞培养和植物细胞培养,其中动物细胞培养是指在体外无菌条件下,模拟体内正常生理状态下的基本条件和环境,分离培养机体组织细胞或建立细胞系,并使得细胞在体外培养容器中长期生长或繁殖的方法;而植物细胞培养是在离体条件下,将愈伤组织或其他易分散的组织置于 液体培养基中进行震荡培养,得到分
细胞培养的环境要求
1.无菌环境无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内,解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵,但细胞在体外培养的过程中,缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖,必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基
细胞培养板的选择
1)细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型); 2)培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等; 3)根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。
细胞培养的基本技术
一、清洗新采用和重新使用的培养器皿,都要严格清洗,以防各种有害物质对培养细胞损害。培养用的塑料器皿目前主要依靠进口,均已无菌密封包装,可直接使用。对于塑料瓶盖或胶塞等,可水中浸泡后用2%NaOH煮沸10~20min,自来水中浸泡和蒸馏水漂洗2~3次,晾干备用。细胞培养中的绝大部分器皿系玻璃制品,清洗
细胞培养的营养条件
1.培养基细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质,包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。针对不同细胞的营养需求,有多种合成培养基可供选择,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。2.其他添加成分在各种合成培养基提供基础营养物质之外,还需根据不同细胞和不同的培养目的添加其他
细胞培养的辅助要求
1.培养基细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质,包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。针对不同细胞的营养需求,有多种合成培养基可供选择,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。2.其他添加成分在各种合成培养基提供基础营养物质之外,还需根据不同细胞和不同的培养目的添加其他
细胞培养的操作步骤
一、原代培养及其操作步骤原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后,经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群,使之在体外模拟人体生理环境,在无菌、适当温度和一定的营养条件下,生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分,生长缓慢,但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞
细胞培养的基本条
细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。以下是细胞培养的基本条件: 一、合适的细胞培养基 合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的重要的条件之一,培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质
细胞培养板的选择
Edit By Waiting.D细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。(1)平底和圆底(U型和V