二聚体的测定方法
乳胶凝集法 原理: 被检血浆中二聚体与包被在乳胶颗粒上的单抗相作用, 产生絮状沉淀反应。 优点: 快速 缺点:定性实验;半定量测定须多次倍比稀释测定费试剂, 且结果重复性差。 酶联免疫吸附法(ELISA) 原理: 采用2 个针对二聚体的单抗建立的抗原为中心,两种抗体夹心法,并加入辣根过氧化酶的底物以作显色反应。 缺点: 1) 抗体与纤维蛋白(原)的D片断有部分反应。一般情况下D片断吸有一个抗体结合部位,因此不再与带显色物的抗体结合,但有时挂钩现象干涉实验结果。 2) 操作步骤复杂、费时,抗原抗体反应受温度时间影响。 3)每次实验需带标准曲线,因此需留一批标本同时测定,不适用于临床病人及时诊断及治疗的需要。 NycoCard 二聚体测定 原理: 免疫过滤胶体金显色反应法采用同种抗体夹心,即以包被的抗体捕获血浆中抗原(二聚体),加入偶联有胶体金的同种抗体显色。 因此也是以抗原为中心,抗体为三明治两侧,但为同......阅读全文
D二聚体水平变化的临床意义
纤维蛋白(原)降解产物和D-二聚体最大的区别之一是,纤维蛋白(原)降解产物可以以纤维蛋白原为底物,而D-二聚体是以纤维蛋白为作用底物,因此,在原发性纤溶时D-二聚体水平并不增高,而FDP水平增高。在其它一些病理情况下,诸如DIC时,两种的变化基本平行。在凝血过程中,纤维蛋白原在被凝血酶水解后,相继释
D二聚体的检测及临床意义
近年由于血栓性疾病的增多,医学检验在免疫测定技术方面,特别是在出凝血和血栓性疾病的研究上取得了重大的进展。D-二聚体的检测方法,从传统的定性试验,变为简单、快速、准确定量的即时检验(POCT)。免疫荧光法对于血栓性疾病的及时准确诊断、以及对溶栓治疗的疗效监测有着重要的作用。 D-二聚体的形成
D二聚体增高,是要闹哪出?
D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子XIII交联后,再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物,是一个特异性的纤溶过程标记物。D-二聚体主要反映纤维蛋白溶解功能。 D-二聚体增高提示了与体内各种原因引起的血栓性疾病相关。同时也说明了纤溶活性的增强; 临床上常见于弥慢性血管内凝血(DI
D二聚体检测的方法及其临床应用
D-二聚体(D—Dimer,D-D)是交联纤维蛋白(Fb)特异的降解产物,它的生成或增高反映了凝血和纤溶系统的激活。近lO年来,已建立了多种有价值的D-D的检测方法。大量研究已经充分证实了D-D在排除诊断下肢深静脉血栓形成(deepvein thromboembolism,DVT)和肺栓塞(pulm
pcr扩增产生大量引物二聚体的原因
引物设计不合理,两条或一条引物的3`端有互补序列,造成自己配对延伸而扩增。建议重新设计引物,,或者降低退火温度、增加模板和引物的量试下,,不过能不能扩出来看运气了。
D二聚体在妇产科的应用价值
D-二聚体是交联纤维蛋白在纤维蛋白溶解酶作用下产生的特异性降解产物,是继发性纤维蛋白溶解的特异性检测指标,也可作为体内血栓形成的无创性检测指标。孕妇D-二聚体的检测有助于早期诊断静脉血栓形成和妊娠并发症,并能监测抗凝治疗。妊娠过程中,随着孕龄的增加,体内凝血成分和纤维蛋白溶解活性出现明显改变,表现为
D二聚体——栓塞筛查标志物
D-二聚体是什么纤维蛋白单体与凝血酶激活因子VIII交联后的交联纤维蛋白,再经过纤溶酶水解所产生的一种终末降解产物,是特异性的纤溶过程标记物之一。D-二聚体的生成反映机体凝血与纤溶系统的激活,在血栓形成性疾病及生理性高凝状态时,均会升高。但D-二聚体的升高并不能说明血栓生成的原因及位置,必须结合临床
如何判断两个引物是否形成二聚体
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板
临床化学检查方法介绍D二聚体介绍
D-二聚体介绍: 纤溶酶可分解纤维蛋白原和纤维蛋白,此酶是纤维蛋白溶解的关键酶。因此,纤维蛋白原和纤维蛋白降解产物的测定是纤维蛋白溶解增高(高纤溶状态)的标志性指标。通常纤维蛋白在因子ⅩⅢa的作用下交联在血管壁上。这种交联的纤维蛋白在裂解时产生具有特异性的D-二聚体。D-二聚体正常值: 血清中的
孕期和D二聚体检测的那些事儿
D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子XIIIa交联后,再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物,是一个特异性的纤溶过程标记物。其浓度可随创伤、手术、妊娠、DIC、血栓等因素升高,反映抗凝系统和纤溶系统的激活。因此,孕期检测D-二聚体具有重要的临床指导意义。一、正常孕产妇的D-二聚体水平有研究表明,正常
医学检验中D二聚体检测的临床意义
体内纤维蛋白溶解系统:在纤溶激活酶的作用下溶解纤维蛋白和纤维蛋白原,部分血管内纤维蛋白的沉积和清除已在血管内沉着的微量纤维蛋白。正常人纤溶酶和抑制酶之间保持了动态平衡,使血液循环能正常进行。 病理状态下,机体发生凝血时,凝血酶作用于纤维蛋白,转变为交联纤维蛋白,同时纤溶系统被激活,降解形成各种F
关于D二聚体检查的临床意义介绍
纤维蛋白(原)降解产物:是纤维蛋白原和纤维蛋白在纤溶酶分解下的产物。作为一种修复系统,是纤溶系统活动性的指标,具有保持肌体血管及排泄管路通畅的作用。在原发性纤溶亢进的病理情况下,纤维蛋白原降解产物是出血的危险信号。 纤维蛋白降解产物:除非纤溶酶的活化先于凝血酶作用,否则不产生纤维蛋白降解产物。
D二聚体的检测现状与规范化
D-二聚体主要反映纤维蛋白溶解功能。D-二聚体增高提示了与体内各种原因引起的血栓性疾病相关,同时也说明了纤溶活性的增强。 临床上常见于弥慢性血管内凝血(DIC)、深静脉血栓(DVT)、肺栓塞(PE)、急性心肌梗塞、脑梗塞、恶性肿瘤、卵巢癌、肺癌、败血症、肝病、妊高征孕妇、先兆子痫、烧
什么是引物二聚体,它对PCR反应有什么影响
是在pcr反应中,两条引物上的互补碱基相结合形成的聚合体,这种聚合体出现了,就相当于原本可以扩增的原料链减少了,即会导致扩增的效率降低,所以最好能避免这种物质的出现.
血浆D二聚体检测在临床上的应用
D-二聚体(DD)来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块,是纤维蛋白单体经活化因子XIII交联后,再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物,是一个特异性的纤溶过程标记物,对于诊断与治疗纤溶系统疾病(如DIC,各种血栓)及与纤溶系统有关疾病(如肿瘤、妊娠综合症),以及溶栓治疗监测,都有着重要的意义。
PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件:1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列;2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有目标条带,即使可能并不清晰;3.选取最清晰的温度,在PCR体系中设置镁离子浓度梯度,选取最理想的条件
简述血浆D二聚体测定的注意事项
血浆D-二聚体测定的注意事项: 不合宜人群:无。 检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。检查结果易受各种药物影响,检查前应该停止服药药物。 检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增
D二聚体和FDP联合检测的临床应用
D-二聚体和FDP的联合检测D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子FXⅢa交联形成纤维蛋白后,再经纤溶酶水解所产生的特异性降解产物,其水平的升高表明存在继发性纤溶亢进(如DIC);FDP反映血循环中纤维蛋白和/或纤维蛋白原,在纤溶酶作用下所产生的多种碎片的含量,其水平的升高表明机体纤溶活性亢进(原发性纤
血栓性疾病的检测指标---D二聚体
D-二聚体是凝血酶及凝血因子Ⅻ作用的交联纤维蛋白经纤溶酶降解作用降解后的终末产物。人体内纤维蛋白一旦形成就会激活纤溶酶,从而使纤维蛋白降解,血浆D-二聚体水平就会升高。血浆D-二聚体含量增高表明体内有血栓形成及溶解发生,可作为无创性体内血栓形成的指标。D-二聚体出现在继发性纤溶中,原发性纤溶中呈阴性
对D—二聚体化验结果临床意义的解读
我们在临床上经常对有长期卧床的患者或者有高危血栓形成因素的患者进行D—二聚体的化验检测。并且知道D—二聚体的正常值定性是阴性,定量是≤500ug/L;对于D—二聚体化验定性阳性或者定量>500ug/L我们就称为D—二聚体阳性或者增高。D—二聚体是纤维蛋白单体经活化因子XⅢ交联后,经纤溶酶水解所产生的
D二聚体检测在骨折患者中的应用
D-二聚体是纤维蛋白单体经过活化因子XIII交联后,再经过纤维溶解酶水解所产生的一种特异性降解产物,是一个特异性的继发性纤溶症的重要指标,其含量的升高反映高凝状态、继发纤溶亢进和血栓形成。近年来由于血栓性疾病的增多,临床上对D-二聚体(D-dimer)的检测需求越来越大。D-二聚体的检测方法,从传统
大鼠D二聚体(DDimer)ELISA检测法
大鼠D-二聚体(D-Dimer)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 D-Dimer 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 D-Dimer与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠D-Dimer,形成免疫复合物连接在板上,辣
D二聚体检测对“血栓病”诊断临床价值
D-二聚体(简称D-D)试验是辅助诊断或排除血栓性疾病的重要指标,又是指导溶栓药物剂量应用的关键数据。1:DIC(休克,系统感染,外伤,先兆子痫,恶性疾病和烧伤等)的并发症:血液在全身微小血管内广泛性凝固,形成以血小板和纤维蛋白为主要成分的微血栓。此过程消耗了大量的血小板和凝血因子,并通过激活途径激
D二聚体升高就一定是血栓形成吗?
血浆D二聚体测定是了解继发性纤维蛋白溶解功能的一个试验。 检查原理:抗D-D单克隆抗体包被于胶乳颗粒上,受体血浆中如果存在D-二聚体,将产生抗原-抗体反应,乳胶颗粒发生聚集现象。但是,凡有血块形成的出血,本试验均可呈阳性,故其特异性低,敏感度高。 D-二聚体在体内的来源有两个
pcr扩出目的片段及引物二聚体,哪出了问题
只要目的片段位置正确 无需去管引物及其二聚体的,结果可靠。究竟是不是引物二聚体 你从理论上就可以分析判断。一般常见情况是引物加过量了,在溴酚蓝位置常见亮带,在这中情况下,你不需要理他,若需要漂亮图片(发论文),2办法:可以减少引物加入量,同时稍微降低镁离子浓度;或者在保证底物不缺乏情况下,增加几个循
如何确定引物二聚体和扩增产物的Tm值
最近在做qPCR,今天遇到个样品的浓度很低,想看看能不能做出样品10倍梯度稀释的曲线,于是照常做了。结果最后的溶解曲线发现,头三个的Tm是84,之后的5个样品时77。从Ct值来看,也是头三个还有点像样,后面的Ct都是33-34.很显然后面的5个应该不是扩增产物,应该是奈不住寂寞的引物二聚体之类的非目
血液的化学检验项目血浆D二聚体测定介绍
血浆D-二聚体测定介绍: 血浆D-二聚体测定是对人体血浆中的血浆D-二聚体进行含量测定,被检血浆中加入标记D-二聚体单抗的胶乳颗粒悬液,根据被检血浆的稀释度可计算出血浆D-二聚体的含量。血浆D-二聚体测定正常值: 血浆D-二聚体含量小于0.5mg/L。血浆D-二聚体测定临床意义: 异常结果:在
凝血常规检查项目介绍血浆D二聚体测定
血浆D-二聚体测定介绍: 血浆D-二聚体测定是对人体血浆中的血浆D-二聚体进行含量测定,被检血浆中加入标记D-二聚体单抗的胶乳颗粒悬液,根据被检血浆的稀释度可计算出血浆D-二聚体的含量。血浆D-二聚体测定正常值: 血浆D-二聚体含量小于0.5mg/L。血浆D-二聚体测定临床意义: 异常结果:在DIC
关于D—二聚体不能不知的几件事!
D-二聚体是近几年来市面上关注度较高的检查项目之一,是大家所熟知的反映血栓形成与溶栓活性最重要的实验室指标。下面我们先来说说它的临床应用:1、静脉血栓栓塞(VTE)的血浆D-二聚体水平明显升高。但很多疾病或病理过程(如心血管疾病、手术、肿瘤、感染与组织坏死等)都对止血有一定的影响,导致D-二聚体升高
DDimer(D二聚体)检测的临床意义
D-二聚体>0.5 mg/L作为诊断DIC的标准,其阳性率为96%,特异性在97%。反应体内凝血酶和纤溶活性时,以D-二聚体最为理想,较血小板、凝血酶原时间及纤维蛋白原含量具有更高的诊断价值。当D-二聚体