反相高效液相层析的基本概念
中文名称反相高效液相层析英文名称reversed-phase high-performance liquid chromatography;RP-HPLC定 义固定相颗粒表面为非极性材料(如含C18链),流动相为极性的一种高效层析。通过这类反相层析柱的分子按其极性大小移动,极性越大移动越快。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文
快速蛋白质液相层析的基本概念
中文名称快速蛋白质液相层析英文名称fast protein liquid chromatography;FPLC定 义以高流率代替高效液相层析高压力的一种改良的中压(< 5 MPa)液相层析技术。具有快速、容量大和分辨率高的特点。可使用多种层析介质,多用于蛋白质的分离,也可以用于其他物质的分离。应
快速蛋白质液相层析的基本概念
中文名称快速蛋白质液相层析英文名称fast protein liquid chromatography;FPLC定 义以高流率代替高效液相层析高压力的一种改良的中压(< 5 MPa)液相层析技术。具有快速、容量大和分辨率高的特点。可使用多种层析介质,多用于蛋白质的分离,也可以用于其他物质的分离。应
高效液相层析的操作注意事项
1).流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。3). 所有过柱子的液体均需严格的过滤。4). 压力不能太大,最好不要超过150kgf/cm2 .5). 因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱,
关于高效液相层析的适应范围介绍
气相色谱法与高效液相色谱法的比较:气相色谱法虽具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子
高效液相层析的基本定义和特点
高效液相层析(又名高压液相色谱),70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达3.5万KPa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而
高效液相层析的分离系统相关介绍
该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管),内径为2~5mm,由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(
关于高效液相层析法的基本介绍
高效液相层析法(HPLC)是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上,引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。由于HPLC分离能力强、测定灵敏度高,可在室温下进行,应用范围极广,无论是极性还是非极性,小分子还是大分子,热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。对蛋
简述高效液相层析的操作注意要点
1)首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。 2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3)正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直
液固层析的基本概念
中文名称液固层析英文名称liquid-solid chromatography;LSC定 义固定相为固体,流动相为液体的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
纸层析和柱层析薄层层析高效液相层析各有什么特点
纸层析:英文为thin layer chromatography 又称薄层色谱,色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术,属固—液吸附色谱,兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又
反相高效液相色谱柱的原理及使用维护
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能
反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定
反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中,选择正确的缓冲液PH值,对可离解的化合物分析的重现性十分重要,不恰当的PH值可能导致不对称峰,宽峰,分裂峰或肩峰,而尖锐的,对称的峰是定量分析中获得低的检测限以,两次分析之间较低的相对标准偏差(RSD)和保留时间的高重现性的前提。我
关于高效液相层析的注意事项介绍
1)流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。 2)柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。 3)所有过柱子的液体均需严格的过滤。 4)压力不能太大,最好不要超过150kgf/cm2 . 5)因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱
关于高效液相层析法的主要类型介绍
⑴ 液-固吸附层析:固定相是具有吸附活性的吸附剂,常用的有硅胶、氧化铝、高分子有机酸或聚酰胺凝胶等。液-固吸附层析中的流动相依其所起的作用不同,分为 “底剂”和洗脱剂两类,底剂起决定基本色谱的分离作用,洗脱剂起调节试样组份的滞留时间长短,并对试样中某几个组份具有选择性作用。流动相中底剂与洗脱剂成
关于高效液相层析的基本信息介绍
高效液相层析(又名高压液相色谱),70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达3.5万KPa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填
关于高效液相层析法使用仪器的介绍
典型的高效液相层析仪包括输液系统、层析柱与检测系统三部分。流动相用一高压泵输入。这种高压泵应满足以下条件: ①流量恒定,无脉动,并有较大的调节范围。 ②能抗溶剂腐蚀。 ③有较高的输出压力,一般要达到15~300kg/c,也有的高达800kg/c。 ④泵的死体积要小。梯度洗脱装置必须具备两
高效液相层析的主要类型及其分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间
高效液相层析的主要类型及其分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间
反相高效液相色谱的固定相是什么,流动相有什么
反相高效液相色谱的固定相是非极性溶剂,常见的固定相是十八烷基键合硅胶,流动相是极性溶剂,常见的流动相是甲醇,乙腈。反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶,
反相高效液相色谱柱使用维护注意事项
作为基于极性流动相和非极性固定相所组成的液相色谱体系,反相高效液相色谱柱是通过表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,根据一般有机分子的结构中具有非极性的疏水部分,同时疏水部分越大,一般保留值越高的性质,反相高效液相色谱柱进行相应的工作。 为尽可能减少日常中不正确色谱操作对反向液相色谱柱的损
反相高效液相色谱柱的保护要怎么做
反相高效液相色谱柱的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。 选择合适的色谱柱可以缩短方法开发时间,并使开发的方
何谓反相液相色谱
液-液色谱有正相和反相之分。如果采用极性固定相和相对非极性流动相,就称为正相;如果采用相对非极性固定相和极性流动相,则称为反相。由于极性化合物更容易被极性固定相所保留,所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物。相反,反相液-液色谱系统一般可用于分离非极性或弱极性化合物。正相色谱的流出顺序是极性
高效液相层析法的主要类型及其分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间
反相高效液相色谱柱可在任意pH值均可实现高效分离
在建立方法时,改变流动相的pH值是一个非常有效的工具,尤其在分离一些中性胺类化合物或者在碱性条件下分离其他的有机碱类化合物。 尽管近年来有宣称硅胶基C18色谱柱在碱性pH条件下能够稳定工作,但是所有的硅胶基C18色谱柱在pH>6是测量性能均有所下降,相比在理想条件下使用,色谱柱的使用寿命也显著缩短。
高效液相层析技术的主要类型及其分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间
液相层析的定义
中文名称液相层析英文名称liquid chromatography;LC定 义以液体作为流动相的一种层析法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
反相高效液相色谱柱是一种怎样的色谱模式
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能
高效液相和超高效液相的区别
超高效液相系统耐压更高,可以以更高的流速进行分析,并且在高流速下仍能保持很好的理论塔板数。高效指的就是效率更高,即在同样的时间内可以分析更多的样品。高效液相色谱是相对经典液相色谱来说的,高效液相色谱具有更细的流动相传输管路,内径更细的色谱柱,从而使死体积变小,理论塔板数更高,分析时间更短。超高效就是
反相层析的应用特点
在吸附层析中,高极性物质在层析柱上吸附较牢,洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析。用HP
反相层析的相关介绍
在吸附层析中,高极性物质在层析柱上吸附较牢,洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析。用