TH糖蛋白的提取步骤

取正常人尿液20升,加入等量蒸馏水稀释。放固体氯化钠于尿液内,使其浓度达。0.58mol/L,充分混匀后于4℃静置48小时,此时,可见白色絮状沉淀物形成。弃去上清液,将沉淀物低温(4℃)离心(3000r/min,30分钟)将离心后的沉淀物用0.58mol/L的氯化钠溶液反复洗3次,然后,溶于一定量的蒸馏水中,对水,置4℃透析3~5天,每日换水4-5次,以彻底清除残留的氯化钠,最终获得无色透明的粒性液体,即为THP。分装,冻干,低温保存备用。将提取的THP,按照蛋白质鉴定方法,进行生物学和免疫学纯度的鉴定。主要包括分子量测定,氨基酸组成分析,抗原与相应抗体的特异性免疫电泳等。经上述检验证实,所提取的THP完全符合要求。......阅读全文

TH糖蛋白的提取步骤

取正常人尿液20升,加入等量蒸馏水稀释。放固体氯化钠于尿液内,使其浓度达。0.58mol/L,充分混匀后于4℃静置48小时,此时,可见白色絮状沉淀物形成。弃去上清液,将沉淀物低温(4℃)离心(3000r/min,30分钟)将离心后的沉淀物用0.58mol/L的氯化钠溶液反复洗3次,然后,溶于一定量的

简述TH糖蛋白的提取步骤

  取正常人尿液20升,加入等量蒸馏水稀释。放固体氯化钠于尿液内,使其浓度达。0.58mol/L,充分混匀后于4℃静置48小时,此时,可见白色絮状沉淀物形成。弃去上清液,将沉淀物低温(4℃)离心(3000r/min,30分钟)将离心后的沉淀物用0.58mol/L的氯化钠溶液反复洗3次,然后,溶于一定

TH糖蛋白的基本信息

中文名T-H糖蛋白外文名Tamm Horsfall proteinELISA方法29.78~43.94mg/24h·mg Cr随意尿7.42~8.74mg/mg Cr测定方法酶联免疫吸附法或放射免疫法。大    小7000KDa分泌细胞肾小管上皮细胞

TH糖蛋白的临床意义

尿THP排出减少见于肾实质病变如慢性肾衰竭及急性肾小球肾炎等导致肾单位大量减少,GFR显著降低时,而单纯下尿路炎症时尿THP水平无变化。尿液THP含量增加见于各种原因如间质性肾炎、尿路长期梗阻、自身免疫性药物中毒、铜和铬中毒等疾病引起的肾脏损伤,并与病情相一致。尿道结石患者体外震波碎石治疗效果判断:

TH糖蛋白的抗体制备过程

将人尿THP作为抗原,免疫新西兰白兔制备抗人THP抗体。方法:每只兔每次用抗原量lmg,与等量完全Ferund佐剂混合,皮下、肌肉多点注射,每2周加强免疫1次,共3次。所得抗血清先经盐沉淀法粗提,后经离子交换层析法纯化。一纯化的抗血清,经双向免疫扩散法鉴定,结果显示与相应抗原呈高度特异性结合呈现一条

概述TH糖蛋白的临床意义

  尿THP排出减少见于肾实质病变如慢性肾衰竭及急性肾小球肾炎等导致肾单位大量减少,GFR显著降低时,而单纯下尿路炎症时尿THP水平无变化。尿液THP含量增加见于各种原因如间质性肾炎、尿路长期梗阻、自身免疫性药物中毒、铜和铬中毒等疾病引起的肾脏损伤,并与病情相一致。尿道结石患者体外震波碎石治疗效果判

关于TH糖蛋白的抗体制备介绍

  将人尿THP作为抗原,免疫新西兰白兔制备抗人THP抗体。方法:每只兔每次用抗原量lmg,与等量完全Ferund佐剂混合,皮下、肌肉多点注射,每2周加强免疫1次,共3次。所得抗血清先经盐沉淀法粗提,后经离子交换层析法纯化。一纯化的抗血清,经双向免疫扩散法鉴定,结果显示与相应抗原呈高度特异性结合呈现

关于TH糖蛋白的基本信息介绍

  T-H糖蛋白是由肾小管髓袢升支及远端小管曲部的上皮细胞合成分泌的糖蛋白。正常情况下,尿液中含有少量的THP。T-H糖蛋白的分子量约为7000KDa,由一些分子量为80KDa的亚单位组成。正常成人24h尿排出量,但肾脏疾病的患者排出量会有异常,已有研究发现T-H糖蛋白排出量与肾脏疾病有一定的相关性

提取核酸的步骤

一、DNA的分离利用核蛋白溶于水和高盐溶液,但不溶于生理盐溶液的性质进行分离。流程:破细胞→浓盐溶液提取→生理盐溶液沉淀→苯酚变性除蛋白→水相DNA用冷乙醇沉淀。

茶多酚的提取步骤

茶多酚提取:在茶叶中提取茶多酚的工艺主要有以下的几种方法:1. 传统工艺:以水或乙醇为溶剂,采用水浴加热至80℃ 保温提取多次。合并提取液后用等体积的氯仿萃取,分出氯仿相后改用乙酸乙酯多次萃取,将乙酸乙酯大部回收后浓缩近干,冷冻干燥后用去离子水反复重结晶即得精品。但该法的缺点是操作费时麻烦、溶剂消耗

提取核酸的步骤

一、DNA的分离利用核蛋白溶于水和高盐溶液,但不溶于生理盐溶液的性质进行分离。流程:破细胞→浓盐溶液提取→生理盐溶液沉淀→苯酚变性除蛋白→水相DNA用冷乙醇沉淀。

香菇多糖的提取步骤

香菇多糖属于极性大分子化合物,其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为:增加多糖溶解度有利于提高其生理活性;中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖;可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液,避免在强酸、碱溶液中进行,否则极易造成多糖中糖苷键断裂

提取质粒的主要步骤

质粒抽提方法即去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒。提取质粒DNA的方法有很多种,从提取产量上分可分为微量提取、中量提取、大量提取,从使用仪器上分可分为一般提取和试剂盒方法提取,从具体操作方法分可以分为碱裂解法、煮沸法、牙签法等,各种不同的方法各有

简述提取核酸的步骤

一、DNA的分离利用核蛋白溶于水和高盐溶液,但不溶于生理盐溶液的性质进行分离。流程:破细胞→浓盐溶液提取→生理盐溶液沉淀→苯酚变性除蛋白→水相DNA用冷乙醇沉淀。

叶绿素提取的实验步骤

叶绿素的提取▲ 将新鲜菠菜(Spinacia)叶片洗净擦干,去叶柄及叶脉。称取样品 8g,剪碎置研钵内,加入 8cm3丙酮及少许固体碳酸钠,迅速研磨成匀浆;然后再加入 20cm3丙酮充分研磨。▲ 在一玻璃漏斗底部垫一小团脱脂棉,将匀浆通过脱脂棉过滤至已装有 20cm3石油醚的分液漏斗中,再用少量的丙

核酸提取的主要步骤

提取纯化核酸总的来说分为四大步骤:样品的前处理、细胞破碎、除去与核酸结合的蛋 白质及多糖脂等杂质、核酸的沉淀浓缩,除去其他杂质核酸,获得均一的样品。1.样品准备新鲜的动植物组织材料,经清洗去掉非组织材料杂质。少量样品可用液氮冻结,然后快速碾磨成粉末状。动物细胞培养物有的需用胰酶消化,再离心沉淀,必要

dna提取实验步骤

利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液。在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M。加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出。分别用66%,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品。此法提取的DNA中

质粒提取实验步骤

实验原理现在较常用的质粒提取方法有三种:碱裂解法、煮沸法和去污剂裂解法,前两种方法较为剧烈,适用于较小的质粒(<15Kb),而去污剂裂解法则比较温合,一般用于分子量较大的质粒(>15Kb)。碱裂解法是一种最广泛使用的制备质粒DNA的方法。其原理为:染色体DNA远大于质粒DNA,且染色体DNA为线状分

质粒提取的原理和步骤

本文章首先从溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ开始讲解:溶液I,50 mM葡萄糖/ 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA,pH 8.0;溶液II,0.2 M NaOH / 1% SDS;溶液III,3 M醋酸钾/ 2 M醋酸。溶液I的作用任何生物化学反应,首先要控制好溶液的pH,因此用适当浓度的

蛋白的裂解与提取步骤

这是偶整理的蛋白裂解和提取的protocol,希望对大家有所帮助。10ml 三去污裂解液配方如下:50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0): 0.07882g 150 mmol/L NaCl: 0.08775g0.2 g/L叠氮钠: 0.002g 1 g/LSDS 0.01g100 mg

TRIZOL提取RNA的详细步骤

1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞。2、将组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;在EP管中,

总RNA提取实验步骤

一、细胞或组织破碎 1.  微生物材料 (1)发酵3~4天(或对数生长期)的菌体,离心收集菌丝体(动植物材料无需此步处理)。 (2)用经DEPC处理的水洗菌丝体2~3次,并尽量除去残存的水。 (3)加液氮充分研磨,使其成为粉末,以释放RNA。 (4)研磨后的样品转移至12 ml 变性液的容器中匀浆。

质粒DNA提取实验步骤

质粒DNA提取可以:(1)快速纯化质粒;(2)用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。实验方法原理质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。  

RNA的提取方法步骤及原理

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成

RNA的提取方法步骤及原理

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成

索氏提取法的操作步骤

1、切片将滤纸切成8cm×8cm,叠成一边不封口的纸包,用硬铅笔编写顺序号,按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷却至室温。按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重(记作a),称量时室内相对湿度必须低于70%。2、包装和干燥在上述已称重的滤纸包中装

核酸提取仪的主要操作步骤

  1、首先我们要使用研磨仪这种超声破碎细胞的方法来破碎细胞,然后我们加入去污剂,我们用来除去膜脂。  2、然后我们来去除细胞内的蛋白质,其中还有和DNA结合的组蛋白,我们可以给里边加入蛋白酶等方法来去除。  3、然后我们接下来进行下一步,我们这时候要加入RNA这是一种酶,我们用它来去除RNA。  

RNA的提取方法步骤及原理

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成

碱变性法提取质粒的步骤

(1)取1.5毫升含质粒的大肠杆菌过夜培养物,加在微量离心管中,离心收集细胞沉淀;(2)加入100微升冰冷的溶液I,(50mM葡萄糖, 25mM Tris-HCl PH=8.0, 10mM EDTA)涡旋震荡悬浮菌液。(3)加入200微升新配制的溶液II,(0.2M NaOH,1.0%SDS)缓缓混

叶绿素的提取和分离实验步骤

提取:(1) 取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片(2g左右),洗净,擦干,去掉中脉剪碎,放入研。(2) 研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉,加2-3ml 95%乙醇,研磨至糊状,再加10-15ml 95%乙醇,离心35min,提取上清液过滤于三角瓶中,残渣用10ml 95%乙醇冲洗,一同过滤于三角瓶中。(