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蛋白质分离提纯方法

1、盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、与盐溶液一样具有脱水作用;其二、有机溶剂的介电常数比水小,导致溶剂的极性减小。3、蛋白质沉淀剂:蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用,常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。4、聚乙二醇沉淀作用:聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。......阅读全文

膜分离技术-浓缩提纯技术的广泛应用

  膜分离技术在浓缩提纯工艺上主要采用截留分子量在100~1000Dal的纳滤膜。纳滤膜的主要特点是对二价离子、功能性糖类、小分子色素、多肽等物质的截留性能高于98%,而对一些单价离子、小分子酸碱、醇等有30~50%的透过性能,常被应用于溶质的分级、溶液中低分子物质的洗脱和离子组分的调整、溶液体系的

化学方法分离和提纯物质的注意事项

①不引入新的杂质;②不能损耗或减少被提纯物质的质量;③实验操作要简便,不能繁杂。用化学方法除去溶液中的杂质时,要使被分离的物质或离子尽可能除净,需要加入过量的分离试剂,在多步分离过程中, 后加的试剂应能够把前面所加的无关物质或离子除去。

化学分离与提纯的常用方法都有哪些?

  分离提纯的原则   1.引入的试剂一般只跟杂质反应;   2.后续的试剂应除去过量的前加的试剂;   3.不能引进新物质;   4.杂质与试剂反应生成的物质易与被提纯物质分离;   5.过程简单,现象明显,纯度要高;   6.尽可能将杂质转化为所需物质;   7.除去多种杂质时要考

物理方法对混合物进行分离和提纯

运用物理方法分离和提纯物质常用的方法为: 分离提纯方法适用范围 主要仪器名称过滤 不溶性固体与液体的分离 烧杯、漏斗、滤纸、玻璃棒蒸发、浓缩、结晶、重结晶 已溶固体与液体的分离 蒸发皿、玻璃棒、酒精灯、烧杯蒸馏、分馏 沸点不同的互溶液体混和物的分离 蒸馏烧瓶、冷凝管、牛角管锥形瓶、温度计升华 固体与

无机物溶液常用的分离和提纯方法

对于无机物溶液常用下列方法分离和提纯:1、 生成沉淀法。例如NaCl 溶液里混有少量的MgCl2 杂质,可加入过量的NaOH 溶液,使Mg2+离子转化为Mg(OH)2 沉淀(但引入新的杂质OH–),过滤除去Mg(OH)2 ,然后加入适量盐酸,调节pH为中性。3、生成气体法。例如Na2SO4溶液中混有

分离和提纯蛋白质的基本原理

分离纯化蛋白质的方法及原理 (一)利用分子大小 1、透析:将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中进行 。原理:利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。 2、超过滤:利用压力和离心力,强行使其他小分子和水通过半透膜,而蛋白质留在膜上。3、凝胶过滤层析。原理

分离和提纯蛋白质的基本原理

分离纯化蛋白质的方法及原理 (一)利用分子大小 1、透析:将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中进行 。原理:利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。 2、超过滤:利用压力和离心力,强行使其他小分子和水通过半透膜,而蛋白质留在膜上。3、凝胶过滤层析。原理

分离和提纯蛋白质的基本原理

分离纯化蛋白质的方法及原理 (一)利用分子大小 1、透析:将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中进行 。原理:利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。 2、超过滤:利用压力和离心力,强行使其他小分子和水通过半透膜,而蛋白质留在膜上。3、凝胶过滤层析。原理

独创生物发酵提纯结合工业色谱分离的技术方法

  日前,由中国食品发酵工业研究院研发的P80型水苏糖获批国家重点新产品。该产品水苏糖含量(以干基计)达到80%以上;生物发酵后活性成分水苏糖损失率小于10%;工业色谱分离90%以上(占总糖)的水苏糖得率大于60%;水苏糖产品的食品安全要求符合低聚糖国家相关标准和要求,是目前水苏糖市场上纯度最高的水

IgG的分离与提纯:硫酸铵沉淀法

实验概要实验室中常用硫酸铵沉淀后过DEAE 纤维素柱,比较简便可获较纯的抗体。下面以此方法为例介绍IgG的分离与提纯。实验原理以抗原免疫动物来制备的抗血清是一个非常复杂的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特异性结合的抗体则主要是血清中的免疫球蛋白组分。通常用于制备酶标抗体或荧光抗体的免疫球蛋白必

免疫球蛋白提取技术:IgG的分离与提纯-2

⑴ 区带电泳:玻片琼脂或醋酸纤维膜电泳均可。加样电泳后,只在γ—球蛋白的迁移部位出现一条带。操作时,同时可用全血清样品,不同浓度 (NH4)2SO4盐析样品进行电泳,以资比较。⑵ 琼脂双相双扩散鉴定:预先准备该IgG免疫异种动物所获的抗IgG血清。将IgG与抗 IgG血清进行双相双扩散,如IgG提纯

IgG的分离与提纯:硫酸铵沉淀法

以抗原免疫动物来制备的抗血清是一个非常复杂的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特异性结合的抗体则主要是血清中的免疫球蛋白组分。通常用于制备酶标抗体或荧光抗体的免疫球蛋白必须高度纯化并具有特异性,不应含有非抗体的血清蛋白。因此,为了浓缩和提高抗体的效价,或为制备免疫球蛋白特异性抗体时,通常也需要分

IgG的分离与提纯:硫酸铵沉淀法

以抗原免疫动物来制备的抗血清是一个非常复杂的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特异性结合的抗体则主要是血清中的免疫球蛋白组分。通常用于制备酶标抗体或荧光抗体的免疫球蛋白必须高度纯化并具有特异性,不应含有非抗体的血清蛋白。因此,为了浓缩和提高抗体的效价,或为制备免疫球蛋白特异性抗体时,通常也需要分

免疫球蛋白提取技术:IgG的分离与提纯-1

免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数

IgG的分离与提纯:硫酸铵沉淀法

实验概要实验室中常用硫酸铵沉淀后过DEAE 纤维素柱,比较简便可获较纯的抗体。下面以此方法为例介绍IgG的分离与提纯。实验原理以抗原免疫动物来制备的抗血清是一个非常复杂的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特异性结合的抗体则主要是血清中的免疫球蛋白组分。通常用于制备酶标抗体或荧光抗体的免疫球蛋白必

IgG的分离与提纯实验_硫酸铵沉淀法

IgG的分离与提纯实验可以用于:制备酶标抗体或荧光抗体。实验方法原理硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离,是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子,从而破坏蛋白质表面的水化膜,降低其溶解度,使之从溶液中沉淀出

高温提纯法提纯石墨的方法介绍

石墨的熔点为3850℃±50℃,是自然界熔沸点最高的物质之一,远远高于杂质硅酸盐的沸点。利用它们的熔沸点差异,将石墨置于石墨化的石墨坩埚中,在一定的气氛下,利用特定的仪器设备加热到2700℃,即可使杂质气化从石墨中逸出,达到提纯的效果。该技术可以将石墨提纯到99.99%以上。高温法提纯石墨影响因素较

氧化还原反应法、转化法等在分离和提纯中的应用

氧化还原反应法如果混合物中混有还原性杂质,可加入适当的氧化剂使其被氧化为被提纯物质。如将氯水滴入混有FeCl2的FeCl3溶液中,以除去FeCl2杂质;同样如果混合物中混有氧化性杂质,可加入适当的还原剂使其被还原为被提纯物质。如将过量的铁粉加入混有FeCl3的FeCl2溶液中,以除去FeCl3杂质。

实验室常用的提纯与分离的概念区分以便正确使用

概念区分清洗:从液体中分离密度较大且不溶的固体,分离沙和水;过滤:从液体中分离不溶的固体,净化食用水;溶解和过滤:分离两种固体,一种能溶于某溶剂,另一种则不溶,分离盐和沙;离心分离法:从液体中分离不溶的固体,分离泥和水;结晶法:从溶液中分离已溶解的溶质,从海水中提取食盐;分液:分离两种不互溶的液体,

有机化合物的分离和提纯的目的和方法

分离和提纯的目的都是由混合物得到纯净物,但要求不同,处理方法也不同。分离是将混合物中的各个组分一一分开。在分离过程中常常将混合物中的某一组分通过化学反应转变成新的化合物,分离后还要将其还原为原来的化合物。提纯有三种情况,一是设法将杂质转化为所需的化合物,第二种情况是把杂质通过适当的化学反应转变为另外

台式低速冷冻离心机一次可分离提纯几克样品

台式低速冷冻离心机一次可分离提纯几克样品   台式低速冷冻离心机作为一种设备在行业具有多种用途。例如,超速离心可在低温下操作,保护了生物大分子的活性。制备型的台式低速冷冻离心机负载量大,一次可分离提纯几克样品,比层析、电泳上的样品量大得多。分析离心机不仅可测物质的分子量,还可检验物质的纯度、构象、沉

实验室中常用的化学分离与提纯的方法都有哪些?

提纯是指将混合物净化除去其杂质,得到混合物中的主体物质,提纯后的杂质不必考虑其化学成分和物理状态。混合物的分离方法有许多种,但根据其分离本质可分为两大类:1、化学分离法;2、物理法; 下面就混合物化学分离及提纯方法归纳如下:一、分离与提纯的原则1.引入的试剂一般只跟杂质反应;2.后续的试剂应除去过量

实验室中常用的化学分离与提纯的方法都有哪些?

提纯是指将混合物净化除去其杂质,得到混合物中的主体物质,提纯后的杂质不必考虑其化学成分和物理状态。混合物的分离方法有许多种,但根据其分离本质可分为两大类:1、化学分离法;2、物理法; 下面就混合物化学分离及提纯方法归纳如下:一、分离与提纯的原则1.引入的试剂一般只跟杂质反应;2.后续的试剂应除去过量

实验室中常用的化学分离与提纯的方法都有哪些?

  提纯是指将混合物净化除去其杂质,得到混合物中的主体物质,提纯后的杂质不必考虑其化学成分和物理状态。  混合物的分离方法有许多种,但根据其分离本质可分为两大类:  1、化学分离法;  2、物理法;  下面就混合物化学分离及提纯方法归纳如下:  一、分离与提纯的原则  1.引入的试剂一般只跟杂质反应

提纯蛋白的步骤

分离纯化蛋白质的原理与方法──凝胶色谱法(分子筛效应)凝胶是一些由多糖类化合物构成的多孔球体,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质直径小于凝胶网孔,由于静电吸附和扩散作用容易进入凝胶内部的通道,可以自由地进入凝胶颗粒的网孔,在向下移动的过程中,它们从凝胶颗粒的网孔扩散到凝胶

提纯蛋白的步骤

蛋白纯化方法很多,也很复杂,一般程序如下:分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。  前处理  分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去

重结晶提纯实验

实验方法原理意义:从有机合成反应分离出来的固体粗产物往往含有未反应的原料、副产物及杂质,必须加以分离纯化,重结晶是分离提纯纯固体化合物的一种重要的、常用的分离方法之一。适用范围:它适用于产品与杂质性质差别较大、产品中杂质含量小于5%的体系。原理:利用混合物中各组分在某种溶剂中溶解度不同或在同一溶剂中

重结晶提纯实验

实验方法原理 意义:从有机合成反应分离出来的固体粗产物往往含有未反应的原料、副产物及杂质,必须加以分离纯化,重结晶是分离提纯纯固体化合物的一种重要的、常用的分离方法之一。适用范围:它适用于产品与杂质性质差别较大、产品中杂质含量小于5 %的体系。原理:利用混合物中各组分在某种溶剂中溶解度不同或在同一溶

提纯蛋白的步骤

蛋白纯化方法很多,也很复杂,一般程序如下:分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。  前处理  分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去

提纯蛋白的步骤

蛋白纯化方法很多,也很复杂,一般程序如下:分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。  前处理  分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去