细胞融合技术电融合法
在直流电脉冲的诱导下,细胞膜表面的氧化还原电位发生改变,使异种细胞粘合并发生质膜瞬间破裂,进而质膜开始连接,直到闭和成完整的膜,形成融合体。优点:融合率高、重复性强、对细胞伤害小;装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。......阅读全文
细胞融合技术自发融合
同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合。
细胞融合技术诱发融合
异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。
什么是细胞电融合?
当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电融合,又叫电穿孔。
细胞融合技术的相关概述
人工细胞融合一般都采用化学和物理因素的诱导技术。如目前化学诱导常用促融合剂聚乙二醇(PEG);物理诱导采用电融合。为了改善和提高细胞融合的有效性,植物和微生物细胞的融合必须先除去细胞壁,使其成为原生质体。因此,对于植物和微生物来讲,细胞融合常被称为原生质体融合。细胞融合技术是在20世纪60年代建
电穿孔技术的方法步骤
除了能使细胞膜具有通透性,让外界的分子扩散入胞液中以外,高强度的电场脉冲也能引起细胞融合,这一现象叫做电融合。然而,在用电脉冲融合前必须使细胞相互紧密接触,这一电融合方法在原生质融合制取杂交植物,胚胎细胞相互融合制备动物克隆方面非常有用,尤其在制取杂交瘤细胞制备单克隆抗体方面用处很大。几个实验室已证
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Insti
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
细胞融合的方法、过程和影响因素
由于对新生物资源需要、淋巴细胞杂交瘤和单克隆抗体的制备,以及寻求远缘物种间的遗传物质交换的新途径,细胞融合技术现在已经成为生命科学里最热的话题之一,那么,细胞融合的方法就是细胞融合的关键。细胞融合的概念 细胞融合(cell fusion):又称somatic hybridization or c
原生质体融合的化学试剂一般用什么
基础是膜的流动性病毒诱导融合 在植物细胞融合中不使用. 聚乙二醇诱导融合 聚乙二醇是化学试剂,使用起来很方便,诱导细胞融合的频率比较高,但是它有一定毒性,对某些细胞(如卵细胞)不适用. 电场诱导融合 电融合技术有许多优点,如诱导细胞融合的频率高,对细胞无毒害作用,操作简便,可重复性好.
细胞融合技术的实验操作
人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融合细
细胞融合技术的前期发现
人们很早就注意到了在自然条件下发生的细胞融合现象,首先在病料组织中发现了由细胞融合产生的多核细胞,紧接着发现在脊椎动物和无脊椎动物的正常细胞中也可发生细胞融合,随后在体外组织培养中也发现了离体细胞的融合现象。自从发现活病毒可在体内介导癌细胞融合后,人们又实现了利用灭活病毒促进动物异种细胞融合,从而打
细胞融合技术的应用价值
细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物,具有准确,高效,简易,快速等优点。
细胞融合技术的成功案例
生物种类细胞来源甘蓝—青菜叶—根大豆—马唐草愈伤组织—叶矮牵牛—龙面花叶—花瓣大麦—花生种子—种子大麦—大豆叶—悬浮细胞小麦—矮牵牛叶—花瓣油菜—大豆叶—悬浮细胞玉米—大豆叶—悬浮细胞大豆—野豌豆悬浮细胞—悬浮细胞大麦—蚕豆叶—根大豆—香草木犀悬浮细胞—叶酵母菌—鸡原生质体—血红细胞大豆—烟草悬浮细
细胞融合技术的应用价值
细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物,具有准确,高效,简易,快速等优点。
细胞融合技术的应用价值
细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物,具有准确,高效,简易,快速等优点。
细胞融合技术的发展历程
19世纪30年代,科学家们相继在肺结核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞。19世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象,但是当时科学发展水平的限制,没有给予足够重视。1962年,日本科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。1965年,英国科学家进
细胞融合实验——聚乙二醇法
实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus),聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和电脉冲。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结构重
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
诱导动物细胞融合的方法
为什么灭活的仙台病毒能作细胞融合的诱导剂? 问题的提出 在新冠肺炎疫情下,科研人员加紧在研究新冠病毒(SARS-CoV-2),不断有新的研究成果产生,如要彻底了解该病毒的结构和侵染机理,还需要一段时间,甚至可能要较长的时间。要知道,人类与病毒的斗争看不到尽头,仅仅是认识第一个病毒-烟草花叶病
植物体细胞杂交的研究与发展
1960年,Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;1970年,Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合;1971年,Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种,这也是
关于原生质体融合的历史进展介绍
1960年,Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功; 1970年,Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合; 1971年,Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株; 1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的
原生质体融合的发展与研究
1960年,Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;1970年,Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合;1971年,Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种,这也是
细胞融合技术的临床意义
⒈理论上说任何细胞,都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源。这对于种质资源的开发和利用具有深远的意义。⒉融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制,为远缘物种间的遗传物质交换提供了有效途径。⒊体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统,在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体DN
细胞融合技术的融合方法介绍
同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。仙台病毒法融合①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0
单克隆抗体技术:细胞融合
实验概要本文介绍了单克隆抗体技术——细胞融合实验的操作流程。实验原理细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳
单克隆抗体技术:细胞融合
实验概要本文介绍了单克隆抗体技术——细胞融合实验的操作流程。实验原理细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳
单克隆抗体技术:细胞融合
融合剂 细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂,对热稳定,与
单克隆抗体技术:细胞融合
实验概要本文介绍了单克隆抗体技术——细胞融合实验的操作流程。实验原理细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳
细胞融合技术的发展和研究
19世纪30年代,科学家们相继在肺结核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞。19世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象,但是当时科学发展水平的限制,没有给予足够重视。1962年,日本科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。1965年,英国科学家进