关于等电点的应用介绍

1、蛋白质的沉淀 同种蛋白质在水溶液中带有同种电荷,互相排斥,且蛋白质表面能形成水化膜,这就使得蛋白质溶液(实际上是胶体)十分稳定。要想破坏其稳定性让其沉淀则需要从这两方面入手,也就是除去水化膜和表面电荷。 比如,可以先将蛋白质的pH调整至等电点,这时的蛋白质分子呈等电状态,虽不很稳定,但还有水膜的保护作用,一般不致沉淀,如果这时加入脱水剂除去蛋白质分子的水膜,则蛋白质分子互相凝聚、沉淀析出。先脱水,后调节pH到等电点,也同样可使蛋白质沉淀。 利用蛋白质的沉淀这一性质可以分离制备氨基酸 2、蛋白质的电泳 当蛋白质不处于等电点状态时其总是带有一定电荷的,可以利用此特性使其电泳。还可以通过调节电泳液的pH来控制蛋白质的电泳方向和速度。 3、陶瓷材料 在材料科学里在许多水处理过程中使用金属氧化物的等电点。这些物质在水里一般认为其表面覆盖了一层表面氢氧基。pH值高于等电点时其表面主要覆盖的是M-O,在pH值低于等电点时......阅读全文

等电点聚焦分离蛋白质实验

实验方法原理 等电点聚集(IEF) 分离可以通过 CE 轻易地达到,这也是选择随后用于蛋白质分离的缓冲液系统的有效的第一步。蛋白质和多肽是两性的,因此它们的电荷由周围的载体缓冲液决定。当蛋白质或多肽处于电场中,它移动到一个区域,这里周围的 pH 等于其等电点(pI)。在包被的毛细管柱内可

等电点聚焦分离蛋白质实验

等电点聚焦             实验方法原理 等电点聚集(IEF) 分离可以通过 CE 轻易地达到,这也是选择随后用于蛋白质分离的缓冲液系统的有效的第一步。蛋白质和多肽是两性

聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测蛋白质的等电点2

四、固定、,染色和脱色将凝胶板放在培养皿中,加入固定液,浸泡数小时后,用脱色液清洗两次,每次10min, 然后加入染色液,室温下放置15-30min,再用脱色液洗脱数次,直至谱带清晰,放入保存液中浸泡10min,可制干板。五、制作干胶板1. 取完全浸湿的平整玻璃纸一张,于玻璃板上铺平,纸与板之间不可

聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测蛋白质的等电点1

实验原理所有的氨基酸均为两性物质,即它们至少含有一個羧基(carboxyl)及一個氨基(α-amino)。這些可游离的基团随着pH变化可以三种形式存在,即正电荷(cation)、两性离子(zwitterion)及负电荷(anion)等三种,在酸性溶液中带正电荷,在碱性溶液中带负电荷。若氨基酸在某一p

酪蛋白的制备实验_等电点沉淀法

实验方法原理牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调到4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。实验材料牛乳试剂、试剂盒乙醇 无水乙醚 醋酸 醋酸钠 乙醇 乙醚仪

简述蛋白质等电点的计算方法

  蛋白质等电点,找出所有可解离基团,并注明它们各自的pKa→假定它们在极低的pH下都处于非解离状态→逐步提高溶液的pH→可解离基团按照pKa从低到高的顺序依次释放出质子,即pKa越低的就越先释放出质子→写出所以可能的解离形式→找出净电荷为0的形式→将净电荷为0形式两侧的pKa相加除于2 。

生物样品分离技术等电点沉淀法

利用蛋白质在等电点时溶解度最低,用酸、碱调节pH值,可使蛋白质沉淀析出,但这时沉淀不完全,可与有机溶剂沉淀法、盐析法联合使用。

血红蛋白电泳_等电点差异法

实验方法原理据不同的血红蛋白带有不同的电荷,等电点不同,在一定的pH缓冲液中,血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷,电泳时在电场中向阳极泳动,反之,Hb带正电荷向阴极泳动。在一定电压下,经过一定时间的电泳,不同的血红蛋白所带电荷不同,分子量不同,其泳动方向和速度不同,可分离出各自的区带,同时对

关于等电聚焦水平板电泳法的操作介绍

  (1)等电聚焦水平板电泳法— 制胶 取A液2.5ml,pH3~10的两性电解质(或其它pH范围的两性电解质)0.35ml,水1.25ml,50%甘油0.5ml,抽气5~10分钟,加B液25μl,N,N,N’,N’-四甲基乙二胺6μl,混匀后缓慢的注入水平模具内,室温下聚合。  (2)等电聚焦水平

关于眼震电图仪的应用介绍

  耳鼻喉科对于眩晕症的治疗,针对不同的病人比较多样化,但首先要明确眩晕症病因。美国视频眼震电图仪是国内诊断眩晕症最先进的检查设备,该检仪器通过高速摄像仪摄取眼动的视频影像,将其传输给计算机进行处理,根据处理结果查明导致眩晕发病的损伤部位、损伤的程度、侧别,并进行定位、定性、量化分析,帮助医生进行下

聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点

一、目的:学习聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点的原理及方法。二、原理:等电点聚焦(isoelectric focusing, IEF)或简称电聚焦(electrofocusing),也曾称等电点分离聚焦电泳等。它是60年代中期出现的技术,克服了一般电泳易扩散的缺点。近年来,等电点聚

蛋白质等电点的测定和沉淀实验结果

1,在等电点附近,蛋白质溶液开始变浑浊,离心可见沉淀2,远离等电点,蛋白质溶液开始变澄清,离心未见沉淀

牛血清白蛋白BSA的等电点是多少

天然牛血清白蛋白(BSA)的等电点为4.6~5.8,经无水乙二胺(EDA)和碳化二亚胺(EDC)反应,改性后的BSA等电点为8.6。

关于耐震电接点压力表的检定方法等介绍

  电接点压力表的检定方法  1.压力表的电器部分与外壳之间的绝缘电阻在环境温度15~35℃,相对湿度不大于80%时,应不小于20MΩ(工作电压500VDC)。  2.将压力表安装在校验器上,用拨针器将两个信号接触指针分别拨到上限及下限以外,然后进行示值检定。  3.示值检定项目和检定方法:  示值

关于多克隆位点的应用介绍

  多克隆位点,是指载体上含有的一个人工合成的DNA片段,其上含有多个单一酶切位点,是外源DNA的插入部位,具备条件:是载体中的一段碱基序列,由数个酶切位点组成,这些位点在载体上都是单一位点。  多克隆位点(multiple cloning site, MCS),是包含多个(最多20个)限制性酶切位

关于视觉电生理检查的临床应用—视网膜电图(ERG)的介绍

  视网膜电图(ERG):引起视网膜电流图异常的主要病症:高眼压与青光眼、视网膜中央动脉阻塞、视网膜脱离、眼外伤、视神经炎、视神经外伤、视神经萎缩、糖尿病性视网膜病变、视网膜血管性病变、累及视网膜各层及脉络膜的各种病变,包括炎症、变性、肿瘤、外伤及眼内金属异物的中毒等。

关于包涵体的形成和蛋白质在等电点或者高盐情况下的沉淀介绍

  包涵体的形成和蛋白质在等电点或者高盐情况下的沉淀是不同的。在沉淀过程中,分子是通过分子表面的相互作用而形成的分子的聚集,无论在聚集的沉淀状态还是在天然状态,没有明显的构象的变化。因此,当溶液中的pH重新改变,或者沉淀重新溶解的时候,蛋白质的结构和活性会重新获得。蛋白质的包涵体形式的聚集则不同于蛋

蛋白质两性性质及等电点的测定

实验原理蛋白质是两性电解质。蛋白质分子中可以解离的基团除N端α―氨基与C端α―羧基外,还有肽链上某些氨基酸残基的侧链基团,如酚基、巯基、胍基、咪唑基等基团,它们都能解离为带电基团。因此,在蛋白质溶液中存在着下列平衡: 阳离子两性离子阴离子 pH < pIpH = pIpH > p

蛋白质的分离实验——IEF(等电点聚焦电泳)法

实验方法原理凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为“脱盐”(desalthing)。脱盐常用透析法和凝胶过滤法,这两种方法各有利弊。前者的优点是透析后析品终体积较小,但所需时间较长,且盐不易除尽;凝胶过滤法则能将盐除尽,

细管等电聚电泳的相关介绍

  由于不同的蛋白、多肽的等电点(PI)不同,因此在具有不同pH 梯度的电泳槽中,其可在等电点pH 条件下聚集沉淀下来,而与其他肽类分离开来。CIEF 在分离、分析混合多肽物质中应用不多,主要应用与不同来源的多肽异构体之间的分离,如对rHG 不同异构体分离。由于在CIEF 柱表面覆盖物的不稳定性限制

氨基酸酸碱两性解离与等电点

  氨基酸在水溶液或结晶内基本上均以兼性离子或偶极离子的形式存在。所谓两性离子是指在同一个氨基酸分子上带有能释放出质子的NH3+缬氨酸离子和能接受质子的COO-负离子,因此氨基酸是两性电解质。  氨基酸的等电点:氨基酸的带电状况取决于所处环境的pH值,改变pH值可以使氨基酸带正电荷或负电荷,也可使它

关于等电聚焦水平板电泳法的仪器和制剂介绍

  1、等电聚焦水平板电泳法的仪器装置: 恒压或恒流电源、带有冷却装置的水平电泳槽和制胶模具。  2、等电聚焦水平板电泳法的试剂:  (1)水 (电阻率应不低于18MΩ·cm)  (2)A液 称取丙烯酰胺5.0g,亚甲基双丙烯酰胺0.15g,加适量水溶解,并稀释至50ml,双层滤纸滤过,避光保存。 

电性合金的应用介绍

电性合金包括精密电阻合金、电热合金、热电偶材料和电触头材料等,广泛用于电工器件、仪器、仪表制造领域。

关于视觉电生理检查的临床应用—图形VEP的介绍

  图形VEP包括图形视觉诱发电位(patternVEP,PVEP)和闪光视觉诱发电位(flashVEP,FVEP)。PVEP记录的是图形刺激(棋盘格或光栅)所诱发的从神经节细胞至视皮层的生理电位,常用的刺激图形为黑白翻转的棋盘格图案,主要观察P100波。FVEP记录的是闪光刺激(常用白色闪光)所诱

毛细管等电聚焦的定义和应用特点

中文名称毛细管等电聚焦英文名称capillary isoelectric focusing;CIEF定  义在毛细管内进行的等电聚焦。毛细管内壁经涂层处理使电渗流减到最小,再将样品和两性电解质混合进样,两个电极槽中分别为酸和碱,加高电压后,在毛细管内产生pH梯度,样品的各成分在毛细管中迁移至各自的等

关于等电聚焦水平板电泳法的固色和染色介绍

  (1)等电聚焦水平板电泳法的试剂:  a、固定液 20%三氯醋酸  b、染色液(i)染色储备液 称取1.0gG-250,溶于20ml水中,为溶液1;称取125g(NH4)2SO4,溶于400ml水中,为溶液2;称取20g H3PO4,为溶液3;将溶液3加入到溶液1中,待G-250完全溶解后 ,与

固相pH梯度等电聚焦实验——等电聚焦

试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液实验步骤打开循环水浴,设置冷却温度,一般为 10℃。将制好的固相 pH 梯度凝胶铺在冷却板上,注意正负极。其间涂以液体石蜡或煤油,避免气泡陷入,以保证胶板和冷却板之间的良好接触。用合适的电极溶液(参见表 7.7) 润湿滤纸电极条,分别放置凝胶的酸、碱侧。有的仪

蛋白质的两性解离和等电点测定实验结果

在等电点附近,蛋白质溶液开始变浑浊,离心可见沉淀。远离等电点,蛋白质溶液开始变澄清,离心未见沉淀。当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。在等电点时蛋白质的溶解度最小,在电场中不移动。在pI时,蛋白质失去了胶体的稳定

等-电-聚-焦

等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上,电聚焦的优点是:有很高的分辨率,可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开;一般电泳由于受扩散作用的

等-电-聚-焦

 等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上,电聚焦的优点是:有很高的分辨率,可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开;一般电泳由于受扩散作用