微载体在生物反应器进行细胞规模扩培中的应用
微载体是用于基于生物反应器的进行细胞生产中微型载体颗粒。麻省理工学院研究与技术联盟 (SMART) 的研究人员近期开发了一种用于大规模细胞生产和扩增的新型微载体，与传统方法相比，该微载体具有更高的产量和成本效益，并减少了所需的步骤在细胞检索过程中。SMART 新开发的基于明胶的可溶性微载体已被证明可用于间充质基质细胞 (MSC) 的扩增，这是一种当前备受关注的细胞类型，因为它们可以从成人组织中分离出来，并进一步扩展以治疗各种疾病，例如骨骼和软骨缺损和身体排斥外来骨髓和细胞（称为移植物抗宿主病）。微载体的这种溶解性还消除了从微载体中回收细胞的额外分离步骤。这降低了细胞生产扩增的复杂性，并增加了收获治疗细胞为患者制造产品的便利性。通过SMART 的CAMP学科研究小组 (IRG) 的关键分析发现，在酶处理中完全溶解的明胶微载体可用于细胞恢复步骤——这是 3D 微载体培养目前面临的瓶颈之一。与商业微载体相比，新型明胶微载体在细胞收获步......阅读全文
在质粒载体中进行平末端片段的克隆
在质粒载体中进行平末端片段的克隆1．分别设立两个反应，用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段，使它们能产生平末端。2．苯酚：氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3．分别用TE（pH 8.0）重新溶解纯化出的两种DNA沉淀，使终浓度为100 ng/ml
慢病毒大规模生产面临的挑战
慢病毒作为基因载体在治疗各类遗传性和后天性的人类疾病中倍受欢迎。从基础研究发展到临床阶段，高浓度纯化的载体需求量越来越大，相应的方法也层出不穷。目前大多数慢病毒的生产是在方瓶、平皿等体系中加入胎牛血清贴壁培养HEK293细胞系（293T和293E），通过多质粒瞬时转染包装得到病毒，但是该方法难以
在质粒载体中进行定向克隆实验
大多数常用质粒都含有可被不同内切酶识别的多克隆位点。由于可供选择的克隆位点很多 [ 如 Invitrogen 公司的 PSE280 质粒的克隆位点有 46 个之多，而且还可以设计含有更多克隆位点的多聚接头（Brosius 1992 ) ]，因此一般来说总是能够找到一个带有与某一特定外源 DNA 片段
在质粒载体中进行定向克隆实验
在质粒载体中进行定向克隆实验 实验方法原理 大多数常用质粒都含有可被不同内切酶识别的多克隆位点。由于可供选择的克隆位点很多 [ 如 Invitrogen 公司
在质粒载体中进行定向克隆实验
实验方法原理 大多数常用质粒都含有可被不同内切酶识别的多克隆位点。由于可供选择的克隆位点很多 [ 如 Invitrogen 公司的 PSE280 质粒的克隆位点有 46 个之多，而且还可以设计含有更多克隆位点的多聚接头（Brosius 1992 ) ]，因此一般来说总是能够找到一个带有与某一
分泌蛋白在细胞中的哪个部位进行加工
分泌蛋白在内质网上的核糖体上合成，后进入内质网进行加工，后出芽运送到高尔基体进入高尔基体进行修饰加工，后高尔基体出囊泡，囊泡和细胞膜融合，分泌岛细胞外。 整个过程参与的细胞器有核糖体，内质网，囊泡，高尔基体，细胞膜。组成生物体的蛋白质大多数是在细胞质中的核糖体上合成的，各种蛋白质合成之后要分别运送到
悬浮细胞培养技术在兽用疫苗领域的应用
细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术，是当前国际上生物制品生产的主流模式，其最大优势是通过更为精确有效的工艺控制手段，在获得最大产量的同时能稳步提高产品的质量。但该技术目前在国内尚未得到广泛应用，生物制品生产仍主要采用病毒产率低、生产成本高、劳动强度大的转瓶细胞培养方
生物反应器在废水处理中的潜质应用
水资源短缺是全球面临的一项难题，将废水处理后回用可以有效缓解水资源的供需矛盾。在现有的各类废水处理技术中，好氧生物处理技术因其发展较为成熟而占据了很大的优势，但其存在能耗高、污泥产量高以及资源回收率低等缺点。而传统厌氧处理需满足下列条件：（1）生物反应器必须被加热到中温（30——40 ℃）或高温（5
生物反应器在废水处理中的潜质应用
水资源短缺是全球面临的一项难题，将废水处理后回用可以有效缓解水资源的供需矛盾。在现有的各类废水处理技术中，好氧生物处理技术因其发展较为成熟而占据了很大的优势，但其存在能耗高、污泥产量高以及资源回收率低等缺点。而传统厌氧处理需满足下列条件：（1）生物反应器必须被加热到中温（30——40 ℃）或高温（5
非损伤微测技术及其在细胞生物学研究中的应用
非损伤微测技术及其在细胞生物学研究中的应用——（1）技术简介作者：旭月（北京）科技有限公司 美国扬格非损伤技术中心联系人：宋瑾，jin@youngerusa.com，010-82622628（电话），010-82622629（传真） 摘要：非损伤微测技术是一种选择性微电极技术，可以不损伤样品而获得进
微流控技术在化学发光中的应用
化学发光是目前IVD各家企业争夺的焦点，但是大部分企业都是从事基于中心实验室的管式发光技术配合机械臂实现全自动检测。而微流控技术近些年在产业界的应用如火如荼，能否利用微流控技术实现化学发光的lab on a chip？ 化学发光免疫分析是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结
微滤和超滤在制糖业中的应用
微滤和超滤截留的微粒子不形成滤饼，仍以溶质的形式保留在滤余液中。分离的性能决定于膜上微孔的尺寸和形状。 微滤膜常为均匀的多孔膜，孔道曲折，通常直接用测得的平均孔径来表示其截留特性。它的孔径分布较广，由0.02～10μm，膜厚50～250μm。超滤膜由表面活性层和支撑层两层组成，表面活性层很薄
固相微萃取技术在药物检测中的应用
固相微萃取技术在药物分析和药物检测上发展迅速,正逐渐成为生理、病理、毒理学上不可缺少的一个检测手段。如在人体体液中抗组胺类化合物的分析,以及应用在血液和尿液中杜冷丁含量的检测,尿液中一些生物碱以及尿液中二氯苯异构体的检测,血液中氰化物、血清中甾类、酚嗪类和苯酚类化合物的检测,体液中有机磷农药以及
微载体培养的原理
微载体培养技术（micro-carrierculturetechnique）于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展，该技术日趋完善和成熟，广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。 微载体是指直径60-250μm，能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚
微载体的基本介绍
自Van Wezel用DEAE-Sephadex A 50 研制的第一种微载体问世以来，国际市场上出售的微载体商品的类型已经达十几种以上，包括液体微载体、大孔明胶微载体、聚苯乙烯微载体、PHEMA微载体、甲壳质微载体、聚氨酯泡沫微载体、藻酸盐凝胶微载体以及磁性微载体等。常用商品化微载体有三种：Cyt
在质粒载体中进行平末端片段的克隆实验
克隆平末端的目的片段时，为最大量地获得“正确”的连接产物，载体和目的 DNA 在连接反应中的比例必须适当。每一重组体中外源 DNA 的连接方向和插入数量都必须用限制酶酶切图谱分析或其他方法加以鉴定。作为一般规律，如果连接反应中质粒和目的 DNA 摩尔数相等，而且 DNA 的总浓度少于 100 μg/
在质粒载体中进行平末端片段的克隆实验
在质粒载体中进行平末端片段的克隆实验 实验方法原理 克隆平末端的目的片段时，为最大量地获得“正确”的连接产物，载体和目的 DNA 在连接反应中的比例必须适当。
在质粒载体中进行平末端片段的克隆实验
实验方法原理 克隆平末端的目的片段时，为最大量地获得“正确”的连接产物，载体和目的 DNA 在连接反应中的比例必须适当。每一重组体中外源 DNA 的连接方向和插入数量都必须用限制酶酶切图谱分析或其他方法加以鉴定。作为一般规律，如果连接反应中质粒和目的 DNA 摩尔数相等，而且 DNA 的
什么是微载体？
是指直径在60-250μm，能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。
scaleX生物反应器系统在慢病毒和腺病毒载体生产中...1
我们之前在Pall iCELLis®固定床生物反应器中，以小规模和商品化规模，进行了病毒载体（慢病毒、腺病毒以及腺相关病毒）的生产。最近，一家名为Univercells的比利时公司推出了一种新型固定床生物反应器，其具有相同的细胞生长表面基质材料，但固定床结构与iCELLis生物反应器所使用的结构
膜生物反应器在环境工程中的应用与发展
膜生物反应器(MBR)是以酶、微生物或动、植物细胞为催化剂，进行化学反应或生物转化，同时凭借超滤分离膜不断地分离出反应产物并截留催化剂而进行反应的装置，是由传统活性污泥工艺与膜分离技术结合的一种新型工艺。它zui早使用于生物化工行业中的连续发酵工艺。自从美国的Smith于1969 年创造性地把MBR
MBR膜生物反应器在污水处理中的应用
探索不同生物处理工艺与膜分离单元的组合形式_「反应处理工艺从活性污泥法扩展到接触氧化法、生物膜法、活性污泥与生物膜相结合的复合式工艺、两相厌氧工艺等。 ②影响处理效果与膜污染的因素、机理及数学模型的研究。其目的是探求合适的操作条件与工艺参数。尽可能减轻膜污染，提高膜组件的处理能力和运行稳定胜。 扩大
DMSO在细胞冻存中的应用
二甲基亚砜是一种重要的渗透型细胞保护剂。在深低温（零下200度）保存细胞时冻存过程中，为防止细胞内液冰晶形成、渗透压改变、细胞结构紊乱等导致的损伤，有必要使用含有DMSO冷冻保护剂。DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，降低冰点、延缓冻存过程，同时提高细胞内离子浓度，减少细胞内冰晶的形成，从而减少细
RNAi在细胞培养中的应用
The protocols listed here are for Drosophila cells in 6 well plates and our pre-aliquoted 384 well plates. RNAi experiments may be done in other size
如何将病毒载体生产从塑料器皿向固定床生物反应器转变
早期到晚期临床开发中的基因和修饰细胞治疗（例如，嵌合抗原受体[CAR] T-细胞治疗）在多种疾病的治疗以及潜在治愈方面显示出了良好的前景。这类新一代药物中的多个产品已经获得了审批并开始进入市场。尽管有大量候选药物的管线开始进入临床试验阶段，但其仍面临着可能的生产瓶颈 – 病毒载体生产 – 其可能延迟
非损伤微测技术在细胞生物学研究中的应用——生殖健康...
非损伤微测技术在细胞生物学研究中的应用——生殖健康方面应用作者：旭月（北京）科技有限公司 美国扬格非损伤技术中心摘要：本文介绍了非损伤微测技术在生殖健康研究领域的应用。关键词：非损伤微测技术，生殖健康近年来，环境中的生殖毒性物质对人类生殖健康的危害突显出来，严重地影响了人口素质，促使生殖健康方面的研
非损伤微测技术在细胞生物学研究中的应用——新陈代谢...
非损伤微测技术在细胞生物学研究中的应用——新陈代谢方面应用非损伤微测技术在细胞生物学研究中的应用——（4）新陈代谢方面应用作者：旭月（北京）科技有限公司 美国扬格非损伤技术中心联系人：宋瑾，jin@youngerusa.com，010-82622628（电话），010-82622629（传真）摘要：
微载体细胞计数的难题与解决方案
细胞和病毒生产的放大培养面临挑战。当需要生产量增加千倍时，细胞培养瓶对于工业规模生产是不可行的。微载体为生物反应器中贴壁细胞的生长提供了方便， 微载体充当贴壁细胞可附着的支架，允许它们增殖，而生物反应器使细胞-微载体复合体自由悬浮在培养基中。因此，贴壁细胞也可以像悬浮细胞那样生长，从而简化了放大培养
微流控分析芯片在细胞中的检测应用
微流控分析芯片是通过微加工技术将微管道、微泵、微阀、微储液器、微电极、微检测元件、窗口和连接器等功能元器件，像集成电路一样集成在芯片材料上的微全分析系统。微流控分析技术已经成为重要的化学及生物分析手段，其分析的优越性( 材料及试剂的低耗、原位分析、快速实时等) 在细胞、分子水平检测得以应用和展
搅拌式生物反应器系统的功能特点
搅拌式生物反应器系统在微载体细胞大规模扩增研究领域已有较长的研究历史，但因该细胞培养系统容易产生过大的剪切力，从而限制了其应用范围。尽管如此，由于该系统具有简单、实用及价格低廉等特点，国内外仍有不少应用该系统成功进行细胞大规模扩增的研究报道。例如，Werner A（2000年）成功地在该系统内进行了