DNA疫苗的制备方法和特点
DNA疫苗 又称基因疫苗或核酸疫苗，将能编码引起保护性免疫应答的病原体免疫原基因片段和质粒重组，重组体直接注入宿主机体，使体内持续表达该抗原，进而诱导出保护性体液免疫和细胞免疫的新型疫苗.这种核酸既是载体，又能在真核细胞中表达抗原，刺激机体产生特异而有效的免疫反应。优点：免疫效果好，可激发机体全面免疫应答，免疫力持久，制备简单成本低廉，便于储存运输,既能联合免疫，又具预防和免疫治疗双重功能。缺点：安全性需进一步研究证实。......阅读全文
酵母DNA的小量制备
实验方法原理 通过消化细胞壁，然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割，也可用作 PCR 的模板。实验材料 酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒 异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液T
λ噬菌体DNA的制备
实验概要本实验介绍了λ噬菌体DNA的制备、操作步骤和注意事项。实验原理λ噬菌体是最早使用的克隆载体，λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子，它在宿主细胞有两种生活途径：其一是裂解生长，环状DNA 分子在细胞内多次复制，合成大量噬菌体基因产物，装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌再进行下一次
“DNA探针”的制备过程
基因组DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。要得到一种特异性DNA探针,常常是比较烦琐的。以细菌为例,细菌的基因组大小约为5×106碱基,约含3000个基因。要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法,即将细菌DNA切成小片段后(如用限制性内切酶做不完全水解)分别
重组载体疫苗的制备过程
重组载体疫苗 将编码某一蛋白抗原的基因转入减毒的病毒或细菌而制成的疫苗.
关于水痘疫苗的制备介绍
水痘疫苗由水痘-带状疱疹减毒活病毒Oka株组成。水痘病毒疫苗经冻干并在再组成时，0.5毫升疫苗含有Oka水痘-带状疱疹病毒超过1350个空斑形成单位。每0.5毫升剂量还含有12.5毫克水解明胶、微量新霉素和牛胎血清、25毫克蔗糖以及MRC-5细胞的微量残留成份（包括脱氧核糖核酸和蛋白）。该疫苗不
灭活疫苗的作用特点和功能优势
灭活疫苗（inactivated vaccine）与减毒活疫苗相比灭活疫苗采用的是非复制性抗原（死疫苗），因此，其安全性好，但免疫原性也变弱，往往必须加强免疫。需要注意的是，并不是所有病原体经灭活后均可以成为高效疫苗：其中一些疫苗是高效的，如索尔克注射用脊髓灰质炎疫苗（IPV）或甲肝疫苗；其它则是一
合成肽疫苗的结构特点和应用原理
合成肽疫苗分子是由多个B细胞抗原表位和T细胞抗原表位共同组成的，大多需与一个载体骨架分子相耦联。合成肽疫苗的研究最早始于口蹄疫病毒（FMDV）合成肽疫苗，主要集中在FMDV 的单独B细胞抗原表位（VPI 环）或与T 细胞抗原表位结合而制备的合成肽疫苗研究。虽然取得了一定的进展，但仍未获得一种具有理想
类毒素疫苗的作用特点和功能优势
当疾病的病理变化主要是由于强力外毒素或肠毒素引起时，类毒素疫苗具有很大的意义，如破伤风和白喉的疫苗。一般来说，肠毒素的类毒素很少成功。然而肠毒素型大肠杆菌的热稳定性肠毒素（LT）经遗传改造的去毒变构体，有希望成为有效的旅行者腹泻疫苗。霍乱毒素（CT）对应的突变可能成为更为重要的疫苗。这两种毒素的变异
减毒活疫苗的作用特点和功能优势
减毒活疫苗（live‐attenuated vaccine）这一类的病毒疫苗多具有超过90%的效力，其保护作用通常延续多年。它的突出优势是病原体在宿主复制产生一个抗原刺激，抗原数量、性质和位置均与天然感染相似，所以免疫原性一般很强，甚至不需要加强免疫。这种突出的优势同时也存在潜在的危险性：在免疫力差
高地辛标记的DNA探针制备实验——基本方法
实验材料DNA试剂、试剂盒dTTPdUTPEDTASDS仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤1. 建立一个标准100 μl 反应体系，用10 μl，10×地高辛·11-dUTP/dTTP贮液，DNA酶Ⅰ酶量不变，15℃温育2 h。2. 取小份在微型胶中进行电泳以检测探针大小。3. 继续反应直到获得大
DNA测序技术预电泳的注意和样品的制备
[注意] （1）. 用鲨鱼齿梳制作加样孔时，应注意将齿尖插入胶中0.5mm左右，千万注意不能使加样孔渗漏，否则得不到正确的结果。 （2）. 应时刻注意上面电泳槽中的缓冲液是否渗漏，否则极易造成短路而损坏电泳仪。 样品的制备 当在预电泳时，即可进行样品的制备，将反应完毕的样品在沸水浴中加热
外植体的来源和制备方法
制备原生质体的供体材料来源于植物的各类组织、器官、细胞或是由之建立的细胞无性系。其中使用最多的是各种植物的叶片、愈伤组织和悬浮培养细胞，次之是根尖、茎尖和子叶。所用植物材料的生理状态(如光照时间、光强、光质、温度、湿度、营养等)对原生质体的产量和存活具有 显著影响。即使是由生长在相同条件下的外植体如
平板的制备和储存方法
倾注融化的培养基到平皿中，使之在平皿中形成厚度至少为3 mm（直径90 mm的平皿，通常要加入18 mL～20 mL琼脂培养基）。将平皿盖好皿盖后放到水平平面使琼脂冷却凝固。如果平板需储存，或者培养时间超过48 h或培养温度高于40 ℃，则需要倾注更多的培养基。凝固后的培养基应立即使用或存放于
制备色谱柱常见材质和特点
制备色谱是指采用色谱技术制备纯物质，即分离、收集一种或多种色谱纯物质。制备色谱中的“制备”这一概念指获得足够量的单一化合物，以满足研究和其它用途。制备色谱的出现，使色谱技术与经济利益建立了。制备量大小和成本高低是制备色谱的两个重要指标。制备色谱的目的，是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高
DNA疫苗的基本特征
DNA疫苗不同于传统的疫苗，DNA疫苗旨在将病原微生物的某种专门组分的裸露DNA编码直接注入机体内。尽管此类疫苗尚未面世，但其在技术上的飞速发展有可能开创免疫学的新纪元。正在研制的此类疫苗包括疟疾、流感、轮状病毒、HⅣ等。该疫苗既具有减毒疫苗的优点。同时又无逆转的危险，因此越来越受到人们的重视，被看
关于DNA疫苗的特征介绍
DNA疫苗不同于传统的疫苗，DNA疫苗旨在将病原微生物的某种专门组分的裸露DNA编码直接注入机体内。尽管此类疫苗尚未面世，但其在技术上的飞速发展有可能开创免疫学的新纪元。正在研制的此类疫苗包括疟疾、流感、轮状病毒、HⅣ等。 该疫苗既具有减毒疫苗的优点。同时又无逆转的危险，因此越来越受到人们的重
DNA疫苗的主要接种途径
直接肌肉注射注射的DNA在肌肉细胞中以环型分子存在，不能复制，并不能整合到宿主细胞染色体中。肌肉细胞中特有的横管系统与细胞外空间有直接交通，因而可能介导质粒 DNA的内吞作用。而且横纹肌中溶酶体和DNA酶的含量较低，可能也是质粒DNA能在细胞中存在较长时间的原因。微离子轰击介导的DNA免疫即基因枪。
关于DNA疫苗的基本介绍
DNA疫苗被称为继完整病原体疫苗和基因工程重组蛋白疫苗之后的第3代疫苗，即将插入并表达目的抗原基因之质粒DNA经各种转移途径转入机体细胞，借用宿主细胞的表达加工合成抗原分子。1992年，Tang 等首先经鼠皮肤直接接种编码外源蛋白的质粒DNA，发现这种免疫方式也能使机体产生抗体应答，证实“裸”D
关于DNA疫苗的优点介绍
①DNA接种载体（如质粒）的结构简单，提纯质粒DNA的工艺简便，因而生产成本较低，且适于大批量生产； ②DNA分子克隆比较容易，使得DNA疫苗能根据需要随时进行更新； ③DNA分子很稳定，可制成DNA疫苗冻干苗，使用时在盐溶液中可恢复原有活性，因而便于运输和保存； ④比传统疫苗安全，虽然D
DNA疫苗的主要应用缺陷
DNA疫苗尚未得到广泛的应用，除了因为它是一种新事物，不大为人所了解之外，它本身的安全问题则是人们对它 的最大顾虑。DNA疫苗存在的问题如下：外源DNA进入机体后是否整合到宿主基因组，导致癌基因激活或抑癌基因失活。疫苗DNA长期在体内表达是否会诱导机体产生免疫耐受，长远来说，导致机体免疫功能低下。疫
siRNA表达载体制备方法的特点
多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶Ⅲ启动子（pol Ⅲ）中的一种，操纵一段小的发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol Ⅲ启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表
制备超微粉体各种干燥方法的特点
在制备超微粉体过程中，常用的干燥方法有：常温干燥、热风干燥、红外线干燥、真空干燥。 常温干燥是指在常温下自然干燥，该方法操作简单，价格低廉，但是干燥时间长，易受环境气氛的影响，不宜在工业生产中应用。 热风干燥指在室温以上温度的热风中进行干燥，该方法干燥速度快，可持续处理大量物品，但是需要进行粉碎，功
酵母DNA微量制备
实验概要本实验介绍了分别从40ml和5ml酵母培养液中制备酵母DNA的操作流程。实验步骤1. 酵母DNA微量制备(40ml) 1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。 2) 将上述培养物移入螺盖离心管，用医用离心机或Sorvall SS-
可食用的疫苗的作用特点和功能优势
此类疫苗的载体是采用可食用的植物如马铃薯、香蕉、番茄的细胞，通过食用其果实或其它成分而启动保护性免疫反应。植物细胞作为天然生物胶囊可将抗原有效递送到粘膜下淋巴系统。这是目前为数不多的有效启动粘膜免疫的形式。因此，对于粘膜感染性疾病有很好的发展前景。
哺乳动物中制备基因组DNA实验——制备DNA
在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提而实现的。实验材料动物组织试剂、
DNA测序原理和方法
DNA测序原理和方法DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括Sanger双脱氧链终止法和Maxam-Gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。美国PE ABI公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA测序仪，其中310型是临床检测实
抗独特型疫苗的结构和功能特点
中文名称抗独特型疫苗英文名称anti-idiotype vaccine定 义一种新型疫苗。即以抗病原体的中和抗体为免疫原，制备针对该中和抗体独特型表位的抗体(即抗独特型抗体)。接种此疫苗可进一步激发机体产生针对该病原体的体液免疫应答，从而预防感染。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），
狂犬病疫苗的特点和应用说明
【不良反应】局部反应:少数有注射部位疼痛、红肿、硬结、搔痒，甚至水肿、淋巴结肿大。 全身反应:精制VERO细胞狂犬病疫苗和精制地鼠肾细胞疫苗，因疫苗经纯化，杂质白极少，所以接种副反应罕见或轻微。【禁忌】治疗性接种：由于狂犬病是致命性疾病，为挽救生命任何禁忌症都是次要的，故被患狂犬病的动物咬后预防无禁
微卫星DNA的结构和分布特点
微卫星DNA，重复单位序列最短，只有1～6bp，串联成簇，长度50～100bp，又称为短串联重复序列（Short Tandem Repeat STR)。广泛分布于基因组中。 其中富含A-T碱基对，是在研究DNA多态性标记过程中发现的。1981年Miesfeld等首次发现微卫星DNA，其重复单位长度一
共价闭和环状DNA的结构特点
中文名称共价闭和环状DNA英文名称covalently closed circular DNA;cccDNA定 义两条多核苷酸链是完全连续的环状双链DNA分子。由于链上没有裂隙可以释放内部张力，所以可以形成超螺旋结构。天然状态下某些病毒、细菌的染色体DNA，质粒、线粒体和叶绿体的DNA具有这种结构