复制n次,同时含有两种引物的DNA分子所占比例是多少?

复制n次,同时含有两种引物的DNA分子所占比例是2n-2。......阅读全文

分子克隆技术(质粒DNA和DNA插入片段的制备、连接反应...1

克隆(Clone)是指通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。分子克隆(Molecular Cloning)是指由一个祖先分子复制生成的和祖先分子完全相同的分子群,发生在基因水平上的分子克隆称基因克隆(DNA克隆)。其基本原理是:将编码某一多肽或蛋白质的基因(外源基因)组装到细菌质粒(

PCR基因扩增原理

基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每1

PCR技术导论、实验条件和试验程序(1)

1 导论多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是美国 Perkin-Elmer/Cetus公司人类遗传研究室Mullis K. B.等人于1985年发明的一种快速体外DNA片段扩增技术,是八十年代分子生物学资源领域的一项革命性突破,被誉为分子生物学资源

研究揭示植物质体DNA复制中切除RNA引物的关键核酸酶及作用机制

近日,中国科学院分子植物科学卓越创新中心巫永睿团队与张余团队,联合上海师范大学王文琴团队,发现了植物质体DNA(ptDNA)复制体中RNA引物切除的核心核酸酶组分plastid-localized and Mn2+-dependent 5′-3′exonuclease 1(PEN1)。长期以来,植物

PCR基因扩增仪的原理和程序

  PCR技术即基因扩增技术。     PCR基因扩增仪扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片

基因扩增技术原理和过程

PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与DNA

基因扩增技术的原理

PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与DNA

配置PCR反应混合液为什么混合配置再分装

原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与DNA单链的结合。引物与

概述DNA的复制型的内容

  在未受照射的细菌中,复制位点(replicating site)或生长点开始于DNA分子的起始点,并且复制点围绕环形分子半保留地发生复制。照射后,合饼应用溴尿嘧啶标记和氯化铯梯度离心的方法观察到复制型与正常不同。在此方法中,用3H一胸腺嘧啶预先标记大肠杆菌几个世代。预先标记的细胞或受照射或不受照

DNA的滚环复制的介绍

  在以这种机制进行的复制中,亲代双链DNA的一条链在DNA复制起点处被切开,其5'端游离出来。这样,DNA聚合酶Ⅲ便可以将脱氧核糖核苷酸聚合在3'-OH端。当复制向前进行时,亲代DNA上被切断的5'端继续游离下来,并且很快被单链结合蛋白所结合。因为5'端从环上向下解

差示分析法的基本方法

其基本方法如下。(1) 引物设计。R 12 5’2 GA TCTGCGGTGA 23’R 24 3’2 ACGCCACTCTCCGACCTCTCACGA 25’J 12 5’2 GA TCTGTTCA TG23’J 24 3’2 ACAA GTACCTA TCA GCTGCA GCCA 25’N 1

PCR疑难解答终点PCR及相关PCR反应的分类

       1.PCR的概念        PCR,即聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即模板DNA先经高温变性为单链,在DNA聚合酶和适宜的温度下,两条引物分别与两条模板DNA链上的一段互

pcr扩增至少要复制多少次才能得到一个DNA

3次,第一次合成一条链,第二次合成另一条链,第三次两个引物同时结合合出一个DNA分子 ,所以至少要三次才能得到一个DNA

DNA滚环复制的特点介绍

1、以亲本链(+链)为模板合成互补的环状负链,形成闭合环状的复制形RF1;2、以成环滚环复制产生多个子代RF;3、以RF的负链为模板进行滚环复制产生多拷贝正链单环。

简述DNA滚环复制的特点

  1、以亲本链(+链)为模板合成互补的环状负链,形成闭合环状的复制形RF1;  2、以成环滚环复制产生多个子代RF;  3、以RF的负链为模板进行滚环复制产生多拷贝正链单环。

DNA滚环复制的过程介绍

  环状DNA可以采取上述典型的DNA复制方式进行复制,即从复制起点开始,双向同时进行,形成θ样中间物,故又称"θ"型复制,最后两个复制方向相遇而终止复制。但有些环状DNA采用另个一种方式,即滚环复制。例如许多病毒DNA的复制、F因子在接合(conjugation)转移时其DNA的复制,以及许多基因

DNA-复制起点的概念和结构

中文名称DNA 复制起点英文名称DNA replication origin定  义DNA分子上的复制起始部位,为富含AT的序列,多呈十字形结构,是复制子的组成部分。DNA复制起点决定了复制的起始和起始频率。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

DNA的半不连续复制过程

在DNA复制过程中,双螺旋被解开,互补链被解旋酶分离,形成了所谓的DNA复制叉。在这个分叉之后,DNA引物酶和DNA聚合酶开始起作用,合成一个新的互补链。因为这些酶只能从5 '到3 '的方向工作,这两个解开的DNA模板链以不同的方式复制。其中,前导链的模板链具有5 '至3 &

DNA滚环复制的特点介绍

  1、以亲本链(+链)为模板合成互补的环状负链,形成闭合环状的复制形RF1;  2、以成环滚环复制产生多个子代RF;  3、以RF的负链为模板进行滚环复制产生多拷贝正链单环。

DNA复制中的错误相关介绍

  以DNA为模板按碱基配对进行DNA复制是一个严格而精确的事件,但也不是完全不发生错误的。碱基配对的错误频率约为10-1-10-2,在DNA复制酶的作用下碱基错误配对频率降到约10-5-10-6,复制过程中如有错误的核苷酸参入,DNA聚合酶还会暂停催化作用,以其3’-5’外切核酸酶的活性切除错误接

什么是DNA的半保留复制?

半保留复制(semiconservative replication)是DNA复制的模式。亲代DNA双链分离后的两条单链均可作为新链合成的模板,复制完成后的子代DNA分子的核苷酸序列均与亲代DNA分子相同,但子代DNA分子的双链一条来自亲代,另一条为新合成的链,故称为半保留复制。

DNA复制与PCR技术的异同

PCR技术单指体外大量复制目的基因(DNA片段)的现代生物技术,DNA先在90-95ºC解旋为单链,再在70-75ºC复性,最后在55-60ºC且在Taq酶(热稳定的DNA聚合酶)作用下合成长链DNA。

DNA半保留复制的发现过程

半保留复制阐述了在所有已知细胞中DNA复制的机制。半保留复制的名字来源于这样的事实,在复制产生的两个子代DNA拷贝中,每个拷贝的DNA双链包含一个来自亲代DNA的单链和一个新合成的DNA单链  。DNA的半保留复制假说最早由前苏联生物学家尼古拉·科尔佐夫(Nikolai Koltsov)于1927年

病毒-DNA-复制过程是怎样的?

病毒 DNA 复制过程因病毒种类而异,但通常包括以下几个主要步骤:吸附和侵入:病毒通过其表面的蛋白质与宿主细胞表面的受体结合,从而吸附到宿主细胞上。然后,病毒通过不同的方式将其遗传物质(DNA)注入或带入宿主细胞内。脱壳:病毒的蛋白质外壳被去除,释放出病毒的 DNA。合成早期 mRNA:利用宿主细胞

Nature:DNA复制过程的关键奥秘

  最近,沙特国王科技大学(King Abdullah University of Science and Technology,KAUST)的研究人员,揭开了DNA复制过程中的一个关键奥秘。相关研究结果发表在最近的国际顶级学术刊物《Nature》。  在一个细菌分裂之前,它必须通过一个称为DNA复

不需要RNA中间物的复制型转座

在不需要RNA中间物的复制型转座过程中,转座子一般由Y2一转座酶催化进行滚环复制。使用此途径进行复制的转座子有IS91和Helitron,转座过程一般有两种机制。一种机制的复制和插入分开进行,具体步骤如下:①转座酶切开转座子起点处的一条链,酶的Tyr—OH与切口的5‘—磷酸基以酯键连接,切口的另一侧

不需要RNA中间物的复制型转座介绍

  在不需要RNA中间物的复制型转座过程中,转座子一般由Y2一转座酶催化进行滚环复制。使用此途径进行复制的转座子有IS91和Helitron,转座过程一般有两种机制。一种机制的复制和插入分开进行,具体步骤如下:  ①转座酶切开转座子起点处的一条链,酶的Tyr—OH与切口的5‘—磷酸基以酯键连接,切口

PCR各处应用模式

 一、兼并引物(Degenerate primer)PCR密码子具有兼并性,如表22-4,单以氨基酸顺序推测编码的DNA序列是不精确的,但可以设计成对兼并引物,扩增所有编码已知顺序的核酸序列。用兼并引物时寡核苷酸中核苷酸序列可以改变,但核苷酸的数量应相同。兼并度越低,产物特异性越强,设计引物时应尽量

PCR技术

1 导论 多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是美国Perkin-Elmer/Cetus公司人类遗传研究室Mullis K. B.等人于1985年发明的一种快速体外DNA片段扩增技术,是八十年代分子生物学资源领域的一项革命性突破,被誉为分子生物学资源发展史上

关于半不连续复制的综述介绍

  问题的提出  DNA两条链反向平行,一条链走向为5‘→3‘,另一条链也为5‘→3‘,但与复制叉移动方向相反,但所有DNA聚合酶合成方向都是在引物3‘-OH上合成,使链从5‘→3‘延长,那么5‘→3‘链是如何同时作为模板复制呢?  1968年冈崎提出DNA不连续复制模型(P418图34-18),认