关于体细胞杂交的简介

体细胞是生物体除生殖细胞外的所有细胞。将从身体分离的体细胞做组织培养进行遗传学研究的学科称为体细胞遗传学(somaticgenetics)。体外培养细胞可人为控制或改变环境条件,并可建立细胞株,长期保存,进行各种正常和病理研究。与基因定位有关的是体细胞杂交(somaticcellhybridization)。细胞杂交又称细胞融合(cellfusion),是将来源不同的两种细胞融合成一个新细胞。大多数体细胞杂交是用人的细胞与小鼠、大鼠或仓鼠的体细胞(hybridcell)进行杂交。 细胞融合后,要进行异核体的筛选。所用方法是:①根据双亲细胞的形态特征,用不同荧光染料标记,人工挑选或用荧光激活细胞分拣机分离。或通过显微操作直接挑选。②在合适的选择压下,只允许杂种细胞生长,淘汰双亲和同源融合细胞。如生长激素自主选择、代谢互补选择、白化互补选择、营养缺陷型互补选择、药物抗性互补选择等。 融合后的杂种细胞的异核体,多数情况下在第一......阅读全文

体细胞杂交所需实验材料仪器介绍

1.实验材料:烟草或其它植物无菌苗的叶片。胡萝卜肉质根诱导的松软愈伤组织或悬浮培养细胞。2.试剂2.1酶液及洗涤液,同植物原生质体的分离和培养实验。2.2PEG溶液2.3高pH高钙稀释液2.4DPD培养基同植物原生质体的分离和培养实验。

辐射性杂交产生体细胞杂交的原理

利用高剂量的X射线将候选染色体打断成若干片段,含有这种片段的细胞可与仓鼠细胞形成杂交克隆。在这种杂交中,人类染色体片段被插入到仓鼠染色体的中间部分,因此大部分克隆片段在进行有丝分裂时处于稳定的状态。利用类似于遗传重组原理和最大似然性的统计学方法来计算存在于DNA片段上的多态性或非多态性标记之间的断点

植物体细胞杂交的研究与发展

1960年,Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;1970年,Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合;1971年,Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种,这也是

辐射性杂交产生体细胞杂交的应用

辐射性杂交技术是继荧光原位杂交后新近建立的染色体定位方法,RH作图法提供了一种联系物理图和遗传图的方法,已成为当今构建人类基因组大尺度、高密度、连续的染色体图的常用方法之一。其用途主要有:EST定位、基因克隆、基因组作图、测定距离、寻找新基因等。

辐射性杂交产生体细胞杂交的过程

G3嵌板的产生→确定STSs→PCR体系及反应条件→构建RH图谱.

植物体细胞杂交技术现在的应用

 植物体细胞杂交又称原生质体融合,就是将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。体细胞杂交在转移优良性状、改良作物、创造新型物种上显现了重要的应用前景。在农业上,科学家们利用这项技术,培育出了胡萝卜——羊角芹、白菜——甘蓝等种间或属间杂种,在生产具有较高的

植物体细胞杂交的融合方法介绍

1.PEG诱导融合法 PEG诱导融合的特点:其优点是融合成本低,勿需特殊设备;融合子产生的异核率较高;融合过程不受物种限制。其缺点是融合过程繁琐,PEG可能对细胞有毒害。 PEG的作用机理: Kao等认为,由于PEG分子具有轻微的负极性,故可以与具有正极性基团的水、蛋白质和碳水化合物等形成H键,

辐射性杂交产生体细胞杂交的优点

荧光原位杂交(FISH)法和辐射杂种细胞系(RH)技术是国际上最常用的基因定位的两种方法,各有优缺点。FISH可以定位基因组中多个同源位点,结果直观、可靠,而RH法则很困难。但是FISH法检测步骤繁杂,尤其受探针大小的影响较大,2kb以下的cDNA序列很难定位,而且结果需要有经验的细胞遗传学家进行分

辐射性杂交产生体细胞杂交的方法介绍

辐射性杂交(radiationhybridRH)制图技术是1975年由Goss和Harris创立的一种体细胞杂交技术,适用于构建人类基因组长范围内的高分辨率连续物理图谱。成熟的辐射性杂交制图技术是由CoxVR等人于1990年建立的。

影响植物体细胞杂交的因素有哪些?

首先,原生质体质量对细胞的融合起着至关重要的作用,高质量的原生质体是细胞融合的首要条件。其次,融合方法其三是融合参数,包括各种融合液都应选择适当。c.方法:物理方法(离心、振动、电激)、化学方法(聚乙二醇)d.杂种细胞的筛选和培养:机械法、生理法、遗传法e.杂种细胞的再生和鉴定:由愈伤组织再培养出杂

植物体细胞杂交的技术原理和特点

植物体细胞杂交(plant somatic hybridization),又称原生质体融合(Protoplast fusion )是指将植物不同种、属,甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合,然后进行离体培养,使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁,未脱壁的两个细胞是很难融合的,植物细胞只有在脱

体细胞杂交实验——单层全细胞融合实验

实验材料汇合至一定程度的受体细胞试剂、试剂盒受体细胞适合生存的培养基合适的选择性试剂含感兴趣染色体及合适遗传标记的供体细胞仪器、耗材10 cm 组织培养板25 cm 组织培养瓶倒置相差显微镜实验步骤基本方案 单层全细胞融合1.倘若不知道细胞的选择条件,通过以下方式来确定:将培养于 25 cm 培养瓶

关于强脊炎的简介

  强脊炎实际是一种很古老的疾病,早在几千年前从古埃及人的骨骼就发现有强直性脊柱炎的证据。距今2000年以前,希腊名医希波克拉底描述了一种疾病,患病者有骶骨、脊椎、颈椎部的疼痛。

关于粪胆素的简介

  粪便常规检查项目之一,常用于协助诊断阻塞性黄疸。游离胆红素经肝转化生成的葡萄醛酸胆红素随胆汁进入肠道,在回肠末端和结肠内细菌作用下,脱去葡萄醛酸,并还原生成胆素原(包括d-尿胆素原,中胆素原,粪胆素原)。粪胆素原氧化而成为粪胆素。

关于果胶的简介

  果胶是一类广泛存在于植物细胞壁的初生壁和细胞中间片层中的杂多糖,1824年法国药剂师Bracennot首次从胡萝卜提取得到,并将其命名为“pectin”。 果胶主要是一类以D-半乳糖醛酸(D-Galacturonic Acids,D-Gal-A)由 α-1,4-糖苷键连接组成的酸性杂多糖,除D-

关于登革热的简介

  登革热(dengue)是登革病毒经蚊媒传播引起的急性虫媒传染病。登革病毒感染后可导致隐性感染、登革热、登革出血热,登革出血热我国少见。典型的登革热临床表现为起病急骤,高热,头痛,肌肉、骨关节剧烈酸痛、部分患者出现皮疹、出血倾向、淋巴结肿大、白细胞计数减少、血小板减少等。本病主要在热带和亚热带地区

关于腺样囊性癌的简介

  腺样囊性癌又称圆柱瘤或圆柱瘤型腺癌。腺样囊性癌占涎腺肿瘤的5%~10%,在涎腺恶性肿瘤中占24%。好发于涎腺,以发生在腭腺者常见。大涎腺虽然较少,但为颌下腺和舌下腺好发的肿瘤。在腮腺肿瘤中仅占2%~3%。男女发病率无大差异,或女性稍多。最多见的年龄是40~60岁。

关于溶菌酶的简介

  溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase),是一种能水解细菌中黏多糖的碱性酶。溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多

关于胰液的简介

  胰液一般是指人体由胰腺外分泌部分泌的一种无色无臭的碱性溶液。胰液中的无机物主要是水和碳酸氢盐。胰液中的有机物是多种消化酶,可作用于糖、脂肪和蛋白质三种食物成分,因而是消化液中最重要的一种。胰淀粉酶能将淀粉分解为麦芽糖,胰麦芽糖酶可将麦芽糖分解成葡萄糖。胰脂肪酶能将中性脂肪分解成甘油和脂肪酸。

关于布鲁氏菌的简介

  布鲁氏菌病(brucellosis)又称地中海弛张热,马耳他热,波浪热或波状热,是由布鲁氏菌引起的人畜共患性全身传染病,其临床特点为长期发热、多汗、关节痛及肝脾肿大等。该病进入慢性期可能引发多器官和系统损害,详见布鲁氏菌病词条。  中国流行的主要是羊(Br.melitensis)、牛(Br.bo

关于组胺的简介

  组胺,是一种有机含氮化合物,是由组氨酸在脱羧酶的作用下产生的。许多组织,特别是皮肤、肺和肠黏膜的肥大细胞中含有大量的组胺。当组织受到损伤或发生炎症和过敏反应时,都可释放组胺。组胺有强烈的舒血管作用,并能使毛细血管和微静脉的管壁通透性增加,血浆漏入组织,导致局部组织水肿。

关于质谱仪的简介

  质谱仪以离子源、质量分析器和离子检测器为核心。离子源是使试样分子在高真空条件下离子化的装置。电离后的分子因接受了过多的能量会进一步碎裂成较小质量的多种碎片离子和中性粒子。它们在加速电场作用下获取具有相同能量的平均动能而进入质量分析器。质量分析器是将同时进入其中的不同质量的离子,按质荷比m/e大小

关于脑卒中的简介

  卒中(俗称“中风”)具有发病率高、致残率高、死亡率高和复发率高的“四高”特点,发病急、病情进展迅速、后果严重,全世界每4个人中就有1个人会发生卒中,每6秒钟就有1个人死于卒中,每6秒钟就有1个人因卒中而残疾,病患家庭将因此蒙受巨大的经济损失和身心痛苦。发生卒中后,每分钟大约有190万个脑细胞死亡

关于糖异生的简介

  糖异生(Gluconeogenesis gluco-指糖,neogenesis是希腊语 νεογ?ννηση,neojénnissi  -重新生成):又称为葡糖异生。由简单的非糖前体(乳酸、甘油、生糖氨基酸等)转变为糖(葡萄糖或糖原)的过程。糖异生不是糖酵解的简单逆转。虽然由丙酮酸开始的糖异生利

关于增稠剂的简介

  增稠剂是近年来迅速发展起来的一类新型功能高分子材料,主要用于提高产品的黏度或稠度,具有用量小、增稠明显、使用方便等特点,被广泛地应用于制药、印染、化妆品、食品添加剂、采油、造纸、皮革加工等行业中。  工业增稠剂起源于20世纪,1953年,Coodrich公司首先将第一种完全由人工合成的增稠剂——

关于菌落的简介

  菌落,亦称集落。一定种的单个菌体或孢子在一定的固体培养基上生长繁殖后形成的肉眼可见的微生物聚集体。  在培养基表面生长的菌落,叫表面菌落;在表面下生长的菌落,叫埋藏或深层菌落。不同的微生物形成的菌落有不同的特征,是鉴定菌种的重要标志。  各种微生物在一定条件下形成的菌落特征,如大小、形状、边缘、

关于氯丙嗪的简介

  氯丙嗪,别名3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基丙-1-胺,是吩噻嗪类代表药物,为中枢多巴胺受体的拮抗药,具有多种药理活性。  一、基本信息   中文名:氯丙嗪  英文名:Chlorpromazine  化学名称:3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基丙-1

关于雌酮的简介

  雌酮(E1)是一种甾体激素化合物,为天然内源性雌激素,可以从孕妇或孕马的妊娠尿中提取而得。检测雌酮常用仪器分析法,如气相色谱法、液相色谱法,这些方法精密准确、灵敏度高,但前处理复杂、测定时间较长、不适用于大批量样品的筛选。利用免疫学方法进行雌酮含量测定是一种极具发展前途和应用前景的新技术,且检测

关于尿囊素的简介

  尿囊素,别名N-(2,5-二氧代-4-咪唑啉啶基)尿素,分子式为C4H6N4O3,是一种乙内酰脲衍生物。尿囊素主要应用于医药、化妆品和农业三大领域。  化学名称:N-(2,5-二氧代-4-咪唑啉啶基)尿素  化学式:C4H6N4O3  分子量:158.115  CAS号:97-59-6  EIN

关于霉菌的简介

  霉菌是形成分枝菌丝的真菌的统称。不是分类学的名词,在分类上属于真菌门的各个亚门。构成霉菌体的基本单位称为菌丝,呈长管状,宽度2~10微米,可不断自前端生长并分枝。无隔或有隔,具1至多个细胞核。细胞壁分为三层:外层无定形的β葡聚糖(87nm);中层是糖蛋白,蛋白质网中间填充葡聚糖(49nm);内层