ELISA方法的基本原理

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定,这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来,使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。......阅读全文

western-和ELISA-处理样本有何差别

western blot和ELISA的基本原理是一样的,都是免疫结合反应的原理。差别主要是技术方法,免疫结合的模式,检测的目的等 western blot需要先电泳后转膜,然后免疫结合,虽然操作复杂但不需要很高级的仪器设备 ELISA没有这么复杂的操作,但是需要酶标仪这样比较贵的仪器 western

酶联免疫吸附试验基本原理

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。因此,可通过底物的颜色反应

酶联免疫吸附试验的原理

  ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种 酶标记抗体可与吸附在固相 载体上的抗原或抗体发生 特异性结合。滴加 底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现 颜色反应。因此,可通过

简介酶联免疫吸附试验的基本原理

  ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种 酶标记抗体可与吸附在固相 载体上的抗原或抗体发生 特异性结合。滴加 底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现 颜色反应。因此,可通过

酶联免疫吸附试验基本原理

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。因此,可通过底物的颜色反应

酶联免疫吸附试验的基本原理

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。因此,可通过底物的颜色反应

酶联免疫吸附试验基本原理

  ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。  因此,可通过底物的

酶联免疫吸附试验基本原理介绍

  ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。  因此,可通过底物的

酶联免疫吸附试验的原理

  ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。  因此,可通过底物的

布ELISA法的操作程序

(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面

布ELISA法的操作程序

(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(六)

电子顺磁共振波谱法ESR      分析原理:在外磁场中,分子中未成对电子吸收射频能量,产生电子自旋能级跃迁    谱图的表示方法:吸收光能量或微分能量随磁场强度变化    提供的信息:谱线位置、强度、裂分数目和超精细分裂常数,提供未成对电子密度、分子键特性及几何构型信息

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(五)

核磁共振波谱法NMR      分析原理:在外磁场中,具有核磁矩的原子核,吸收射频能量,产生核自旋能级的跃迁    谱图的表示方法:吸收光能量随化学位移的变化    提供的信息:峰的化学位移、强度、裂分数和偶合常数,提供核的数目、所处化学环境和几何构型的信息

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(一)

紫外吸收光谱UV      分析原理:吸收紫外光能量,引起分子中电子能级的跃迁    谱图的表示方法:相对吸收光能量随吸收光波长的变化    提供的信息:吸收峰的位置、强度和形状,提供分子中不同电子结构的信息

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(四)

拉曼光谱法Ram      分析原理:吸收光能后,引起具有极化率变化的分子振动,产生拉曼散射    谱图的表示方法:散射光能量随拉曼位移的变化    提供的信息:峰的位置、强度和形状,提供功能团或化学键的特征振动频率

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(十一)

凝胶色谱法GPC      分析原理:样品通过凝胶柱时,按分子的流体力学体积不同进行分离,大分子先流出    谱图的表示方法:柱后流出物浓度随保留值的变化    提供的信息:高聚物的平均分子量及其分布

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(十)

裂解气相色谱法PGC      分析原理:高分子材料在一定条件下瞬间裂解,可获得具有一定特征的碎片    谱图的表示方法:柱后流出物浓度随保留值的变化    提供的信息:谱图的指纹性或特征碎片峰,表征聚合物的化学结构和几何构型

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(七)

质谱分析法MS      分析原理:分子在真空中被电子轰击,形成离子,通过电磁场按不同m/e分离    谱图的表示方法:以棒图形式表示离子的相对峰度随m/e的变化    提供的信息:分子离子及碎片离子的质量数及其相对峰度,提供分子量,元素组成及结构的信息

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(十三)

 热差分析DTA      分析原理:样品与参比物处于同一控温环境中,由于二者导热系数不同产生温差,记录温度随环境温度或时间的变化    谱图的表示方法:温差随环境温度或时间的变化曲线    提供的信息:提供聚合物热转变温度及各种热效应的信息

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(十四)

TG-DTA图      示差扫描量热分析DSC    分析原理:样品与参比物处于同一控温环境中,记录维持温差为零时,所需能量随环境温度或时间的变化    谱图的表示方法:热量或其变化率随环境温度或时间的变化曲线    提供的信息:提供聚合物热转变温度及各种热效应的信息

实验室分析方法质谱分析的基本原理

质谱法是利用电磁学原理,将待测样品分子解离成具有不同质量的离子,然后按其质荷比(m/z)的大小依次排列收集成质谱。根据质谱中的分子离子峰(M·+)可以获得样品分子的相对分子质量信息;根据各离子峰(分子离子峰、同位素离子峰、碎片离子峰、亚稳离子峰、重排离子峰等)及其相对强度和氮数规则,可以确定化合物的

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(八)

气相色谱法GC      分析原理:样品中各组分在流动相和固定相之间,由于分配系数不同而分离    谱图的表示方法:柱后流出物浓度随保留值的变化    提供的信息:峰的保留值与组分热力学参数有关,是定性依据;峰面积与组分含量有关

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(二)

荧光光谱法FS      分析原理:被电磁辐射激发后,从最低单线激发态回到单线基态,发射荧光    谱图的表示方法:发射的荧光能量随光波长的变化    提供的信息:荧光效率和寿命,提供分子中不同电子结构的信息

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(二)

  热差分析 DTA   分析原理 :样品与参比物处于同一控温环境中,由于二者导热系数不同产生温差,记录温度随环境温度或时间的变化   谱图的表示方法 :温差随环境温度或时间的变化曲线   提供的信息 :提供聚合物热转变温度及各种热效应的信息   示差扫描量热分析 DSC   分

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(一)

  紫外吸收光谱 UV   分析原理 :吸收紫外光能量,引起分子中电子能级的跃迁   谱图的表示方法 :相对吸收光能量随吸收光波长的变化   提供的信息 :吸收峰的位置、强度和形状,提供分子中不同电子结构的信息   荧光光谱法 FS   分析原理 :被电磁辐射激发后,从最低

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(九)

反气相色谱法IGC      分析原理:探针分子保留值的变化取决于它和作为固定相的聚合物样品之间的相互作用力    谱图的表示方法:探针分子比保留体积的对数值随柱温倒数的变化曲线    提供的信息:探针分子保留值与温度的关系提供聚合物的热力学参数

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(三)

红外吸收光谱法IR      分析原理:吸收红外光能量,引起具有偶极矩变化的分子的振动、转动能级跃迁    谱图的表示方法:相对透射光能量随透射光频率变化    提供的信息:峰的位置、强度和形状,提供功能团或化学键的特征振动频率

各种仪器分析的基本原理及谱图表示方法(十二)

热重法TG      分析原理:在控温环境中,样品重量随温度或时间变化    谱图的表示方法:样品的重量分数随温度或时间的变化曲线    提供的信息:曲线陡降处为样品失重区,平台区为样品的热稳定区

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

根据ELISA所用的固相载体而区分为三大类型:一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA,即我们通常所指的ELISA(微量板ELISA);另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA,称为斑点ELISA(Dot-ELISA);再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA,称为布ELISA(C-ELISA)。

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

  抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。  在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,最好使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少非特异性吸附。  酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化