非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的定义和原理

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等变性剂的条件下,对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷,它们的分离是依据其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用,因而可以得到较高的分辨率,尤其是在电泳分离后仍能保持蛋白质和酶等生物大分子的生物活性,对于生物大分子的鉴定有重要意义,其方法是在凝胶上进行两份相同样品的电泳,电泳后将凝胶切成两半,一半用于活性染色,对某个特定的生物大分子进行鉴定,另一半用于所有样品的染色,以分析样品中各种生物大分子的种类和含量。......阅读全文

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

试剂、试剂盒 40% 聚丙烯酰胺溶液 尿素 甲酰胺 5XTBE 缓冲液 10X 加样缓冲液 过硫酸铵 TEMED 染色液 1%AgNO3 显色液仪器、耗材 垂直电泳装置 水浴实验步骤 (一)材料与设备1) 垂直电泳装置2) 水浴3)40% 聚丙烯酰胺溶液: 丙烯酰胺 38 g,N,N-亚甲双丙烯酰胺

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

                       变性聚丙烯酰胺凝胶电泳             试剂、试剂盒 40%

变性梯度凝胶电泳技术的原理和应用

变性梯度凝胶电泳(denatured gradient gel electrophoresis,DGGE)最初是Lerman 等人于20 世纪80 年代初期发明的,起初主要用来检测DNA 片段中的点突变。Muyzer 等人在1993 年首次将其应用于微生物群落结构研究 。后来又发展出其衍生技术,温度

非编码序列的定义

中文名称非编码序列英文名称non-coding sequence定  义基因中不具有编码功能的序列。如真核生物基因的内含子、启动子等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)

非甲烷总烃的定义

非甲烷总烃(NmHc),又称非甲烷烃。《大气污染物综合排放标准详解》中定义为:指除甲烷以外所有碳氢化合物的总称,主要包括烷烃、烯烃、芳香烃和含氧烃等组分。烃类物质在通常条件下,除甲烷外多以液态或固态存在,并依据其分子量大小和结构形式的差别具有不同的蒸气压,因而作为大气污染物的非甲烷总

非对映[异构]体的定义

中文名称非对映[异构]体英文名称diastereomer定  义有机化合物分子中,其碳原子互为非对映关系的构型异构体。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),总论(二级学科)

非蛋白呼吸商的定义

非蛋白呼吸商,是估算非蛋白代谢中糖和脂肪氧化的相对数量的依据。非蛋白呼吸商是指忽略蛋白质代谢后,非蛋白质氧化时产生的CO2量与消耗的O2量之比,用NRRQ表示。

非晶半导体的定义

非晶半导体又称无定形半导体或玻璃半导体,非晶态固体中具有半导电性的一类材料。具有亚稳态结构,组成原子的排列是短程有序、长程无序,键合力未发生变化,只是键长和键角略有不同。按键合力性质有共价键半导体,包括四面体的Si、Ge、SiC、ZnSn、GaAs、GaSb等,“链状”的S、Se、Te、As2Se3

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验主要用于纯化寡核苷酸。实验方法原理本方法由于快捷、简便及具髙分离度,对纯化寡核苷酸非常有用。尽管得到率偏低(<50%),回收的量通常却大大超过了大多数分子生物学应用所需的量步骤亦可用于分离小RNA或其他单链多聚核苷酸。实验材料核苷酸试剂、试剂盒浓氨水TBE丙烯酰胺亚甲双丙烯

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

实验材料 核苷酸试剂、试剂盒 浓氨水TBE丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺TEMED尿素过硫酸铵TE仪器、耗材 真空旋转蒸发仪电泳仪实验步骤 1.  用浓氨水将合成的寡核苷睃从可控孔度玻璃拄上洗脱下来。于55℃加热5 h 以上。2.  样品移至离心管中,在Speedvac真空旋转蒸发仪中冻干,沉淀用0.2 m

5.2.4-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

在尿素或甲酰胺存在的条件下进行 RNA 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳能够破坏 RNA 的二级结构,使其电泳迁移率-与分子质量的对数成严袼的反比关系,同时其灵敏度要高于甲醛变性琼脂糖凝胶电泳。试剂、试剂盒40% 聚丙烯酰胺溶液尿素甲酰胺5XTBE 缓冲液10X 加样缓冲液过硫酸铵TEMED染色液 1%AgN

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验主要用于纯化寡核苷酸。实验方法原理本方法由于快捷、简便及具髙分离度,对纯化寡核苷酸非常有用。尽管得到率偏低(<50%),回收的量通常却大大超过了大多数分子生物学应用所需的量步骤亦可用于分离小RNA或其他单链多聚核苷酸。实验材料核苷酸试剂、试剂盒浓氨水TBE丙烯酰胺亚甲双丙烯

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

            实验方法原理 本方法由于快捷、简便及具髙分离度,对纯化寡核苷酸非常有用。尽管得到率偏低(<50%),回收的量通常却大大超过了大多数分子生物学应用所需的量步骤亦可用于分离小RNA或其他单链多聚核苷酸。

溶血空斑试验的定义和原理

中文名称溶血空斑试验英文名称hemolytic plaque assay定  义一种定量检测特异性抗体生成细胞的试验。即将抗体生成细胞和红细胞混合于凝胶薄层中,抗体生成细胞所释出的抗体与周围红细胞结合,在补体作用下形成溶血空斑,从而进行定量计数。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫

巨噬细胞移动试验的定义和原理

中文名称巨噬细胞移动试验英文名称macrophage migration test定  义一种检测细胞免疫功能的体外试验。即将巨噬细胞和待检T细胞共孵育,通过观察巨噬细胞游走性,半定量检测T细胞所分泌巨噬细胞移动抑制因子的水平。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级

铅蓄电池的定义和原理

铅蓄电池是一种电极主要由铅及其氧化物制成,电解液是硫酸溶液的蓄电池,其正极为二氧化铅,负极为海绵状铅,隔板根据不同类型的铅蓄电池使用 AGM隔板、微孔塑料隔板或其他材料,电池壳体使用工程塑料、玻璃钢等材料制成。铅蓄电池的正负极之间由隔板隔离,该种隔板可使电解液中的离子通过。放电时,正极板的活性物质二

免疫比浊法的定义和原理

免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定

基因枪法的定义和原理简介

基因枪法是一种基因导入仪技术,它把遗传物质或其他物质附着于高速微弹直接射入细胞、组织和细胞器,是目前国际上最先进的基因导入技术。气体基因枪以压缩气体(氦或氮)转换成的气体冲击波为动力,使气体基因枪枪产生一种“冷”的气体冲击波进入轰击室,因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤。气体基因枪可在广泛的

核酸序列扩增法的定义和原理

中文名称核酸序列扩增法英文名称nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定  义一种在等温系统中扩增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶仅在结合核酸上相应位点时才能起作用的特点,将结合位点序列与靶序列相连,然后产生靶分子的RNA拷贝,形成反转录和RN

望远镜系统的定义和原理

中文名称望远镜系统英文名称telescopic system定  义能将远处物体进行视角放大的光学系统。入射的平行光束通过望远镜系统后,仍为平行光束。应用学科机械工程(一级学科),光学仪器(二级学科),光学仪器一般名词(三级学科)

索氏提取法的定义和原理

  索氏提取法,又名连续提取法、索氏抽提法,是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公认的经

重组PCR技术的定义和原理介绍

1.定义:使两个不相邻的DNA片段重组在一起的PCR称为重组PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年报道了由PCR扩增的两个DNA片段通过重组合后再经延伸而制备出新的DNA分子。2. 其基本原理:将突变碱基,插入或缺失片段,或一种物质的几个基因片段均设计在引物中,先分段对

光合作用的定义和原理

光合作用(Photosynthesis)是植物、藻类和某些细菌利用叶绿素,在可见光的照射下,将二氧化碳和水转化为有机物,并释放出氧气的生化过程.植物之所以被称为食物链的生产者,是因为它们能够通过光合作用利用无机物生产有机物并且贮存能量.通过食用,食物链的消费者可以吸收到植物所贮存的能量,效率为30%

不连续非变性凝肢电泳实验

            实验方法原理 非变性凝胶电泳通常是在高 pH(8.8)缓冲液条件下进行。这时,多数蛋白质带负电荷,并向阳极迁移。 实验材料 蛋白质溶液

不连续非变性凝肢电泳实验

实验方法原理 非变性凝胶电泳通常是在高 pH(8.8)缓冲液条件下进行。这时,多数蛋白质带负电荷,并向阳极迁移。实验材料 蛋白质溶液试剂、试剂盒 丙烯酰胺双丙烯酰胺Tris 碱盐酸过硫酸铵TEMED甘氨酸甘油溴酚蓝甲醇冰醋酸仪器、耗材 Bio-Rad Min-Protean II 凝胶电泳槽微量注射

不连续非变性凝肢电泳实验

非变性凝胶电泳,也称为天然凝胶电泳。在凝胶中蛋白质的分离取决于它所带电荷及分子大小。按丙烯酰胺凝胶孔径大小去筛分不同尺寸蛋白质的同时,在分离胶酸性 pH 条件下高电荷的蛋白质的泳动速度会更快。这种方法可以区分仅有一个电荷单位差别的分子。与 SDS-PAGE 电泳相比,非变性凝胶大大降低了蛋白质变性发

血型分析仪定义和原理

  定义:  一种用于血型检测、血型定型、抗筛、交叉配血等血型血清学检测的分析仪器。可自动完成标本、试剂的条码阅读、加样、加试剂、孵育、离心、振荡、CCD图像分析判定直至传输打印结果。  检测项目与原理:  采用微孔板红细胞凝集法原理进行ABO正、反定型;Rh(D)定型;细胞筛查检测。采用微孔板抗人

15%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的步骤

实验步骤:凝胶的制备:1、 清洗干净两块玻璃板,晾干后按要求装配好垂直电泳板,两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂糖封边,防止封闭不严而使聚丙烯酰胺液漏出。2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45~60℃角。把玻璃板在灌胶支架上固定好。3、 分离胶:按1∶3∶8∶水=1∶2∶4∶1的比例,先将贮备液1,3和

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的相关介绍

  变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是根据寡核苷酸的大小来分离,因此可将全长产物与不完整的短分子分开。电泳时通常每一泳道至少加1mg合成的寡核苷酸,电泳后在紫外灯下定位寡核苷酸条带,将长度正确的寡核苷酸从凝胶上切下。原理:蛋白质或多肽与SDS结合,经热变性和二硫键的还原,形成所带负电荷相对一致的非

茎尖培养的定义和脱毒的原理

茎的生长点培养,实际就是茎尖培养。在植物组织的培养中,曾是很早以来就被应用的一种方法,茎尖培养除研究枝条的发育和花的形态形成外,也应用于无病毒植物的培养和兰花等园艺作物的营养繁殖等方面。此外,用这种方法进行营养繁殖的个体称为分体无性繁殖(mericlone)。茎尖培养脱毒的原理是茎尖几乎不含病毒,采