高效液相层析的应用特点和常用支持物介绍

其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。用直径约3~10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1~2微米的二氧化硅,经硫酰氯反应生成Si—Cl,进一步连接疏水的烷基,如Si—C18H37,或阳离子交换基团—Si(CH2)n—C6H4SO3H,或阴离子交换基团—Si(CH2)nNH2。这种支持物能承受很高的压力,化学性能稳定。用不同类型支持物的HPLC,可做吸附层析、离子交换层析和凝胶过滤层析。其分析微量化可达10-10克水平。但用于制备,可以纯化上克的样品。展层时间短,一般需几分钟到10余分钟。其分析速度、精确度可与气相层析媲美。HPLC适于分析分离不挥发和极性物质。而气相层析只适用于挥发性物质,两者互为补充,都是最为理想的层析法。HPLC配有程序控制洗脱溶剂的梯度混合仪,数据处理的积分仪和记录仪等电子系统,成为一种先进的分析仪器,在生物化学、化学、医药学和环境......阅读全文

简述高效液相层析的操作注意要点

  1)首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。  2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。  3)正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直

高效液相层析的操作注意事项

1).流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。3). 所有过柱子的液体均需严格的过滤。4). 压力不能太大,最好不要超过150kgf/cm2 .5). 因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱,

反相高效液相层析的基本概念

中文名称反相高效液相层析英文名称reversed-phase high-performance liquid chromatography;RP-HPLC定  义固定相颗粒表面为非极性材料(如含C18链),流动相为极性的一种高效层析。通过这类反相层析柱的分子按其极性大小移动,极性越大移动越快。应用学

层析法的技术特点和应用介绍

层析法的最大特点是分离效率高,它能分离各种性质极相类似的物质。而且它既可以用于少量物质的分析鉴定,又可用于大量物质的分离纯化制备。因此,作为一种重要的分析分离手段与方法,它广泛地应用于科学研究与工业生产上。它在石油、化工、医药卫生、生物科学、环境科学、农业科学等领域都发挥着十分重要的作用。

高效液相色谱特点

  ①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。  ②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。  ③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离

常用高效液相色谱柱SOP

1 目 的:色谱柱的使用和保养:液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。建立高效液相色谱柱日常维护与保养规程,保证能正常使用。2 适用范围:本规程适用高效液相色谱柱的维护与保养。

液液层析的概念和应用

中文名称液液层析英文名称liquid-liquid chromatography;LLC定  义固定相和流动相皆为液体的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

反相高效液相层析实验_多肽和蛋白质的分离

实验材料蛋白质试剂、试剂盒TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材层析柱HPLC进样器实验步骤1.  用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂,梯度从100%有机溶剂到100%水,流速1 ml/min,持续15 min 以上。 2.  以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用10~15

高效液相色谱的应用

关于高效液相色谱的应用回答如下:一、分离混合物高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。通过与试样预处理技术相配合,高效液相色谱法所达到的高分辨率和高灵敏度,可分离并同

高效液相色谱的应用

例一、磺胺分析样  品:磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑和甲氧苄氨嘧啶的混合物色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,740色谱数据处理机检测器:UV 481型紫外检测器,波长240nm色谱柱:μ-Bondapak C18 , 5μm,柱长25 cm,柱径4.6 mm流动相:由KH2PO4(0.05

高效液相色谱的应用

高效液相色谱仪是用来检测分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物。HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点。因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪

气相层析的特点介绍

属于分配层析或吸附层析,仅适用于分析分离挥发性和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物(如磨细的耐火砖)上覆盖一层高沸点液体,如硅油、高沸点石蜡和油脂、环氧类聚合物。

关于超高效液相色谱的应用介绍

  如今,超高效液相色谱仪主要应用于  (1)药物分析 如天然产物中复杂组分的分析  (2)生化分析 如蛋白质、多肽、代谢组学等生化样品  (3)食品分析 如食品中农药残留的检测  (4)环境分析 如水中微囊藻毒素的检测  (5)其他 如化妆品中违禁品的检测  超高效液相色谱仪尤其对中药研究领域的发

关于高效液相色谱的应用实例介绍

  高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的75%~80%)原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计,在已知化合物中,能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色

高效液相色谱柱的分类与应用特点(二)

三、高效亲水液相色谱柱 高效亲水液相色谱是一个介于正相和反相高效液相色谱之间的运作模式。这个模式最早来自NH2色谱柱的糖分析应用。在此之后,逐步在Diol, 硅胶和亲水性高分子键合相找到了一些有价值的应用。近年来,高效亲水液相色谱成为比较流行的色谱的运作模式, 主要是因为亲水性化合物有良好的保留和高

高效液相色谱柱的分类与应用特点(一)

高效液相色谱柱大致可分为五类:一、高效反相液相色谱柱 以C18为代表的高效反相液相色谱柱一直被描述为药物发现、开发、方法验证(validation)的心脏! 高效反相液相色谱柱也极其广泛应用在药物代谢及动力学、生命科学、医疗健康、生物分析检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析、军事、国土安全

微量层析的特点和应用

中文名称微量层析英文名称microchromatography定  义采用微型层析柱和高灵敏检测器的层析方法。适合于样品量很少的样品分析。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

高效液相层析的主要类型及其分离原理

根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间

高效液相层析的主要类型及其分离原理

根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间

液液分配层析的概念和应用

中文名称液液分配层析英文名称liquid-liquid partition chromatography定  义在固体填充颗粒上涂上一层薄薄的固定液,待测组分在固定相和流动相之间进行连续的分配萃取的一种层析技术。是利用样品中各组分在两相中的分配系数不同而使其彼此分离。应用学科生物化学与分子生物学(一

高效液相色谱常用的仪器有哪些?

高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。

高效亲和层析的原理和应用

中文名称高效亲和层析英文名称high-performance affinity chromatography;HPAC定  义利用分子间的结合作用(如抗原-抗体、酶-抑制物、激素-受体、糖类-外源凝集素或核酸的互补链之间的结合),将其中配对结合的任何一方固定在硬质的支持物(如硅酸微粒、合成的多聚物等

快速蛋白质液相层析的概念和应用

中文名称快速蛋白质液相层析英文名称fast protein liquid chromatography;FPLC定  义以高流率代替高效液相层析高压力的一种改良的中压(< 5 MPa)液相层析技术。具有快速、容量大和分辨率高的特点。可使用多种层析介质,多用于蛋白质的分离,也可以用于其他物质的分离。应

正相层析的概念和应用

中文名称正相层析英文名称normal-phase chromatography定  义固定相的极性大于流动相的一种液相层析类型。流动相极性越低,被分离的化合物在层析系统中的保留时间越长。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

液固层析的概念和应用

中文名称液固层析英文名称liquid-solid chromatography;LSC定  义固定相为固体,流动相为液体的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

气液层析的概念和应用

中文名称气液层析英文名称gas-liquid chromatography;GLC定  义固定相由固体的惰性载体和固定液构成,载体提供一个惰性表面,使基本不挥发的液体能够在其表面铺展成薄而均匀的液膜,成为分配平衡的一相,流动相为惰性气体的一种气相层析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与

高效液相层析法的主要类型及其分离原理

根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间

高效液相色谱常用哪些检测器

最常用的检测器是紫外吸收检测器(UVD),用于有紫外吸收的物质。其他的二极管阵列检测器(DAD)可以扫描出一个3D光谱,它是在紫外检测器基础上改良出来的,用于多波长错组分物质;示差折光检测器(RID)和蒸发光散射检测器(ELSD)都属于万能检测器,可以检出没有紫外吸收的物质。还有荧光检测器,用于可发

高效液相色谱常用哪些检测器

最常用的检测器是紫外吸收检测器(UVD),用于有紫外吸收的物质。其他的二极管阵列检测器(DAD)可以扫描出一个3D光谱,它是在紫外检测器基础上改良出来的,用于多波长错组分物质;示差折光检测器(RID)和蒸发光散射检测器(ELSD)都属于万能检测器,可以检出没有紫外吸收的物质。还有荧光检测器,用于可发

高效液相色谱常用哪些检测器

最常用的检测器是紫外吸收检测器(UVD),用于有紫外吸收的物质。其他的二极管阵列检测器(DAD)可以扫描出一个3D光谱,它是在紫外检测器基础上改良出来的,用于多波长错组分物质;示差折光检测器(RID)和蒸发光散射检测器(ELSD)都属于万能检测器,可以检出没有紫外吸收的物质。还有荧光检测器,用于可发