凝集素亲和层析的原理
简单来说，亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。通常，在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制，例如细胞裂解液，生长培养基或血清。首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中，其中含有某类特定的生物大分子（从DNA到蛋白质，取决于实验需求）。等待一段时间使两相充分混合，随后将洗涤缓冲液倒入色谱柱中。洗涤缓冲液通过破坏非目标生物分子与固定相的较弱结合来去除非目标生物分子。目标生物分子对固定相具有较高的亲和力，因此能够保持与固定相的结合，而不会被洗涤缓冲液冲走。然后将洗脱缓冲液倒入含有剩余目标生物分子的色谱柱中。洗脱缓冲液比洗涤缓冲液，能够从更大程度上减弱靶生物分子与固定相之间的相互作用，从而洗脱靶生物分子。洗脱得到的溶液包含洗脱缓冲液和目标分子，称为洗脱液。固定相一般是凝胶基质，常见的有琼脂糖。为了防止目标分子与配体结合过程中的空间干扰或重叠，首先将含有烃链的抑制剂连接到琼脂糖珠（固体支持物）上。......阅读全文
亲和层析实验：常规方法
实验步骤 一、亲和介质的选择 亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标，既保证较弱的非特异性吸附，又可以在整个过
请问凝集素有哪些特性？
凝集素具有多方面的特性，在此我们仅简要提及其与免疫细胞化学技术方法应用有关的某些特性。我们知道，生物膜中含有一定量的糖类，主要以糖蛋白和糖脂的形式存在。凝集素最大的特点在于它们能识别糖蛋白和糖肽中，特别是细胞膜中复杂的碳水化合物结构，即细胞膜表面的碳脂化合物决定簇。一种凝集素具有对某一种特异性糖
冷凝集素试验介绍
冷凝集素试验原理：冷凝集素为IgM类完全抗体，在低温时可使自身红细胞、0型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集。凝集反应的高峰在0℃～4℃，当温度回升到37℃时凝集消失医学`教育网搜集整理。 参考值：正常人血清抗红细胞抗原的lgM冷凝集素效价小于1：32（4℃）。 临床意义：阳性见于冷凝集素综
凝集素吞噬现象特点
中文名称凝集素吞噬英文名称lectinophagocytosis定 义吞噬细胞不依赖于免疫反应而黏附和吞噬病原体的现象。有两种情况，一种是病原体凝集素与吞噬细胞凝集素受体结合；另一种是吞噬细胞凝集素与病原体凝集素受体结合。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），信号转导（二级学科）
什么是植物凝集素？
植物凝集素是一类具有特异糖结合活性的蛋白，具有一个或多个可以与单糖或寡糖特异可逆结合的非催化结构域。凝集素最大的特点在于它们能识别糖蛋白和糖脂，特别是细胞膜中复杂结构的糖链，即细胞膜表面决定簇。 植物凝集素最早发现于1888年，Stillmark在蓖麻(Ricinus communis L．)
什么是冷凝集素？
冷凝集素（cold agglutinin）是冷反应型抗红细胞抗体，在0℃一5℃时最易和红细胞膜抗原结合，是IgM型，是较强的凝集红细胞的一种可存在于正常人血清中的抗体，低效价一般没有临床意义。
琼脂糖亲和层析的具体步骤
亲和层析法亲和层析是利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力，从而达到分离目的的一类特殊层析技术。具有专一亲和力的生物分子对主要有：抗原与抗体、DNA与互补DNA或RNA、酶与它的底物或竞争性抑制剂、激素（或药物）与它们的受体、维生素和它的特异结合蛋白、糖蛋白与它相应的植物凝集素等。可亲和的
细胞亲和层析的概念和应用
中文名称细胞亲和层析英文名称cell affinity chromatography定 义从混合培养物中将具有特定功能的细胞分离出来的一种层析法。常用的亲和吸附剂有特异性抗体、外源凝集素等。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
免疫亲和层析的应用相关介绍
1、免疫层析测试 一种基于免疫层析测试（ICT）试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测，该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT，技术人员无需使用实验室，即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。 2、示例 抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又
免疫亲和层析的作用和应用
免疫亲和层析（Immunoaffinity Chromatography，IAC），或免疫亲和色谱，是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。
亲和层析的一般过程
亲和色谱分离的通常是混合在溶液中的物质，比如细胞内容物、培养基或血浆等。待分离的分子在通过色谱柱时被固定相或介质上的基团捕获，而溶液中其他的物质可以顺利通过色谱柱。然后把固态的基质取出后洗脱，目标分子即刻被洗脱下来。如果分离的目的是去除溶液中某种分子，那么只要分子能与介质结合即可，可以不必进行洗脱，
关于免疫亲和层析的示例介绍
抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上，就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低，用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离，而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原，经动物免
DNA亲和层析的相关应用介绍
DNA亲和层析是利用亲和层析的原理与技术分离能与特定DNA序列相互作用的技术方法。总的过程包括两步，即： 一、将某一类细胞中所有的蛋白质过含有该类细胞各种片段的DNA层析柱，用低浓度盐溶液洗去不与DNA作用的绝大多数蛋白，用中浓度盐溶液洗脱大部分与能DNA相互作用的蛋白。 二、将第一步得到的
亲和层析的一般流程
亲和色谱分离的通常是混合在溶液中的物质，比如细胞内容物、培养基或血浆等。待分离的分子在通过色谱柱时被固定相或介质上的基团捕获，而溶液中其他的物质可以顺利通过色谱柱。然后把固态的基质取出后洗脱，目标分子即刻被洗脱下来。如果分离的目的是去除溶液中某种分子，那么只要分子能与介质结合即可，可以不必进行洗脱，
抗体的亲和层析法纯化技术
实验概要本实验介绍了抗体亲和层析法纯化的操作流程。实验原理亲和层析的高度选择性使得从某一初始材料中纯化，富集某一含量较低的目的蛋白成为可能，因此亲和层析是蛋白质分离纯化过程中最有效的方法之一。另外，如果配基与蛋白质的亲和能力很强，也可同时进行样品的浓缩。虽然多数情况下不需要将抗体与其他血清蛋白分开，
影响亲和层析法的因素介绍
1、上样体积若目标产物与配基的结合作用较强，上样体积对亲和色谱效果影响较小。若二者间结合力较弱，样品浓度要高一些，上样量不要超过色谱柱载量的5%~10%。（这个载量是指色谱柱所吸附的配体的量）2、柱长亲和柱的长度需要根据亲和介质的性质确定。如果亲和介质的载量高，与目标产物（目标物）的作用力强，可以选
抗体的亲和层析法纯化技术
实验概要本实验介绍了抗体亲和层析法纯化的操作流程。实验原理亲和层析的高度选择性使得从某一初始材料中纯化，富集某一含量较低的目的蛋白成为可能，因此亲和层析是蛋白质分离纯化过程中最有效的方法之一。另外，如果配基与蛋白质的亲和能力很强，也可同时进行样品的浓缩。虽然多数情况下不需要将抗体与其他血清蛋白分开，
金属亲和层析的概念和应用
中文名称金属亲和层析英文名称metal affinity chromatography定 义利用固相化的金属离子介质进行的亲和层析技术。欲分离的物质与金属离子形成共配位复合物而结合，再通过降低pH、加入竞争物(如咪唑、组氨基酸等)、使用螯合剂(如乙二胺四乙酸)等方法洗脱。常用于蛋白质的纯化分离，如
关于几丁质结合凝集素的简介
几丁质结合凝集素含有至少一个橡胶素结构域，橡胶素是从巴西橡胶树乳管细胞的黄色体中发现的分子量约为4.7 kDa的小分子酸性凝集素。 已在荨麻科、禾本科、罂粟科、商陆科和茄科中发现几丁质结合凝集素。根据含有的橡胶素结构域的个数，几丁质结合凝集素又可分为只含有一个橡胶素结构域的部分凝集素及常见的含
冷凝集素的临床实验
1、一般认为，病毒和其他微生物感染产生的免疫反应的副产物中就有冷凝集素，但常人并不发生溶血。在慢性淋巴增生疾病、感染和肿瘤潜在发病的老年人中很可能突破常规，并出现单克隆抗体的特征(一般为K轻链或A轻链型)。2．冷凝集素效价增高主要见于原发性冷凝集素综合征，其时效价可高达1：1000以上，而轻度增高常
苋科凝集素的基本信息
苋科凝集素家族较小，只存在于一些苋科植物中，发现不超过10种，均具有GalNAc结合特异性，并且在氨基酸序列及三维结构上与其他植物凝集素都存在差异。苋科凝集素都是由2个同源的亚基以头一尾方式排列形成的二聚体。
冷凝集素的临床意义
冷凝集素（cold agglutinin）是冷反应型抗红细胞抗体，在0℃一5℃时最易和红细胞膜抗原结合，是IgM型，是较强的凝集红细胞的一种可存在于正常人血清中的抗体，低效价一般没有临床意义。
冷凝集素的临床意义
1、一般认为，病毒和其他微生物感染产生的免疫反应的副产物中就有冷凝集素，但常人并不发生溶血。在慢性淋巴增生疾病、感染和肿瘤潜在发病的老年人中很可能突破常规，并出现单克隆抗体的特征(一般为K轻链或A轻链型)。2．冷凝集素效价增高主要见于原发性冷凝集素综合征，其时效价可高达1：1000以上，而轻度增高常
关于凝集素的研究意义介绍
凝集素在动、植物体内广泛存在。凝集素最大的特点是能识别糖蛋白和糖脂中，特别是细胞膜中复杂的碳水化合物结构，即细胞膜表面的糖基。一种凝集素具有只对某一种特异性糖基专一性结合的能力。因此，凝集素可以作为研究细胞膜结构的探针。凝集素在无脊椎动物血液中具有多种生物活性，可以选择凝集各种细胞，对肿瘤细胞有
关于豆科凝集素的基本介绍
豆科凝集素特指一类在豆科植物中发现的植物凝集素(并不是所有来自豆科植物的凝集素都是豆科凝集素)，已发现存在于70多种植物中，是研究得最清楚的凝集素家族。大多数豆科凝集素存在于植物的成熟种子中，但在叶、茎和根等组织器官中也有发现，并且，一些豆科植物还具有多种凝集素。 豆科凝集素均由2～4个亚基组
冷凝集素的临床意义
1、一般认为，病毒和其他微生物感染产生的免疫反应的副产物中就有冷凝集素，但常人并不发生溶血。在慢性淋巴增生疾病、感染和肿瘤潜在发病的老年人中很可能突破常规，并出现单克隆抗体的特征(一般为K轻链或A轻链型)。2．冷凝集素效价增高主要见于原发性冷凝集素综合征，其时效价可高达1：1000以上，而轻度增高常
简述外源凝集素的功能
1、有助机体Ca2+、糖输运、维系共生功能。在机体的Ca2+和糖输运中起作用。在贝类中，为它们同一些植物共生起维系作用。 2、共扼接合功能。与其他糖蛋白或糖发生共扼接合，就如高等动物中抗体与抗原体系中的相互作用。 3、清除杂物功能。在甲壳动物变态期间，参与清除机体不必要的细胞，组织片段或残余
植物凝集素对昆虫的作用
对昆虫的作用植物凝集素对昆虫如同翅目昆虫及动物产生毒害的机理还不清楚，一般认为植物凝集素可能通过和糖蛋白，如和昆虫围食膜表面、消化道上皮细胞的糖缀合物、或糖基化的消化酶等结合，从而影响昆虫、动物对营养吸收，促进消化道中细菌的繁殖和诱发病灶，抑制昆虫的生长发育和繁殖，最终达到杀虫、或对动物产生毒害的作
大豆凝集素的基本信息
大豆凝集素 ( S B A) 主要存 在于大豆子叶细胞的 蛋 白体 内 ，约 为大 豆蛋 白质 总量 的 10%。研究发现大豆中含有两类大豆凝集素：第一类大豆凝集素是对 N -乙酰基-D- 半乳糖胺和 D- 半乳糖有结合性特异。分子量约为 1 2 0 k D a 一类 的糖 蛋白。是大豆中主要的抗营
简述植物凝集素的功能作用
1、对植物病原菌的作用 植物凝集素作为微生物与植物的共生介质，可防止植物病原菌对植物的危害；Mishkid等(1982)研究发现，植物凝集素常积累于病原菌易侵染的部位，预示着凝集素可能参与对病原菌的防御。 2、对植物病原线虫的作用 这方面研究相对较少，仅常团结等(2002)报道纯化的雪花莲