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DNA测序技术的技术原理

化学修饰法测序原理化学试剂处理末段DNA片段,造成碱基的特异性切割,产生一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物,经凝胶电泳分离。化学切割反应:包括碱基的修饰,修饰的碱基从其糖环上转移出去在失去碱基的糖环处DNA断裂。Sanger法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团,使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整,使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点,但终止在不同的的核苷酸上,可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段,凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进......阅读全文

DNA测序技术的测序原理

化学修饰法测序原理化学试剂处理末段DNA片段,造成碱基的特异性切割,产生一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物,经凝胶电泳分离。化学切割反应:包括碱基的修饰,修饰的碱基从其糖环上转移出去在失去碱基的糖环处DNA断裂。Sanger法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物

DNA测序的测序技术

高通量测序技术(High-throughput sequencing)又称“下一代”测序技术(Next-generation sequencing technology),以能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定和一般读长较短等为标志。根据发展历史、影响力、测序原理和技术不同等,主要有以

DNA测序技术

目前还有一种基于半导体芯片的新一代革命性测序技术——Ion Torrent。该技术使用了一种布满小孔的高密度半导体芯片, 一个小孔就是一个测序反应池。当DNA聚合酶把核苷酸聚合到延伸中的DNA链上时,会释放出一个氢离子,反应池中的PH发生改变,位于池下的离子感受器感受到H+离子信号,H+离子信号再直

DNA测序技术的测序规律

生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸,每组寡核苷酸都有固定的起点,但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一个碱基出现在可变终止端的机会均等,因此上述每一组产物都是一些寡核苷酸混合物,这些寡核苷酸的长度由某一种特定碱基在原DNA全片段上的位置所决定。在可以区分长度仅差一个核苷酸

DNA测序技术综述

1977年,Sanger团队完成人类历史上第一个基因组序列噬菌体X174测序,并在3年后,成为“两度”获得诺贝尔化学奖的人(前一次是1958年)。Sanger测序技术诞生,让DNA片段的测序成为现实,此后这一技术独领风骚20多年。再后来的20年里,二代测序走向成熟、三代测序崭露头角,DNA测序技术以

DNA的测序技术-3

(二):测序胶的制备1:玻璃板的处理A,长板(不带凹槽、反硅化处理,粘胶板) a,2N NaOH浸泡1小时以上,自来水冲洗,海绵或软布蘸洗涤剂将板清洗干净,自来水冲洗掉全部洗涤剂,无离子水中过三遍,晾干。b, 在1ml95%乙醇,0.5%冰乙酸中加入5μl粘合硅烷。c, 用b中所配溶液浸

DNA的测序技术-4

3,染色,将胶板移至染色液中,摇床震荡30分钟。 4,凝胶洗涤,将染色后的胶板,放入超纯水中2-3秒后,迅速取出并竖起控水,随后把胶板放入预冷的显影液中(用量为总量的1/2),充分震荡,当第一批条带后,把胶板移入预冷的另一半显影液中,震荡,直至全部条带出现。 注意:从放入水到放入

DNA测序技术的简介

DNA测序技术,又叫基因测序技术。人类基因组这部由A、T、G、C四个字母组成的卷帙浩繁的生命天书如同一座宝库,保藏着几千年来人们迫切想知道的秘密,DNA测序技术就好似“芝麻开门”这样的咒语,是我们打开宝库的金钥匙世界上第一个测定DNA序列的方法是由英国生化学家弗雷德里克·桑格尔发明的。自此DNA测序

DNA的测序技术-1

DNA序列的正确测定,是进行基因结构和功能分析,绘制基因图谱、转基因检测等方面工作的重要前提。同时DNA测序技术为快速、简捷分析蛋白序列及结构提供了工具。DNA序列测定技术是在DNA内切酶、合成酶的应用,基因克隆及亚克隆技术,高分辨率聚丙烯酰胺变性胶电泳技术等基础上建立起来的。这些技术主要有三部分组

DNA的测序技术-2

一:仪器:离心机,PCR仪,高压电泳仪, 测序槽 ,摇床 ,染色,脱色缸易生物仪器库:http://www.ebioe.com/yp/product-list-42.html易生物试剂库:http://www.ebioe.com/yp/product-list-43.html二:试剂:测序反应试剂