凯氏定氮法的操作步骤
1、样品处理:精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品(约相当氮30-40mg),移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,6g硫酸钾及20毫升硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上,小火加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5小时。取下放冷,小心加20ml水,放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸同一方法做试剂空白试验。但是此法比较危险,不易在实验室演示,大多数实验室有消煮仪一次可以进行多个(一次可以消煮16个样品)样品处理,并有通风橱进行通风,温度可以自己设定,更加安全和可操作性,因此逐步成为主要的凯氏定氮法的首选处理方法。一般消解温度都设在240度及240度以上,如果......阅读全文
蛋白质印迹法的操作步骤
试剂准备1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至
蛋白质印迹法的操作步骤
试剂准备1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至
浸取分离法的操作步骤介绍
浸取法分离可溶组分的步骤一般为: ①溶剂与固体物料密切接触,使可溶组分转入液相,成为浸出液。 ②浸出液与不溶固体(残渣)的分离。 ③用溶剂洗涤残渣,回收附着在残渣上的可溶组分。 ④浸出液的提纯与浓缩,取得可溶组分的产品。 ⑤从残渣中回收有价值的溶剂。 leaching;solid-l
免疫印迹法的操作步骤有哪些
一蛋白质样品获得:细菌诱导表达后,可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞,真核细胞加匀浆缓冲液,机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃,13,000r离心15min。取上清液作为样品。 二电泳:制备电泳凝胶,进行SDS-PAGE。 三转移:(半干式转移) 1、电泳结束后将胶条割至合适大小
铅字法透明度计的操作步骤
铅字法透明度计 型号;HAD-J330HAD-J330铅字法透明度计注意事项:(另有长度600MM透明度计销售)1.悬浮物质多的水样,有时在透明度计的底部发生沉积,是产生误差的原因,要注意。2.照明条件应尽可能致。光源原则上为白色光,避免直射日光。3.视力的差别会给测定值带来偏差,故要选择视力正常的
纸层析法实验研究的操作步骤介绍
1.称取新鲜叶子2g,放入研钵中加丙酮5ml,少许碳酸钙(防止叶绿素被破坏)和石英砂(帮助研磨),研磨成匀浆,再加丙酮5ml,然后以漏斗过滤之,即为色素提取液。 2.取准备好的滤纸条(2×20cm),将其一端剪去两侧,中间留一长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条,并在滤纸剪口上方折叠出一条直线
蛋白质印迹法的操作步骤
1.SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2.匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3.转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至1000
荧光素眼底血管造影法的操作步骤
(1)详询病史,包括有无过敏史,详细检查全身及眼部情况,严重的心、肝、肾疾病及眼部屈光间质混浊者不宜造影。 (2)询问有无青光眼病使,必要时应进行检查。由于青光眼不能散瞳,因此造影也就无从谈起。 (3)提前30至60分钟开始散瞳,被检要眼充分散瞳,使瞳孔直径能达8mm为宜。至少要达到7毫米以
免疫组化(LP法)操作步骤
1.切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 2.缓冲液洗3min/2次。 3.为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在Hydrogen Peroxide Block中孵育10-15分钟。 4.缓冲液洗5min/2次。 5.滴加UltraVBlock,在室温下
蛋白质印迹法操作步骤
试剂准备1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至
免疫组化(SP法)操作步骤
免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ul
铅字法透明度计操作步骤
操作步骤:1.将充分混匀的水样转移至透明度圆筒中,使圆筒装满。2.眼睛自管口垂直向下观察,同时打开下端出水口的开关,下到刚能辨认出底部的黑色十字图形时,停止放水。3.记录水柱的高度(CM)。4.重复以上步骤测定两次,取其平均值。5.结果计算:透明度=水柱高度(CM),记录到10MM。
电极法测电导率操作步骤
步骤1)温度调节调节恒温水浴的温度为25℃,将盛有标准氯化钾溶液30ml的4支试管放入水浴中,恒温0.5h,使溶液温度达到25℃。2)电极常数的测定用3支试管中的标准溶液依次冲洗电极和50ml烧杯,将第4支试管中的标准氯化钾溶液倒入烧杯中,插入电极,测量电阻RKCl值按(3)式计算电极常数C。3)样
Western印迹法(试剂配制和操作步骤)
Western印迹法(试剂配制和操作步骤) 这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体,并以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。 Western使用的探针是抗体,它与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合
细胞凋亡检测操作步骤之ELISA法
细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小
凯氏定氮法测粗蛋白的实验步骤和注意事项
食品中蛋白质含量的多少是评价粮油食品品质、营养价值的重要指标。测定某些粮食蛋白质的含量,可以做到充分发挥粮油资源的作用,促进合理用粮,节约用粮,对提高粮油资源的利用率具有重要的意义。 以凯氏定氮法为代表的测定含氮量换算蛋白质的方法操作简单、测定结果的准确度和精密度较高,适宜于测定任何形态(固体
凯氏定氮仪的使用步骤
蒸馏和吸收是在微量凯氏定氮仪内进行的。凯氏定氮蒸馏装置种类甚多,大体上都由蒸气发生、氨的蒸馏和氨的吸收三部分组成。1、仪器的洗涤仪器安装前,各部件需经一般方法洗涤干净,所用橡皮管、塞须浸在10%NaOH溶液中,煮约10min,水洗、水煮10min,再水洗数次,然后安装并固定在一只铁架台上。仪器使用前
凯氏定氮仪的使用步骤
蒸馏和吸收是在微量凯氏定氮仪内进行的。凯氏定氮蒸馏装置种类甚多,大体上都由蒸气发生、氨的蒸馏和氨的吸收三部分组成。1、仪器的洗涤仪器安装前,各部件需经一般方法洗涤干净,所用橡皮管、塞须浸在10%NaOH溶液中,煮约10min,水洗、水煮10min,再水洗数次,然后安装并固定在一只铁架台上。仪器使用前
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
凯氏定氮仪的使用步骤
蒸馏和吸收是在微量凯氏定氮仪内进行的。凯氏定氮蒸馏装置种类甚多,大体上都由蒸气发生、氨的蒸馏和氨的吸收三部分组成。1、仪器的洗涤仪器安装前,各部件需经一般方法洗涤干净,所用橡皮管、塞须浸在10%NaOH溶液中,煮约10min,水洗、水煮10min,再水洗数次,然后安装并固定在一只铁架台上。仪器使用前
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
凯氏定氮仪的使用步骤
蒸馏和吸收是在微量凯氏定氮仪内进行的。凯氏定氮蒸馏装置种类甚多,大体上都由蒸气发生、氨的蒸馏和氨的吸收三部分组成。1、仪器的洗涤仪器安装前,各部件需经一般方法洗涤干净,所用橡皮管、塞须浸在10%NaOH溶液中,煮约10min,水洗、水煮10min,再水洗数次,然后安装并固定在一只铁架台上。仪器使用前
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
凯氏定氮仪的使用步骤
蒸馏和吸收是在微量凯氏定氮仪内进行的。凯氏定氮蒸馏装置种类甚多,大体上都由蒸气发生、氨的蒸馏和氨的吸收三部分组成。1、仪器的洗涤仪器安装前,各部件需经一般方法洗涤干净,所用橡皮管、塞须浸在10%NaOH溶液中,煮约10min,水洗、水煮10min,再水洗数次,然后安装并固定在一只铁架台上。仪器使用前
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
关于免疫组化法的操作步骤介绍
1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 2.缓冲液洗 3min/2 次。 3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。 4. 缓冲液洗 5min/2 次。 5. 滴加 Ultra
DNA测序方法自动测序法的操作步骤
一、准备工作1. BigDye测序反应试剂盒 主要试剂是BigDye Mix,内含PEZL四色荧光标记的ddNTP和普通dNTP,AmpliTaq DNA polymerase FS,反应缓冲液等。2. pGEM-3Zf (+) 双链DNA对照模板 0.2 g/L,试剂盒配套试剂。3. M13(-2