制备互补DNA的方法和过程

制备互补DNA,往往需要先分离从目的基因转录来的mRNA.如果该基因编码的蛋白质是细胞中的主要蛋白质,则此基因的产物是总mRNA的主要组成部分。就胰岛B细胞而论,此细胞含有高水平胰岛素前体mRNA,后者有时可以沉淀正在翻译的mRNA的核糖核蛋白体,如果用特异抗体结合所表达的蛋白质(抗原),则可从沉淀的核糖体中分离出胰岛素特异的mRNA,一般特异mRNA只是细胞总mRNA中的次要成分。在这种情况下,不得不以密度梯度离心,按分子量大小把总mRNA分开,然后把分离开的mRNA直接用于试管中表达蛋白质(用家兔网织细胞的溶胞产物或小麦胚芽提取物作为翻译系统的诱导物)再用免疫沉淀或聚丙烯酰胺凝胶电泳从许多表达的蛋白中测定出目的蛋白,从而确定表达该蛋白的特异mRNA。......阅读全文

酵母DNA的小量制备

实验方法原理通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。实验材料酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液TE酵母

酵母DNA的小量制备

实验方法原理 通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。实验材料 酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒 异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液T

λ噬菌体DNA的制备

实验概要本实验介绍了λ噬菌体DNA的制备、操作步骤和注意事项。实验原理λ噬菌体是最早使用的克隆载体,λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子,它在宿主细胞有两种生活途径:其一是裂解生长,环状DNA   分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体颗粒,裂解宿主菌再进行下一次

氢化锆的制备方法和生产方法

制备方法将纯度为99.8%的海绵状金属锆与高纯度氢(99.9999%)加热至400~600℃,直接反应,即可制得。反应为放Chemicalbook热反应。或在氢气流中用氢化钙在600℃下还原二氧化锆,也可制得。生产方法将锆粉末在氢气流中于300~400℃反应就得到产品。

垂直电泳槽的样品制备和装载过程

    垂直电泳槽是用来对少量的核酸及蛋白质样品进行垂直电泳的装置,玻璃板与垫条的一体化设计确保垫条表面及垫条制胶密封端的平整,彻底防止漏液,适用于生物学研究中,对核酸、蛋白样品的分离、纯化、制备等。今天就让我们了解一下垂直电泳槽的样品制备和装载过程。    1、将试管插入至制冷恒温金属浴,以解冻冷

酵母DNA微量制备

实验概要本实验介绍了分别从40ml和5ml酵母培养液中制备酵母DNA的操作流程。实验步骤1. 酵母DNA微量制备(40ml)   1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。   2) 将上述培养物移入螺盖离心管,用医用离心机或Sorvall SS-

DNA测序原理和方法

DNA测序原理和方法DNA序列测定分手工测序和自动测序,手工测序包括Sanger双脱氧链终止法和Maxam-Gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。美国PE ABI公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA测序仪,其中310型是临床检测实

哺乳动物中制备基因组DNA实验——制备DNA

在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素,以保证DNA的完整性,为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp,可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取,常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提而实现的。实验材料动物组织试剂、

碱基互补配对原则的碱基互补的介绍

  在脱氧核糖核酸分子中,含氮碱基为腺嘌呤(A),鸟嘌呤(G),胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T)。每一种碱基与一个糖和一个磷酸结合形成一种核苷酸。在其双链螺旋结构中,磷酸-糖-磷酸-糖的序列,构成了多苷酸主链。在主链内侧连结着碱基,但一条链上的碱基必须与另一条链上的碱基以相对应的方式存在,即腺嘌呤对应胸

分子克隆技术(质粒DNA和DNA插入片段的制备、连接反应...2

PCR引物决定PCR的特异性,引物的设计就显得尤为重要。下面以已知DNA序列设计引物为例介绍设计引物应考虑的几个方面:1、GC比值:众所周知,碱基对中的GC之间有三条氢键,AT之间有两条氢键,GC和AT在引物序列中的合理比例是设定PCR中退火温度的重要依据。通常在一个引物中GC和AT各半即可。2、长

分子克隆技术(质粒DNA和DNA插入片段的制备、连接反应...1

克隆(Clone)是指通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。分子克隆(Molecular Cloning)是指由一个祖先分子复制生成的和祖先分子完全相同的分子群,发生在基因水平上的分子克隆称基因克隆(DNA克隆)。其基本原理是:将编码某一多肽或蛋白质的基因(外源基因)组装到细菌质粒(

金相试样的制备过程

一、过程简单地说分为:取样→镶嵌→磨光与抛光→侵蚀→观察照相等五个步骤二、注意事项1金相试片只应在砂轮侧面轻轻地磨制。当试片的厚度小于10mm时,应在镶嵌后再进行打磨。2严禁在磨片机旋转时更换砂纸、砂布。3试片打磨,抛光时应拿紧,并力求与磨面接触平稳。两人不得同时在一个旋转盘上操作。4腐蚀、电解金相

金相试样的制备过程

一、过程简单地说分为:取样→镶嵌→磨光与抛光→侵蚀→观察照相等五个步骤二、注意事项1金相试片只应在砂轮侧面轻轻地磨制。当试片的厚度小于10mm时,应在镶嵌后再进行打磨。2严禁在磨片机旋转时更换砂纸、砂布。3试片打磨,抛光时应拿紧,并力求与磨面接触平稳。两人不得同时在一个旋转盘上操作。4腐蚀、电解金相

碲化铋的应用和制备方法

应用用于半导体、电子冷冻和发电,碲化铋及其固溶体是研究的最早并且也是研究的最成熟的一种热电材料。晶体制备碲化铋块体材料可以用来加工成各种常用的器件,比较Chemicalbook常用的制备方法有:区熔法、布里奇曼法(Bridgeman)、单晶提拉法、等离子活化烧结法和热压烧结法,制备单晶材料常使用区熔

氧化铱的制备方法和用途

制备将铱粉末在空气或氧气中加热至107℃,或往沸腾的(IrCl6)2-溶液中小心加入强碱,生成蓝色沉淀,后者在真空中干燥,然后在350℃使其水合物在氮气中完全脱水可得。用途 用作光谱纯试剂

血清的分离制备方法和步骤

相信楼主分离血清是用于检测,而不是用于治疗。我告诉你一个简单实用的方法。我这个方法使用的器械主要就是一次性注射器。采血量看你需要的血清量来定,一般据我观察,释出的血清约为全血量的三分之一到二分之一这样。也就是你采5ml血可能得2.5ml左右的血清。当然了,必须说清楚的是能不能释出血清,因方法和猪个体

血清的分离制备方法和步骤

分离血清是用于检测,而不是用于治疗。我告诉你一个简单实用的方法。我这个方法使用的器械主要就是一次性注射器。采血量看你需要的血清量来定,一般据我观察,释出的血清约为全血量的三分之一到二分之一这样。也就是你采5ml血可能得2.5ml左右的血清。当然了,必须说清楚的是能不能释出血清,因方法和猪个体的不同,

简述乳浊液的制备方法和设备

  乳浊液制备时,按乳化剂的加入方式主要分为3种:①乳化剂在油中法。先将溶有乳化剂的油加热,然后在搅拌条件下加入温水,开始为W/O型乳浊液,再继续加水可得O/W型乳浊液。此法用于HLB值较小的乳化剂。②乳化剂在水中法。将乳化剂先溶于水,在搅拌条件下将油加入,此法先产生O/W型乳浊液,若欲得W/O型乳

硒化锰的制备和生产方法

制备CN201910696070.8提供一种多孔硒化锰微球,内部弥散分布着大量的孔洞,这些孔结构能够缓冲电极材料在循环过程中的体积变化,从而保障了材料的循环稳定性。制备方法包括如下步骤:在100mL水热反应釜中加入80mL乙醇胺,随后将0.39g硒粉、0.63gMnCl2·4H2O、0.8gKBH4

硒化铝的用途和制备方法

用途硒化铝是一种棕色粉末,相对密度3.437,不溶于酸。硒化铝在空气中不稳定,如与湿气相遇就分解为硒化氢和氢氧化铝。制法:用铝和硒在真空中加热反应而得。用途:用于制硒化氢及作半导体研究。应用硒化铝可用于制备硒化氢。硒化氢是一种可液化的严重有毒气体,用钢瓶充装。硒化氢气体主要用于合成无机或有机含硒化合

制备性色谱的目的和方法

制备性色谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶,色谱法能够在一步操作之内完成对混合物的分离,但是色谱法分离纯化的产量有限,只适合于实验室应用。

乙酰乙酸的制备方法和用途

制备方法一般都是在0°C时制备,而且现配现用。用途用于有机合成。

血清的分离制备方法和步骤

相信楼主分离血清是用于检测,而不是用于治疗。我告诉你一个简单实用的方法。我这个方法使用的器械主要就是一次性注射器。采血量看你需要的血清量来定,一般据我观察,释出的血清约为全血量的三分之一到二分之一这样。也就是你采5ml血可能得2.5ml左右的血清。当然了,必须说清楚的是能不能释出血清,因方法和猪个体

氧化镝的制备和提纯方法

纯化方法一种氧化镝的提取纯化方法,包括如下步骤:1、待提纯液配置:配置待提纯氧化镝混合溶液;2、中间剂配置:配置延缓剂和淋洗剂,延缓剂为Cu(NO3)2·3H2O、水和硝酸配置而成,淋洗剂为固体EDTA酸、水和氨水配置而成;3、分离柱准备:分离柱作为离子交换的载体;4、淋洗柱转型:对分离柱用步骤2中

铋酸钠的制备方法和用途

制备方法统制备铋酸钠的方法,主要是溴水氧化法,但这种方法得到的铋酸钠的纯度较低。Kumada等报道了用离子交换方法改进铋酸盐Chemicalbook的合成工艺,但这些合成方法需要几天的加热时间。用途用于钢铁分析中测定锰,氧化剂。铋酸钠用途用作分析试剂、氧化剂,还用于制药工业。

氨的制备方法和工艺介绍

合成氨的工艺分类:低压法、中压法、高压法。几种合成氨的工艺流程:KBR 工艺一般多用在以天然气为原料的大型合成氨装置中,也在煤化工中被广泛应用,采用卧式径向流氨合成塔内件,组合氨冷系统制冷。美国KBR工艺流程净化装置出口的氢气与来自空分获得的高纯度氮按摩尔比3:1进行混合,混合后的合成气在合成气压缩

化学取样的方法和过程

化学取样是指为测定矿体及其围岩、矿山生产的产品(如原矿、精矿)以及尾矿、废石以及与矿产有关岩石中的化学成分及其含量的取样工作。它包括化学样品采集、加工、分析及质量检查等取样工作的全过程。生产矿山中的化学取样主要在地下坑道、露天或地下采场和采下矿石中进行。

质粒DNA的大量制备实验

实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行,但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。实验材料 培养基菌株试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇乙酸钾异丙醇仪器、耗材 离心管实验

质粒DNA的小量制备实验

实验方法原理 碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 培养基试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇VTE仪器、耗材 平板实验步骤 1.  接种一个单菌落于5 ml无菌LB培养液中,在37°C培养至饱和状态(过夜)。2.  取1.5 ml培养液以最大转速离心20 S。弃上清。3.  沉淀用10

质粒DNA的大量制备实验

碱裂解法 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法 层析法             实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制